摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-14页 |
第一章 绪论 | 第14-27页 |
·卤醇脱卤酶简介 | 第14-18页 |
·三级结构和催化机制 | 第15-16页 |
·卤醇脱卤酶的分类 | 第16-17页 |
·卤醇脱卤酶发展趋势 | 第17-18页 |
·酶的定向进化 | 第18-25页 |
·母本基因的选择 | 第18-19页 |
·定向进化的策略 | 第19-23页 |
·随机突变 | 第19页 |
·体外基因重组 | 第19-23页 |
·理想突变体的选择 | 第23-25页 |
·论文研究内容 | 第25-27页 |
·卤醇脱卤酶 C 的定向进化 | 第25-26页 |
·卤醇脱卤酶 C 随机突变文库的筛选及分析 | 第26页 |
·卤醇脱卤酶 C 催化环氧化物开环反应的筛选方法的改进 | 第26-27页 |
第二章 卤醇脱卤酶 C(HHEC)随机突变文库的构建 | 第27-31页 |
·引言 | 第27页 |
·实验材料和方法 | 第27-29页 |
·实验材料及主要仪器 | 第27-28页 |
·主要试剂的配制 | 第28页 |
·HheC 随机突变文库的构建 | 第28-29页 |
·结果和讨论 | 第29-30页 |
·随机突变文库的构建 | 第29页 |
·突变文库质量的检测 | 第29-30页 |
·本章小结 | 第30-31页 |
第三章 卤醇脱卤酶 C(HHEC)随机突变文库的筛选及分析 | 第31-41页 |
·引言 | 第31页 |
·实验材料和方法 | 第31-35页 |
·实验材料 | 第31页 |
·主要溶液配制 | 第31-32页 |
·突变体文库的筛选 | 第32-33页 |
·良性突变体的活性检测 | 第33-34页 |
·氯离子标准曲线的测定 | 第33页 |
·蛋白质标准浓度曲线的绘制 | 第33-34页 |
·突变体活性检测 | 第34页 |
·阳性突变体文库的重组 | 第34-35页 |
·结果和讨论 | 第35-40页 |
·突变体文库筛选 | 第35页 |
·突变体反应速度及酶活力的比较 | 第35-37页 |
·突变位点分布及分析 | 第37-38页 |
·对映选择性的筛选 | 第38-39页 |
·良性突变体的重组 | 第39-40页 |
·本章小结 | 第40-41页 |
第四章 卤醇脱卤酶开环反应方法的改进 | 第41-52页 |
·引言 | 第41页 |
·实验材料和方法 | 第41-44页 |
·实验材料 | 第41-42页 |
·主要试剂的配制 | 第42页 |
·卤醇脱卤酶 C(HheC)的诱导表达 | 第42页 |
·高碘酸钠定量范围的确定 | 第42-43页 |
·突变体文库的筛选 | 第43页 |
·对不同环氧化物的活性比较 | 第43页 |
·气相检测 | 第43-44页 |
·结果和讨论 | 第44-50页 |
·实验条件的优化 | 第44-46页 |
·高碘酸钠滴定浓度的确定 | 第46-47页 |
·筛选底物的优化 | 第47-48页 |
·文库筛选结果以及 GC 验证 | 第48-50页 |
·本章小结 | 第50-52页 |
第五章 总结与展望 | 第52-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
攻硕期间的研究成果 | 第61-62页 |