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卤醇脱卤酶C(HheC)的分子定向进化研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-14页
第一章 绪论第14-27页
   ·卤醇脱卤酶简介第14-18页
     ·三级结构和催化机制第15-16页
     ·卤醇脱卤酶的分类第16-17页
     ·卤醇脱卤酶发展趋势第17-18页
   ·酶的定向进化第18-25页
     ·母本基因的选择第18-19页
     ·定向进化的策略第19-23页
       ·随机突变第19页
       ·体外基因重组第19-23页
     ·理想突变体的选择第23-25页
   ·论文研究内容第25-27页
     ·卤醇脱卤酶 C 的定向进化第25-26页
     ·卤醇脱卤酶 C 随机突变文库的筛选及分析第26页
     ·卤醇脱卤酶 C 催化环氧化物开环反应的筛选方法的改进第26-27页
第二章 卤醇脱卤酶 C(HHEC)随机突变文库的构建第27-31页
   ·引言第27页
   ·实验材料和方法第27-29页
     ·实验材料及主要仪器第27-28页
     ·主要试剂的配制第28页
     ·HheC 随机突变文库的构建第28-29页
   ·结果和讨论第29-30页
     ·随机突变文库的构建第29页
     ·突变文库质量的检测第29-30页
   ·本章小结第30-31页
第三章 卤醇脱卤酶 C(HHEC)随机突变文库的筛选及分析第31-41页
   ·引言第31页
   ·实验材料和方法第31-35页
     ·实验材料第31页
     ·主要溶液配制第31-32页
     ·突变体文库的筛选第32-33页
     ·良性突变体的活性检测第33-34页
       ·氯离子标准曲线的测定第33页
       ·蛋白质标准浓度曲线的绘制第33-34页
       ·突变体活性检测第34页
     ·阳性突变体文库的重组第34-35页
   ·结果和讨论第35-40页
     ·突变体文库筛选第35页
     ·突变体反应速度及酶活力的比较第35-37页
     ·突变位点分布及分析第37-38页
     ·对映选择性的筛选第38-39页
     ·良性突变体的重组第39-40页
   ·本章小结第40-41页
第四章 卤醇脱卤酶开环反应方法的改进第41-52页
   ·引言第41页
   ·实验材料和方法第41-44页
     ·实验材料第41-42页
     ·主要试剂的配制第42页
     ·卤醇脱卤酶 C(HheC)的诱导表达第42页
     ·高碘酸钠定量范围的确定第42-43页
     ·突变体文库的筛选第43页
     ·对不同环氧化物的活性比较第43页
     ·气相检测第43-44页
   ·结果和讨论第44-50页
     ·实验条件的优化第44-46页
     ·高碘酸钠滴定浓度的确定第46-47页
     ·筛选底物的优化第47-48页
     ·文库筛选结果以及 GC 验证第48-50页
   ·本章小结第50-52页
第五章 总结与展望第52-54页
致谢第54-55页
参考文献第55-61页
攻硕期间的研究成果第61-62页

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