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共表达型重组大肠杆菌不对称还原生产D-乳酸

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
第1章 文献综述第10-18页
   ·乳酸的性质第10-11页
   ·D-乳酸的用途第11-12页
     ·D-乳酸在高分子材料(聚乳酸)领域的应用第11页
     ·D-乳酸在农业领域的应用第11-12页
     ·D-乳酸在化学工业领域的应用第12页
   ·乳酸的生产方法第12-14页
     ·化学合成法第12页
     ·发酵法第12-13页
     ·同步糖化法生产D-乳酸第13-14页
     ·代谢途径改造对D-乳酸生产的影响第14页
   ·辅酶再生第14-17页
     ·化学法第15页
     ·酶法第15-16页
     ·电化学法第16-17页
     ·光化学法第17页
   ·论文的立题依据第17-18页
第2章 材料与方法第18-31页
   ·仪器与试剂第18-20页
     ·菌种与质粒第18页
     ·培养基第18页
     ·主要仪器第18-19页
     ·常用试剂第19-20页
   ·实验方法第20-31页
     ·共表达质粒的构建流程第20页
     ·引物设计第20-21页
     ·常规基因操作第21-23页
     ·DNA的琼脂糖凝胶电泳第23页
     ·细胞裂解液的制备第23页
     ·SDS-PAGE蛋白电泳检测第23-24页
     ·Bradford法测定蛋白浓度第24-25页
     ·葡萄糖脱氢酶酶活测定第25页
     ·乳酸脱氢酶酶活测定第25-26页
     ·高效液相色谱(HPLC)测定乳酸浓度第26-27页
     ·试剂盒法测定D-乳酸浓度第27-28页
     ·IPTG诱导条件研究第28-29页
     ·重组菌不对称还原反应及检测第29页
     ·全细胞化实验第29-31页
第3章 共表达型重组大肠杆菌的构建第31-40页
   ·葡萄糖脱氢酶和乳酸脱氢酶共表达质粒的构建第31-35页
     ·共表达质粒的构建第31-32页
     ·SDS-PAGE电泳检测第32-33页
     ·重组菌生长曲线测定第33-34页
     ·重组菌不对称还原反应及检测第34-35页
   ·诱导条件优化第35-39页
     ·诱导剂IPTG加入量的优化第35-36页
     ·诱导温度优化第36-37页
     ·诱导时长优化第37-38页
     ·诱导剂加入时间优化第38-39页
   ·小结第39-40页
第4章 共表达型重组大肠杆菌的全细胞转化第40-52页
   ·全细胞转化第40-42页
     ·全细胞转化的优势第40页
     ·LDH和GDH共同表达的必要性第40-42页
   ·全细胞转化条件优化第42-51页
     ·NAD~+对全细胞转化的影响第42-43页
     ·催化温度对全细胞转化的影响第43-44页
     ·缓冲液浓度对全细胞转化的影响第44-45页
     ·催化pH对全细胞转化的影响第45-47页
     ·细胞浓度对全细胞转化的影响第47-49页
     ·底物浓度对全细胞转化的影响第49-50页
     ·细胞回收利用第50-51页
   ·小结第51-52页
第5章 结论与展望第52-53页
   ·结论第52页
   ·展望第52-53页
参考文献第53-56页
致谢第56-57页
gdh和idh基因共表达重组大肠杆菌合成D-乳酸研究第57-67页
 摘要第57页
 Abstract第57-58页
 1材料第58-59页
 2方法第59-61页
 3结果第61-66页
 4讨论第66页
 参考文献第66-67页

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