摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
目录 | 第5-8页 |
前言 | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-19页 |
·鼠疫菌的致病机制 | 第9-10页 |
·鼠疫菌重要的毒力因子 | 第10-13页 |
·鼠疫菌与宿主细胞的相互作用 | 第13-14页 |
·鼠疫菌抵抗宿主的免疫系统 | 第13页 |
·机体对鼠疫菌的防御 | 第13-14页 |
·NF-ΚB 信号通路 | 第14-18页 |
·NF-κB/ IκB/IKK 组成结构及功能 | 第14-15页 |
·NF-κB 信号通路的激活 | 第15-16页 |
·NF-κB 的修饰 | 第16-18页 |
·NF-κB 的生物学功能 | 第18页 |
·本研究的主要内容与意义 | 第18-19页 |
·本研究的主要内容 | 第18页 |
·本研究的意义 | 第18-19页 |
第二章 材料与方法 | 第19-26页 |
·主要的仪器设备 | 第19页 |
·实验相关溶液 | 第19-20页 |
·细菌培养相关溶液 | 第19页 |
·细胞培养相关溶液 | 第19页 |
·Western-Blot 相关试剂 | 第19页 |
·细胞裂解溶液 | 第19页 |
·核蛋白提取相关溶液 | 第19-20页 |
·实验材料 | 第20-21页 |
·细胞株 | 第20页 |
·菌株、载体 | 第20页 |
·试剂 | 第20-21页 |
·实验方法 | 第21-26页 |
·常用细胞培养条件 | 第21页 |
·细胞总蛋白的提取 | 第21页 |
·细胞核蛋白的提取 | 第21页 |
·免疫印迹 | 第21页 |
·提取 RNA | 第21-22页 |
·RT-PCR | 第22页 |
·构建重组质粒 | 第22页 |
·普通转染 | 第22页 |
·电转 | 第22-23页 |
·流式检测细胞周期 | 第23页 |
·流式检测细胞凋亡 | 第23页 |
·流式检测细胞 ROS | 第23页 |
·Hochest 染色 | 第23页 |
·报告基因实验 | 第23-24页 |
·免疫共沉淀(CO-IP) | 第24页 |
·GST-Pull Down | 第24页 |
·间接免疫(荧光共聚焦) | 第24页 |
·泛素化 | 第24-25页 |
·蛋白稳定性实验 | 第25页 |
·统计学处理 | 第25-26页 |
第三章 结果与讨论 | 第26-79页 |
·YOPE 与 P65 存在相互作用 | 第26-28页 |
·外源 YopE 与 p65 免疫共沉淀 | 第26-27页 |
·半内源 YopE 与 p65 免疫共沉淀 | 第27-28页 |
·YOPE 与 P65 相互作用在可诱导表达系统中的验证 | 第28-38页 |
·可诱导表达载体的构建 | 第28-29页 |
·稳定和优化诱导表达条件 | 第29-32页 |
·YopE/YopE(R144A)对 HeLa 细胞生物学功能的影响 | 第32-36页 |
·YopE 与 p65 的相互作用 | 第36-38页 |
·YOPE 与 P65 的相互作用结构域 | 第38-42页 |
·YOPE 激活 NF-ΚB 通路的方式 | 第42-47页 |
·双荧光素酶报告基因检测系统的建立 | 第42-43页 |
·YopE 不依赖 GAP 活性激活 NF-κB 通路 | 第43-47页 |
·YOPE 促进 P65 入核 | 第47-50页 |
·YOPE 上调 NF-ΚB 下游靶基因表达 | 第50-57页 |
·YOPE 激活 NF-ΚB 依赖于 P65 | 第57-59页 |
·NF-ΚB 在 YOPE 诱导细胞凋亡中的作用 | 第59-71页 |
·BAY 诱导 HepG2 细胞凋亡 | 第59-60页 |
·YopE(R144A) 拮抗 BAY 诱导的细胞凋亡 | 第60-61页 |
·YopE 促进 NF-κB 抑制的细胞凋亡 | 第61-65页 |
·BAY 诱导 Raw264.7 细胞凋亡 | 第65-66页 |
·Raw264.7 细胞电转条件的优化 | 第66-68页 |
·YopE(R144A)拮抗 BAY 诱导的 Raw264.7 细胞凋亡 | 第68页 |
·YopE 促进 NF-κB 抑制的 Raw264.7 细胞凋亡 | 第68-71页 |
·YOPE 促进 P65 与 IΚBΑ的解离 | 第71-74页 |
·YOPE 提高 P65 蛋白的稳定性 | 第74-76页 |
·YOPE 与 A20 的关系 | 第76-77页 |
·小结 | 第77-79页 |
第四章 结论与展望 | 第79-80页 |
·结论 | 第79页 |
·展望 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-87页 |
附录 | 第87-92页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第92-93页 |
致谢 | 第93页 |