| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 1 材料与方法 | 第12-32页 |
| ·材料 | 第12-15页 |
| ·菌株、细胞株和质粒 | 第12页 |
| ·实验用品 | 第12页 |
| ·主要仪器 | 第12-13页 |
| ·主要试剂 | 第13页 |
| ·主要试剂的配制 | 第13-15页 |
| ·方法 | 第15-32页 |
| ·载体构建 | 第15-23页 |
| ·细胞培养 | 第23-25页 |
| ·细胞转染 | 第25-26页 |
| ·蹄选稳定单克隆细胞株 | 第26-27页 |
| ·附着体载体的检测 | 第27-30页 |
| ·附着体载体拷贝数的检测 | 第30-32页 |
| ·报告基因egfp的表达量分析 | 第32页 |
| 2 结果 | 第32-46页 |
| ·人工合成的MAR序列图谱 | 第32-33页 |
| ·pEGFP-C1-MAR载体的构建及酶切、测序鉴定 | 第33-36页 |
| ·最低致死剂量G418浓度的确定 | 第36页 |
| ·CHO细胞和N-2a细胞稳定单克隆细胞株的筛选 | 第36-38页 |
| ·PCR鉴定 | 第38-40页 |
| ·测序分析 | 第40-43页 |
| ·附着状态及低拷贝数分析 | 第43页 |
| ·CHO和N-2a细胞中报告基因egfp的表达量分析 | 第43-46页 |
| 3 讨论 | 第46-50页 |
| ·MAR序列的特征与功能 | 第46-47页 |
| ·MAR序列介导载体转基因表达的影响因素 | 第47-48页 |
| ·MAR序列介导转基因egfp高表达的可能机制 | 第48页 |
| ·MAR序列介导质粒附着存在及其可能作用机制 | 第48-49页 |
| ·进一步的研究工作 | 第49页 |
| ·MAR序列介导的附着载体的前临床应用 | 第49-50页 |
| 4 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 综述 | 第57-67页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 附录 | 第67-69页 |
| 攻读学位期间发表文章情况 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 个人简历 | 第71页 |