| Abstract | 第1-4页 |
| 摘要 | 第4-5页 |
| Contents | 第5-8页 |
| Abbreviations | 第8-9页 |
| PART A: FEASIBILITY OF USING STABLE UGFP‐DK1 CELL LINE AS A REPLACEMENT OF MTT ASSAY IN ANTI‐CANCER DRUG SCREENING | 第9-31页 |
| INTRODUCTION | 第10-18页 |
| ·ANTICANCER DRUG SCREENING | 第10-11页 |
| ·Drug Discovery | 第10页 |
| ·Drug Screening | 第10-11页 |
| ·CELL‐BASED ANTICANCER DRUG SCREENING SYSTEMS | 第11-14页 |
| ·Viability Assays | 第11-13页 |
| ·Cytotoxicity Assays | 第13-14页 |
| ·THE GFP ASSAY | 第14-17页 |
| ·Green Fluorescent Protein | 第14-15页 |
| ·GFP Assay | 第15-16页 |
| ·GFP and Drug Screening | 第16-17页 |
| ·THE NEW GREEN FLUORESCENCE PROTEIN ASSAY | 第17-18页 |
| ·Principle | 第17页 |
| ·Features of New GFP Assay | 第17-18页 |
| MATERIALS AND METHODS | 第18-22页 |
| ·MATERIALS REQUIRED | 第18-19页 |
| ·Cell lines | 第18页 |
| ·Media, Solutions and Reagents | 第18页 |
| ·Apparatus and Equipment | 第18-19页 |
| ·METHODS AND PROTOCOLS | 第19-22页 |
| ·Production of stable UGFP‐DK1 cell line | 第19页 |
| ·MTT Assay | 第19页 |
| ·Fluorescence Assay | 第19-21页 |
| ·IC50 Determination | 第21-22页 |
| RESULTS AND DISCUSSIONS | 第22-30页 |
| ·DEVELOPMENT OF UGFP‐DK1 CELL LINE | 第22-23页 |
| ·GROWTH CURVES USING THE GREEN FLUORESCENCE PROTEIN (GFP) ASSAY | 第23-24页 |
| ·THE GFP ASSAY’S RESPONSE TO ANTICANCER DRUG | 第24-25页 |
| ·OPTIMIZATION OF THE GFP ASSAY | 第25-26页 |
| ·RELIABILITY OF THE GFP ASSAY | 第26-28页 |
| ·SENSITIVITY OF THE GFP ASSAY | 第28-29页 |
| ·IC50 DETERMINATION | 第29-30页 |
| CONCLUSION | 第30-31页 |
| PART B: USING UGFP‐DK1 ASSAY TO FACILITATE THE DISCOVERY OF A NOVEL SERM WITH ANTICANCER ACTIVITIES THAT ACTS THROUGH HTERT | 第31-69页 |
| INTRODUCTION | 第32-42页 |
| ·CANCER DRUG | 第32-36页 |
| ·Research and Development | 第32-33页 |
| ·Hallmarks of Cancer | 第33-34页 |
| ·New Mechanistic Approach for Drug Development | 第34-36页 |
| ·SERMS | 第36-39页 |
| ·What are SERMs? | 第36-37页 |
| ·MECHANISM OF ACTION | 第37-39页 |
| ·COMPOUND 11 | 第39-40页 |
| ·Structure and Properties | 第39页 |
| ·Compound 11 as a SERM | 第39-40页 |
| ·HTERT | 第40-42页 |
| ·Telomere and Telomerase | 第40页 |
| ·hTERT and Cancer | 第40-42页 |
| MATERIALS AND METHODS | 第42-51页 |
| ·MATERIALS REQUIRED | 第42-45页 |
| ·Cell lines | 第42页 |
| ·Reagents and Buffers | 第42-45页 |
| ·METHODOLOGY | 第45-51页 |
| ·Morphology Studies | 第45页 |
| ·Apoptosis Studies by PI and DAPI Staining | 第45页 |
| ·Luciferase Assay | 第45-46页 |
| ·Western Blot | 第46-47页 |
| ·Immunofluorescence | 第47-48页 |
| ·Cell Cycle Analysis by DNA content (PI) using Flow Cytometry | 第48-49页 |
| ·In vivo Study | 第49-51页 |
| RESULTS AND DISCUSSIONS | 第51-67页 |
| ·SCREENING OF SERMS USING FLUORESCENCE ASSAY | 第51-52页 |
| ·MORPHOLOGICAL STUDIES | 第52-55页 |
| ·CELL CYCLE ANALYSIS | 第55-58页 |
| ·MECHANISM OF ACTION OF COMPOUND 11 | 第58-63页 |
| ·PROLIFERATION RESPONSE TO ESTRADIOL BY SKOV3 AND MCF7 CELL LINES | 第58页 |
| ·Compound 11 is a Modulator of ERE and GRE | 第58-60页 |
| ·Identification of various pathways influenced by Compound 11 | 第60-62页 |
| ·COMPOUND 11 CHANGES THE HTERT PROTEIN EXPRESSION | 第62-63页 |
| ·IMMUNOFLUORESCENCE | 第63-64页 |
| ·ANIMAL MODEL STUDY | 第64-67页 |
| CONCLUSION | 第67-69页 |
| REFERENCES | 第69-76页 |
| ACKNOWLEDGEMENTS | 第76-78页 |
