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喹噁啉类对敏感大肠杆菌基因和蛋白质表达的影响研究

摘要第1-11页
Abstract第11-15页
缩略语表第15-16页
1 前言第16-20页
   ·立题依据第16页
   ·国内外研究现状与发展趋势第16-19页
   ·目的意义第19-20页
2 材料与方法第20-36页
   ·实验菌株及来源第20页
   ·主要试剂及来源第20-21页
   ·主要试剂配制第21-23页
   ·主要仪器及来源第23-24页
   ·药物作用合适浓度和时间的测定第24-25页
     ·最低抑菌浓度和最低杀菌浓度的测定第24-25页
     ·大肠杆菌生长曲线的测定第25页
     ·喹赛多抑菌和杀菌曲线的测定第25页
     ·喹乙醇抑菌和杀菌曲线的测定第25页
   ·药物作用后差异基因的检测(基因芯片)第25-29页
     ·细菌总RNA提取第25-26页
     ·芯片检测cDNA合成与芯片杂交第26-27页
     ·基因芯片的数据分析第27-28页
     ·Real-Time PCR验证部分差异基因第28-29页
   ·大肠杆菌蛋白质二维电泳条件优化第29-34页
     ·大肠杆菌蛋白的提取第29-30页
     ·二维凝胶电泳第30-33页
     ·蛋白点的胶内酶解和质谱鉴定第33-34页
   ·药物作用后大肠杆菌差异蛋白的筛选第34-36页
     ·药物作用后蛋白质的提取第34页
     ·二维电泳和差异蛋白点的检测第34-35页
     ·差异蛋白点的酶解与MALDI-TOF质谱鉴定第35-36页
3 结果与分析第36-76页
   ·药物作用合适的浓度和时间第36-39页
     ·不同大肠杆菌对喹赛多和喹乙醇的敏感性第36页
     ·细菌加药的最适时间第36-37页
     ·喹赛多作用的最佳浓度第37-38页
     ·喹乙醇作用的最佳浓度第38-39页
   ·喹赛多和喹乙醇作用后大肠杆菌的差异基因分析(基因芯片)第39-65页
     ·大肠杆菌的总RNA质量第39-40页
     ·芯片质量与结果的可靠性分析第40-42页
     ·喹赛多作用后的大肠杆菌差异表达基因第42-58页
     ·喹乙醇作用后的大肠杆菌差异表达基因第58-63页
     ·喹赛多和喹乙醇共同的差异表达基因第63页
     ·实时荧光定量PCR验证芯片结果第63-65页
   ·大肠杆菌蛋白质二维电泳体系的建立第65-68页
     ·不同样品提取方法下蛋白质的分离情况(银染)第65页
     ·不同样品提取方法下蛋白质的分离情况(考染)第65-66页
     ·等电聚焦程序改良后的蛋白质分离情况第66页
     ·蛋白点的分离与质谱鉴定分析第66-68页
   ·药物作用后差异蛋白的检测(宽范围胶条)第68-71页
     ·二维电泳凝胶上差异蛋白点的检测第68-69页
     ·差异蛋白点的鉴定分析第69-71页
   ·药物作用后差异蛋白的检测(窄范围胶条)第71-76页
     ·二维电泳凝胶上差异蛋白点的检测第71-73页
     ·差异蛋白点的鉴定分析第73-76页
4 讨论第76-83页
   ·喹赛多和喹乙醇对大肠杆菌基因表达的影响第76-78页
   ·喹赛多和喹乙醇对大肠杆菌蛋白质表达的影响第78-83页
5 全文总结第83-84页
6 文献综述第84-98页
参考文献第98-106页
致谢第106-107页
附录1---研究生简介第107-108页
附录2—原始数据第108-125页
答辩委员提问与回答第125-126页

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