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ATG4B蛋白调节早期断奶仔猪线粒体自噬的研究

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
缩略语表(Abbreviation)第11-12页
第一章 文献综述第12-23页
   ·仔猪早期断奶措施的优点第12-13页
     ·提高母猪繁殖能力第12页
     ·提高饲料利用率,降低仔猪生产成本第12页
     ·有效地控制疾病第12页
     ·提高设备利用率第12-13页
   ·早期断奶应激对仔猪的影响第13-14页
     ·早期断奶应激对仔猪消化生理的影响第13-14页
       ·早期断奶应激对仔猪消化器官发育的影响第13页
       ·早期断奶应激对仔猪消化酶活性的影响第13-14页
       ·早期断奶应激对仔猪肠道结构和功能的影响第14页
     ·早期断奶应激对仔猪免疫力的影响第14页
   ·细胞自噬在出生应激中具有重要作用第14-15页
   ·细胞自噬简介第15-19页
     ·自噬的常规分类及其发生过程第16-17页
       ·大自噬第16页
       ·小自噬第16页
       ·分子伴侣介导的自噬第16-17页
     ·线粒体自噬第17-19页
       ·酵母细胞中的线粒体自噬第18页
       ·哺乳动物细胞中的线粒体自噬第18-19页
     ·自噬在多种应激中的作用第19页
   ·Atg4B蛋白在自噬体形成过程中的重要作用第19-20页
   ·蛋白质-蛋白质相互作用的研究方法第20-22页
     ·免疫共沉淀技术第21页
     ·串联亲和纯化技术第21-22页
   ·本研究的目的和意义第22-23页
第二章 材料和方法第23-34页
   ·试验材料第23-25页
     ·试验动物第23页
     ·细胞系、菌种与质粒第23页
     ·主要药品及试剂第23-24页
     ·主要培养基及其配制第24页
     ·试验缓冲液及其配制第24-25页
       ·蛋白酶抑制剂第24页
       ·Western Blot相关缓冲液第24-25页
       ·其他缓冲液第25页
   ·试验方法第25-34页
     ·动物试验设计第25-26页
     ·动物样品的采集第26页
     ·血液生理生化指标的测定第26页
       ·血液常规生理指标的测定第26页
       ·血液中相关生化指标的测定第26页
     ·免疫组化第26-27页
     ·透射电镜试验第27-28页
     ·细胞培养第28页
       ·细胞复苏第28页
       ·细胞传代第28页
       ·细胞冻存第28页
     ·SDS-PAGE/Western Blot第28-29页
     ·质粒的提取与细胞转染第29-31页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法)第29-30页
       ·质粒的转化第30页
       ·质粒的小量制备(试剂盒)第30-31页
       ·质粒转染细胞(脂质体介导法)第31页
       ·转染效率的检测第31页
     ·饥饿应激下Atg4B及其相互作用蛋白的研究第31-32页
       ·Atg4B蛋白的诱导表达第31-32页
       ·TAP技术筛选Atg4B蛋白的相互作用蛋白第32页
     ·流式细胞术第32-33页
       ·饥饿诱导线粒体膜电位变化的检测第32页
       ·饥饿诱导自噬溶酶体数量变化的检测第32-33页
     ·统计学方法第33-34页
第三章 结果与分析第34-49页
   ·早期断奶应激对仔猪血液生理生化指标的影响第34-35页
     ·早期断奶应激对仔猪血液生理指标的影响第34-35页
     ·早期断奶应激对仔猪血液相关生化指标的影响第35页
   ·仔猪早期断奶应激诱导自噬发生的研究第35-38页
     ·自噬相关蛋白的检测第35-37页
     ·透射电镜观察自噬泡的产生第37-38页
   ·Atg4B蛋白在自噬发生过程中表达量的变化第38-39页
   ·饥饿应激诱导NRK细胞自噬的发生第39-40页
   ·饥饿应激下Atg4B蛋白及其相互作用蛋白的研究第40-43页
     ·转染后Atg4B蛋白表达量的检测第40-41页
     ·TAP技术筛选Atg4B蛋白的相互作用蛋白第41-43页
   ·饥饿应激诱导线粒体自噬发生的研究第43-49页
     ·饥饿应激引起线粒体受损第43-45页
       ·饥饿应激对线粒体氧化呼吸功能的影响第43-44页
       ·饥饿应激对线粒体膜电位的影响第44-45页
     ·CsA抑制饥饿应激下自噬溶酶体的产生第45-49页
第四章 讨论与小结第49-54页
   ·早期断奶应激对仔猪血液生理指标的影响第49页
   ·早期断奶应激对仔猪血液生化指标的影响第49-50页
   ·自噬在仔猪早期断奶应激中的作用第50-51页
   ·Atg4B在自噬过程中具有重要作用第51页
   ·饥饿应激诱导的自噬中,与Atg4B相互作用的蛋白质的筛选第51-52页
   ·饥饿应激诱导线粒体自噬的发生第52-53页
   ·结论第53-54页
参考文献第54-61页
致谢第61-62页
附录 在读期间发表论文第62页

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