| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 ：文献综述 | 第12-27页 |
| 第一部分 miRNA 综述 | 第12-22页 |
| 1 小 RNA 简介 | 第12-14页 |
| ·microRNA | 第12-13页 |
| ·siRNA | 第13页 |
| ·piRNA | 第13-14页 |
| 2 miRNA 的生成及作用机制 | 第14-15页 |
| 3 siRNA 的生成及作用机制 | 第15-17页 |
| 4 miRNA 与 siRNA 比较 | 第17页 |
| 5 植物体内 miRNA 的特性 | 第17-18页 |
| 6 miRNA 的功能 | 第18-20页 |
| ·miRNA 在动物中的功能 | 第18-19页 |
| ·miRNA 在植物中的功能 | 第19-20页 |
| 7 siRNA 与 miRNA 生成及作用过程中涉及的两种重要蛋白 | 第20-22页 |
| ·Argonaute | 第20-21页 |
| ·Dicer | 第21-22页 |
| 第二部分 微藻转基因综述 | 第22-27页 |
| 1 核转化方法 | 第23页 |
| 2 各种微藻的转化 | 第23-24页 |
| 3 载体构建和转化 | 第24-25页 |
| 4 密码子使用 | 第25页 |
| 5 外源基因的遗传稳定性 | 第25-26页 |
| 6 转基因微藻的应用 | 第26-27页 |
| 第二章 海洋微拟球藻中 microRNA 的测序鉴定 | 第27-43页 |
| 1 试剂与仪器 | 第27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-33页 |
| ·藻种来源及培养 | 第27-28页 |
| ·藻种分离纯化 | 第28-29页 |
| ·海洋微拟球藻总 RNA 提取 | 第29-30页 |
| ·小 RNA 文库制备 | 第30-31页 |
| ·反转录和扩增小 RNA | 第31-32页 |
| ·扩增后 cDNA 的纯化 | 第32-33页 |
| 3 结果 | 第33-39页 |
| ·藻种纯化 | 第33-34页 |
| ·总 RNA 提取 | 第34页 |
| ·小 RNA 文库制备 | 第34-35页 |
| ·数据概况 | 第35-39页 |
| 4 讨论 | 第39-43页 |
| ·预测 miRNA | 第39-40页 |
| ·miRNA 5’末端碱基偏好性 | 第40-43页 |
| 第三章 海洋微拟球藻转基因体系的建立 | 第43-58页 |
| 1 试剂与仪器 | 第43页 |
| 2 材料和方法 | 第43-52页 |
| ·基础质粒 | 第43-45页 |
| ·pCJ901 的构建 | 第45-48页 |
| ·pCJ901-eGFP 的构建 | 第48-50页 |
| ·pCJ901-eGFP 质粒的线性化 | 第50页 |
| ·原生质体的制备与点击转化 | 第50-51页 |
| ·转基因藻株培养 | 第51-52页 |
| 3 结果 | 第52-56页 |
| ·pCJ901 载体构建结果 | 第52页 |
| ·PCR 检测 ble 基因 | 第52-53页 |
| ·PCR 检测 eGFP 基因 | 第53-54页 |
| ·转基因海洋微拟球藻的显微镜观察 | 第54-56页 |
| 4 讨论 | 第56-58页 |
| 总结与展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 致谢 | 第64-66页 |
| 个人简历 | 第66页 |
| 已发表文章 | 第66页 |