摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
英文缩写词 | 第6-10页 |
第1章 绪论 | 第10-20页 |
·艾滋病概况 | 第10-12页 |
·HIV 结构 | 第10-11页 |
·抗 HIV 治疗 | 第11-12页 |
·HIV-1 Tat 研究进展 | 第12-14页 |
·Tat 蛋白的结构 | 第12页 |
·Tat的功能 | 第12-13页 |
·Tat介导的HIV的转录过程中的乙酰化与去乙酰化 | 第13-14页 |
·SIRT1研究进展 | 第14-15页 |
·SIRT1简介 | 第14-15页 |
·Tat与SIRT1的相互作用 | 第15页 |
·MicroRNAs与HIV-1感染复制的研究进展 | 第15-17页 |
·尼克酰胺磷酸核糖转移酶简介 | 第17-18页 |
·研究目的与内容 | 第18-20页 |
第2章 microRNAs与SIRT1作用影响HIV-1的转录 | 第20-46页 |
引言 | 第20-21页 |
·实验材料 | 第21-24页 |
·菌株、质粒与细胞株 | 第21页 |
·工具酶与试剂 | 第21页 |
·相关材料 | 第21-22页 |
·主要仪器 | 第22页 |
·配制溶液 | 第22-24页 |
·实验方法 | 第24-34页 |
·Targetscan、miRbase等数据库筛选一SIRT1和Nampt为靶标的microRNAs | 第24页 |
·microRNAs及Tat对细胞进行转染 | 第24-28页 |
·转染后mRNA水平检测 | 第28-31页 |
·转染后Western Blot蛋白水平检测 | 第31-33页 |
·统计学处理 | 第33-34页 |
·实验结果 | 第34-43页 |
·数据库中作用于SIRT1的microRNAs的分析 | 第34页 |
·SIRT1 mRNA拷贝数相对定量 | 第34-37页 |
·蛋白定量结果 | 第37页 |
·Western Blot检测SIRT1蛋白表达 | 第37-41页 |
·转染后NF-κB p65蛋白表达发生变化 | 第41-43页 |
·讨论 | 第43-44页 |
·mRNA水平检测microRNA对SIRT1的作用 | 第43页 |
·蛋白水平抑制作用的检测 | 第43-44页 |
·本章小结 | 第44-46页 |
第3章 Nampt/SIRT1对HIV-1LTR的作用 | 第46-56页 |
引言 | 第46-47页 |
·实验材料(略,同 2.1) | 第47页 |
·实验方法 | 第47-49页 |
·细胞培养转染及活性评定 | 第47页 |
·NAD~+实验 | 第47页 |
·SIRT1活性测定 | 第47页 |
·免疫印迹试验 | 第47-48页 |
·Nampt及SIRT1沉默实验 | 第48页 |
·RT-PCR | 第48页 |
·MAGI细胞实验 | 第48页 |
·数据统计处理 | 第48-49页 |
·实验结果 | 第49-53页 |
·Tat 导致NAD~+水平的下降并抑制胞内 MAGI 细胞中 SIRT1 活性、Nampt mRNA及蛋白表达 | 第49-50页 |
·Tat 通过抑制Nampt的表达抑制 SIRT1 的活性 | 第50页 |
·白藜芦醇可以逆转Tat介导的 Nampt 及 NAD+的抑制 | 第50-51页 |
·在MAGI细胞中Tat介导LTR反式激活作用涉及Nampt的参与 | 第51-53页 |
·讨论 | 第53-54页 |
·本章小结 | 第54-56页 |
第4章 MiR-182通过影响Nampt调控HIV-1的转录 | 第56-64页 |
引言 | 第56页 |
·实验材料 | 第56-57页 |
·实验方法 | 第57页 |
·实验结果 | 第57-61页 |
·转染miR-182后SIRT1mRNA拷贝数相对定量 | 第57-58页 |
·转染miR-182后Nampt蛋白表达降低 | 第58-59页 |
·转染miR-182后SIRT1蛋白表达下降 | 第59-60页 |
·转染miR-182后乙酰化p65蛋白表达升高 | 第60-61页 |
·讨论 | 第61页 |
·本章小结 | 第61-64页 |
结论 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-72页 |
攻读硕士学位期间所发表的学术论文 | 第72-74页 |
致谢 | 第74页 |