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作用于SIRT1和NAMPT的microRNAs调节HIV-1TAT的转录激活

摘要第1-5页
Abstract第5-6页
英文缩写词第6-10页
第1章 绪论第10-20页
   ·艾滋病概况第10-12页
     ·HIV 结构第10-11页
     ·抗 HIV 治疗第11-12页
   ·HIV-1 Tat 研究进展第12-14页
     ·Tat 蛋白的结构第12页
     ·Tat的功能第12-13页
     ·Tat介导的HIV的转录过程中的乙酰化与去乙酰化第13-14页
   ·SIRT1研究进展第14-15页
     ·SIRT1简介第14-15页
     ·Tat与SIRT1的相互作用第15页
   ·MicroRNAs与HIV-1感染复制的研究进展第15-17页
   ·尼克酰胺磷酸核糖转移酶简介第17-18页
   ·研究目的与内容第18-20页
第2章 microRNAs与SIRT1作用影响HIV-1的转录第20-46页
 引言第20-21页
   ·实验材料第21-24页
     ·菌株、质粒与细胞株第21页
     ·工具酶与试剂第21页
     ·相关材料第21-22页
     ·主要仪器第22页
     ·配制溶液第22-24页
   ·实验方法第24-34页
     ·Targetscan、miRbase等数据库筛选一SIRT1和Nampt为靶标的microRNAs第24页
     ·microRNAs及Tat对细胞进行转染第24-28页
     ·转染后mRNA水平检测第28-31页
     ·转染后Western Blot蛋白水平检测第31-33页
     ·统计学处理第33-34页
   ·实验结果第34-43页
     ·数据库中作用于SIRT1的microRNAs的分析第34页
     ·SIRT1 mRNA拷贝数相对定量第34-37页
     ·蛋白定量结果第37页
     ·Western Blot检测SIRT1蛋白表达第37-41页
     ·转染后NF-κB p65蛋白表达发生变化第41-43页
   ·讨论第43-44页
     ·mRNA水平检测microRNA对SIRT1的作用第43页
     ·蛋白水平抑制作用的检测第43-44页
   ·本章小结第44-46页
第3章 Nampt/SIRT1对HIV-1LTR的作用第46-56页
 引言第46-47页
   ·实验材料(略,同 2.1)第47页
   ·实验方法第47-49页
     ·细胞培养转染及活性评定第47页
     ·NAD~+实验第47页
     ·SIRT1活性测定第47页
     ·免疫印迹试验第47-48页
     ·Nampt及SIRT1沉默实验第48页
     ·RT-PCR第48页
     ·MAGI细胞实验第48页
     ·数据统计处理第48-49页
   ·实验结果第49-53页
     ·Tat 导致NAD~+水平的下降并抑制胞内 MAGI 细胞中 SIRT1 活性、Nampt mRNA及蛋白表达第49-50页
     ·Tat 通过抑制Nampt的表达抑制 SIRT1 的活性第50页
     ·白藜芦醇可以逆转Tat介导的 Nampt 及 NAD+的抑制第50-51页
     ·在MAGI细胞中Tat介导LTR反式激活作用涉及Nampt的参与第51-53页
   ·讨论第53-54页
   ·本章小结第54-56页
第4章 MiR-182通过影响Nampt调控HIV-1的转录第56-64页
 引言第56页
   ·实验材料第56-57页
   ·实验方法第57页
   ·实验结果第57-61页
     ·转染miR-182后SIRT1mRNA拷贝数相对定量第57-58页
     ·转染miR-182后Nampt蛋白表达降低第58-59页
     ·转染miR-182后SIRT1蛋白表达下降第59-60页
     ·转染miR-182后乙酰化p65蛋白表达升高第60-61页
   ·讨论第61页
   ·本章小结第61-64页
结论第64-66页
参考文献第66-72页
攻读硕士学位期间所发表的学术论文第72-74页
致谢第74页

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