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APOBEC3G突变体抗HIV-1活性研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-6页
英文缩写词第6-10页
第1章 绪论第10-18页
   ·HIV 概况第10-11页
     ·HIV 病毒第10页
     ·抗 HIV-1 治疗第10-11页
   ·APOBEC3G 的研究进展第11-17页
     ·APOBEC3G 的结构第11-12页
     ·APOBEC3G 的抗 HIV-1 作用机制第12-13页
     ·APOBEC3G 发挥抗病毒作用的前提是被包入毒粒第13-14页
     ·Vif 拮抗 APOBEC3G 的抗病毒作用第14-16页
     ·基于 APOBEC3G-Vif 相互作用为治疗靶点的研究第16-17页
   ·研究目的及内容第17页
   ·研究技术路线第17-18页
第2章 APOBEC3G 突变体的构建及表达第18-36页
   ·实验材料第18-20页
     ·菌株与质粒第18页
     ·细胞株第18页
     ·细胞培养的相关材料第18页
     ·工具酶与试剂第18页
     ·序列的设计合成与测序第18-19页
     ·主要仪器第19页
     ·溶液的配制第19-20页
   ·实验方法第20-29页
     ·利用重叠 PCR 的方法在 APOBEC3G 基因特定位置进行定点突变第20-26页
     ·突变基因 APOBEC3G D128K/D128R 真核表达载体的构建第26-28页
     ·细胞培养第28页
     ·野生型及突变型 GFP-A3G 融合蛋白在真核细胞中的亚细胞定位第28-29页
   ·实验结果第29-34页
     ·重叠 PCR 扩增结果第29-30页
     ·pGEM-T-A3G D128K、pGEM-T- A3G D128R 重组质粒的鉴定第30-31页
     ·重组质粒 pEGFP-A3G D128K、pEGFP-A3G D128R 的鉴定第31-32页
     ·野生型及突变型 GFP-A3G 融合蛋白的表达与亚细胞定位第32-34页
   ·讨论第34页
   ·本章小结第34-36页
第3章 突变型 APOBEC3G 对 HIV-1 假病毒感染的抵抗作用第36-50页
   ·实验材料第36-37页
     ·细胞株和质粒第36页
     ·细胞培养的相关材料第36页
     ·工具酶与试剂第36页
     ·主要仪器第36-37页
     ·其他溶液的配制第37页
   ·实验方法第37-44页
     ·细胞培养第37页
     ·Western Blot第37-39页
     ·Real-time PCR第39-42页
     ·HIV-1 假病毒包装能力和感染力的测定第42-44页
   ·实验结果第44-48页
     ·HIV-1 Vif 对野生型及突变型 A3G 的降解作用第44页
     ·野生型及突变型 A3G mRNA 拷贝数的相对定量第44-45页
     ·突变型 APOBEC3G 对 HIV-1 假病毒感染力的影响第45-48页
   ·讨论第48-49页
   ·本章小结第49-50页
结论第50-52页
参考文献第52-56页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第56-58页
致谢第58页

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