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极细链格孢菌激活蛋白PeaT1结构域分析与功能研究

摘要第1-8页
Abstract第8-14页
第一章 文献综述第14-26页
   ·激发子概述第14-16页
     ·蛋白激发子的分类第14-16页
     ·激发子诱导植物获得系统性抗性第16页
   ·差异蛋白常用筛选方法第16-21页
     ·双向凝胶电泳技术第17-18页
     ·稳定同位素标记结合质谱技术第18-21页
   ·蛋白热稳定机制研究进展第21-24页
   ·本研究的目的和意义第24-26页
第二章 PEAT1 及缺失突变体表达载体的构建第26-37页
   ·试验材料第26-27页
     ·菌株和质粒第26页
     ·主要试剂第26-27页
     ·实验仪器第27页
   ·试验方法第27-34页
     ·总RNA 提取第27-28页
     ·cDNA 的合成第28页
     ·peaT1 基因全长的扩增第28-30页
     ·将peaT1 克隆至pMD18-T 载体第30-31页
     ·构建PeaT1 融合表达载体pET-28a-peaT1第31-33页
     ·构建三个缺失突变体表达载体第33-34页
   ·结果与分析第34-36页
     ·总RNA 提取第34页
     ·peaT1 基因的扩增第34-35页
     ·peaT1 基因及其缺失片段表达载体的构建第35-36页
   ·小结与讨论第36-37页
     ·扩增了peaT1 基因全长第36页
     ·构建了PeaT1 及三个缺失片段的表达载体第36-37页
第三章 PEAT1 及其缺失突变体蛋白的表达及纯化第37-45页
   ·实验材料第37-38页
     ·菌株和质粒第37页
     ·主要试剂第37页
     ·培养基及缓冲液的配制第37-38页
     ·实验仪器第38页
   ·实验方法第38-40页
     ·PeaT1 及其突变体蛋白的诱导与表达第38-39页
     ·PeaT1 及其突变体蛋白的亲和纯化第39-40页
     ·PeaT1 及其突变体蛋白的脱盐第40页
     ·PeaT1 蛋白分子量的质谱分析第40页
   ·结果与分析第40-43页
     ·PeaT1 及其突变体蛋白的诱导与表达第40-41页
     ·PeaT1 及其突变体表达蛋白的可溶性分析第41页
     ·PeaT1 及其突变体蛋白的亲和纯化第41-42页
     ·PeaT1 及其突变体蛋白的脱盐第42-43页
     ·PeaT1 分子量的质谱分析第43页
   ·小结与讨论第43-45页
     ·PeaT1 及其突变体蛋白的表达和纯化第43-44页
     ·PeaT1 及其突变蛋白的非正常迁移特性第44-45页
第四章 PEAT1 及其突变体蛋白的功能比较与分析第45-52页
   ·实验材料第45页
   ·试验方法第45-46页
     ·PeaT1 及其突变体蛋白的浓度测定第45页
     ·PeaT1 及其突变体蛋白促进小麦幼苗低温下生长比较第45页
     ·PeaT1 及其突变体蛋白影响小麦根系活力比较第45-46页
     ·PeaT1 及其突变体蛋白诱导小麦抗旱性比较第46页
     ·PeaT1 及其突变体蛋白诱导烟草对TMV 抗性比较第46页
   ·结果与分析第46-50页
     ·PeaT1 及其突变体蛋白浓度的测定第46-47页
     ·PeaT1 及其突变体蛋白促进小麦幼苗低温下生长比较第47-48页
     ·PeaT1 及其突变体蛋白影响小麦根系活力比较第48页
     ·PeaT1 及其突变体蛋白诱导小麦抗旱性比较第48-49页
     ·PeaT1 及其突变体蛋白诱导烟草抗TMV 比较第49-50页
   ·小结与讨论第50-52页
第五章 PEAT1 及其突变体蛋白诱导水稻蛋白的差异表达第52-59页
   ·实验材料与仪器第52页
     ·实验材料第52页
     ·实验仪器第52页
   ·试验方法第52-54页
     ·日本晴的无菌培养第52-53页
     ·~(14)N、~(15)N 标记日本睛的蛋白提取与分析第53-54页
   ·结果与讨论第54-59页
     ·~(14)N、~(15)N 标记日本睛的蛋白提取与分析第54页
     ·差异表达蛋白HPLC-MS 分析第54-55页
     ·差异表达蛋白MALDI-TOF MS 分析第55-56页
     ·部分差异表达蛋白功能分析第56-59页
第六章 PEAT1 及突变体蛋白的热稳定性分析第59-64页
   ·实验材料与方法第59页
     ·实验材料第59页
     ·PeaT1 及三个缺失突变体蛋白的热稳定性分析第59页
     ·PeaT1 蛋白的生物信息学分析第59页
   ·结果与分析第59-63页
     ·PeaT1 及其突变体蛋白的热稳定性分析第59-60页
     ·PeaT1 蛋白二级结构预测第60-61页
     ·PeaT1 及其缺失突变体蛋白热稳定原因的初步分析第61-63页
   ·小结与讨论第63-64页
全文结论第64-65页
参考文献第65-73页
致谢第73-74页
作者简历第74页

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