摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
第一部分 引言 | 第8-22页 |
1. 本研究的目的与意义 | 第8-12页 |
·禽流感病毒的研究 | 第8-10页 |
·禽流感的抗体治疗 | 第10-12页 |
2. 预防性分泌型IgA类抗体的研究 | 第12-15页 |
·分泌型IgA发现 | 第12页 |
·SIgA特性研究 | 第12页 |
·SIgA的功能 | 第12-13页 |
·SIgA的合成与调节 | 第13页 |
·SIgA的应用 | 第13-14页 |
·重组分泌型SIgA的研究 | 第14-15页 |
3. 基因工程抗体研究 | 第15-19页 |
·嵌和抗体的研究 | 第15-17页 |
·基因抗体的高效表达载体和宿主细胞的构建的研究 | 第17-18页 |
·基因工程抗体在疾病方面的应用 | 第18-19页 |
4. 重组抗体表达系统的研究 | 第19-20页 |
5. 本实验研究的内容和方案 | 第20-22页 |
·抗H5N1-HA的单抗可变区基因的克隆以及序列分析 | 第20页 |
·嵌合IgA抗体的基因融合 | 第20-21页 |
·轻重链真核表达质粒的构建 | 第21页 |
·抗H5N1-HA的嵌合抗体在中国仓鼠细胞中的表达及其特性的分析 | 第21-22页 |
第二部分 材料和方法 | 第22-31页 |
1. 材料 | 第22-23页 |
·菌株 | 第22页 |
·细胞 | 第22页 |
·酶 | 第22页 |
·各种试剂盒 | 第22-23页 |
2. 方法 | 第23-31页 |
·抗H5N1-HA的单克隆抗体可变区基因的克隆以及其序列分析 | 第23-26页 |
·嵌合IgA抗体基因的融合 | 第26-27页 |
·真核表达质粒的构建 | 第27页 |
·抗H5N1-HA嵌合抗体在CHO细胞中的表达及特性分析 | 第27-31页 |
第三部分 实验结果 | 第31-45页 |
1. 抗H5N1-HA单克隆抗体可变区基因的克隆以及其序列分析 | 第31-37页 |
·单克隆抗体可变区轻链和可变区重链基因的PCR扩增 | 第31页 |
·重组质粒的PCR鉴定与酶切鉴定 | 第31-32页 |
·DNA序列测定与分析 | 第32-37页 |
2. 嵌合IgA抗体基因的融合 | 第37-42页 |
·嵌合IgA抗体基因的融合PCR | 第37-38页 |
·嵌合IgA抗体的基因的克隆以及进行序列的分析 | 第38-42页 |
3. 人鼠嵌和IgA抗体基因表达质粒的构建 | 第42页 |
4. 抗H5N1-HA嵌合抗体在CHO细胞中的表达及特性分析 | 第42-45页 |
·嵌合IgA抗体的ELISA检测 | 第42-43页 |
·嵌合IgA抗体的纯化 | 第43页 |
·嵌合IgA抗体的SDS-PAGE及Western印迹分析 | 第43-45页 |
第四部分 讨论 | 第45-49页 |
全文结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
附录 | 第62-70页 |
攻读硕士学位期间的研究成果 | 第70页 |