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金鸡菊(Coreopsis drummondii)和小白菊(Parthenium hysterophorus)抗烟草花叶病毒活性研究

中文摘要第1-12页
英文摘要第12-14页
1、研究背景第14-33页
   ·植物病毒病为害的特点及药物在病害防治中的地位第14-15页
   ·非植物源抗植物病毒活性物质的研究概况第15-20页
     ·化学合成抗植物病毒活性物质第15-18页
       ·嘌呤和嘧啶类第16页
       ·三嗪类衍生物第16-17页
       ·三唑衍生物第17页
       ·噻二唑衍生物第17页
       ·其他化合物第17-18页
     ·微生物源抗植物病毒活性物质第18-19页
     ·动物源抗植物病毒活性物质第19-20页
   ·植物源抗植物病毒活性物质的研究概况第20-29页
     ·具有抗植物病毒活性的植物第20-21页
     ·植物中抗病毒活性物质的种类第21-25页
       ·蛋白质等大分子物质第21-22页
       ·小分子物质第22-25页
     ·植物源抗病毒物质的作用方式第25-26页
       ·抑制病毒侵染第25页
       ·抑制病毒增殖第25-26页
       ·诱导植物产生抗性第26页
     ·抗植物病毒活性物质的筛选方法第26-28页
       ·活体筛选第26-27页
       ·离体培养筛选第27-28页
     ·我国植物源抗病毒物质及制剂研究概况第28-29页
       ·植物源抗病毒物质第28页
       ·植物源抗病毒制剂第28-29页
   ·植物源抗病毒剂研究存在的问题与前景第29-31页
     ·存在问题第29-30页
     ·植物源抗病毒剂的研究前景第30-31页
   ·本研究的意义与技术路线第31-33页
2、抗烟草花叶病毒活性植物粗提物的初筛第33-47页
   ·材料与方法第33-42页
     ·供试植物、供试病毒及其寄主第33-36页
     ·主要仪器和试剂第36页
     ·烟草花叶病毒的提纯第36-38页
     ·提纯病毒的电镜观察第38-39页
     ·TMV抗血清的制备、效价及工作浓度的测定第39-40页
       ·TMV抗血清的制备第39页
       ·TMV抗血清的效价测定第39-40页
       ·抗血清最适宜工作浓度的测定第40页
     ·植物提取物的制备第40-41页
     ·提取物抗TMV活性测定第41页
       ·抗病毒侵染作用的测定第41页
       ·抗病毒增殖作用的测定第41页
     ·植物提取物化学成分预试验第41-42页
   ·结果与分析第42-45页
     ·植物乙醇提取物对TMV侵染的抑制作用第42页
     ·不同极性溶剂萃取物对TMV侵染的抑制作用第42-43页
     ·植物乙醇提取物对TMV增殖的抑制作用第43-44页
     ·提取物的化学成分预试验结果第44-45页
   ·讨论第45-47页
3、金鸡菊、小白菊中抗病毒物质的分离及结构鉴定第47-87页
   ·材料与方法第47-50页
     ·供试植物、病毒及其寄主第47页
     ·仪器与试剂第47页
     ·活性物质的分离与结构鉴定第47-50页
       ·分离中的活性跟踪第47-48页
       ·金鸡菊中活性物质的提取与分离第48页
       ·小白菊中活性物质的提取与分离第48-49页
       ·活性物质的结构分析第49-50页
     ·抗病毒活性测定第50页
       ·混合接种对TMV抑制作用测定第50页
       ·药物浸泡对TMV的抑制作用第50页
       ·抑制TMV增殖作用的测定第50页
   ·结果与分析第50-85页
     ·活性物质的分离第50-53页
       ·金鸡菊活性物质的分离第50-52页
       ·小白菊中活性物质的分离第52-53页
     ·化合物结构鉴定第53-82页
       ·化合物A_1第53-59页
       ·化合物A_2第59-63页
       ·化合物A_3第63-67页
       ·化合物A_4第67-70页
       ·化合物A_5第70-74页
       ·化合物B_1第74-78页
       ·化合物B_2第78-82页
     ·化合物的抗病毒活性第82-85页
       ·混合接种对TMV的抑制作用第82-83页
       ·药物浸泡对TMV的抑制作用第83-84页
       ·对TMV增殖的抑制作用第84-85页
   ·讨论第85-87页
4、两种活性物质的抗病毒机制研究第87-105页
   ·材料与方法第87-93页
     ·供试寄主、供试毒源及供试植物第87页
     ·供试仪器和试剂第87页
     ·对病毒粒体形态的影响第87-88页
     ·透析处理对活性物质的抗病毒作用影响测定第88页
     ·对病毒核酸侵染力的影响测定第88-89页
       ·TMV-RNA的提取及浓度测定第88-89页
       ·对TMV-RNA侵染力的影响测定第89页
     ·对病毒外壳蛋白作用的测定第89-91页
       ·TMV-CP的制备及其检测第89-91页
       ·对TMV-CP体外聚合作用的影响第91页
       ·对外壳蛋白抗原位点的影响第91页
     ·对病毒基因表达的影响第91-93页
       ·实时荧光定量PCR测定病毒外壳蛋白及复制酶基因表达量方法的建立第91-93页
       ·两种药物对病毒外壳蛋白基因表达的影响测定第93页
       ·两种药物对病毒复制酶基因表达的影响测定第93页
   ·结果与分析第93-103页
     ·对TMV粒体形态的影响第93-94页
     ·透析处理对活性物质的抗病毒作用影响第94-95页
     ·对病毒核酸侵染力的影响第95-96页
     ·对病毒外壳蛋白的作用第96-97页
       ·TMV-CP的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析第96页
       ·对病毒外壳蛋白体外聚合过程的影响第96-97页
       ·对外壳蛋白抗原位点的影响第97页
     ·对病毒基因表达的影响第97-103页
       ·Real time PCR熔解曲线分析第97-99页
       ·Real time PCR的标准曲线第99-100页
       ·对病毒外壳蛋白基因表达的影响第100-101页
       ·对病毒复制酶基因表达的影响第101-103页
   ·讨论第103-105页
5、混配提取物对TMV的联合作用及剂型加工第105-117页
   ·材料与方法第105-108页
     ·供试植物、病毒及其寄主第105页
     ·仪器和试剂第105-106页
     ·提取物的制备第106页
     ·检测病毒浓度标准曲线制作第106页
     ·单一提取物抗TMV的活性测定第106-107页
       ·提取物抑制TMV侵染的活性测定第107页
       ·提取物抑制TMV增殖的活性测定第107页
     ·混配提取物抑制TMV的活性测定第107页
       ·混配提取物抑制TMV侵染的活性测定第107页
       ·混配提取物抑制TMV增殖的活性测定第107页
       ·混配提取物与单一提取物的抗TMV活性比较第107页
     ·混配提取物的剂型加工第107-108页
       ·提取物的混配第107页
       ·乳化剂的筛选第107页
       ·助溶剂的筛选第107页
       ·微乳剂的配制及质量鉴定第107-108页
   ·结果与分析第108-114页
     ·提取物对TMV的抑制效果第108-112页
       ·单一提取物对TMV侵染的抑制活性第108-109页
       ·单一提取物对TMV增殖的抑制活性第109页
       ·混配提取物对TMV侵染的抑制效果第109-110页
       ·混配提取物对TMV增殖的抑制效果第110-112页
     ·混配提取物的剂型加工第112-114页
       ·乳化剂的筛选第112-113页
       ·助溶剂的筛选第113-114页
       ·10%混配提取物微乳剂的技术指标第114页
   ·讨论第114-117页
6、混配制剂对烟草花叶病毒病的防治及寄主生理生化的影响第117-129页
   ·材料与方法第117-120页
     ·供试植物、病毒及其寄主第117页
     ·仪器和试剂第117页
     ·10%混配微乳剂的配制第117-118页
     ·10%混配微乳剂对烟草花叶病的防治效果第118页
       ·喷施处理对烟草体内病毒浓度的影响测定第118页
       ·对烟草花叶病的盆栽防治试验第118页
     ·10%混配微乳剂对TMV寄主烟草生理生化的影响第118-120页
       ·试验设计与取样第118页
       ·过氧化物酶(POD)活性测定第118-119页
       ·多酚氧化酶(PPO)活性测定第119页
       ·苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性测定第119页
       ·超氧化物歧化酶(SOD)活性测定第119-120页
     ·10%混配微乳剂对烟草体内时绿素含量的影响第120页
   ·结果与分析第120-126页
     ·10%混配微乳剂对烟草花叶病的防治效果第121-122页
       ·对烟草体内病毒的抑制第121页
       ·对烟草花叶病的盆栽防治效果第121-122页
     ·寄主烟草喷施10%混配微乳剂后体内酶活性的变化第122-125页
       ·烟草体内过氧化物酶(POD)活性的变化第122-123页
       ·烟草体内多酚氧化酶(PPO)活性的变化第123-124页
       ·烟草体内苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的变化第124页
       ·烟草体内超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化第124-125页
     ·10%混配微乳剂对烟草体内叶绿素含量的影响第125-126页
   ·讨论第126-129页
总结第129-130页
参考文献第130-140页
附录1 缩略语及含义第140-142页
附录2 所用主要试剂与缓冲液的配制第142-145页
附录3 中草药化学常用试剂的配制及检测方法第145-147页
附录4 攻博期间发表(投稿)的论文第147-148页
致谢第148页

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