| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-27页 |
| ·猪捷申病及捷申病毒概述 | 第11-21页 |
| ·猪捷申病概述 | 第11-12页 |
| ·猪捷申病毒一般特征 | 第12-14页 |
| ·猪捷申病毒的诊断 | 第14-16页 |
| ·猪捷申病毒的免疫应答及疫苗研究 | 第16页 |
| ·猪捷申病毒的分子生物学特征 | 第16-21页 |
| ·反向遗传操作概述 | 第21-25页 |
| ·反向遗传操作策略 | 第21-23页 |
| ·反向遗传操作的应用 | 第23-25页 |
| ·反向遗传操作的局限性 | 第25页 |
| ·本研究目的和意义 | 第25-26页 |
| ·本研究的主要内容 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-46页 |
| ·猪捷申病毒Swine/CH/IMH/03株全长克隆的构建的材料与方法 | 第27-39页 |
| ·实验材料 | 第27-29页 |
| ·试验方法 | 第29-39页 |
| ·猪捷申病毒Swine/CH/IMH/03株3D蛋白原核高效表达及反应活性的材料与方法 | 第39-46页 |
| ·实验材料 | 第39-41页 |
| ·试验方法 | 第41-46页 |
| 3 结果 | 第46-56页 |
| ·猪捷申病毒Swine/CH/IMH/03株全长克隆的构建 | 第46-49页 |
| ·PTV-1 RT-PCR | 第46页 |
| ·四个亚克隆的构建 | 第46-47页 |
| ·pSK-PTV23的构建 | 第47页 |
| ·pSK-PTV123的构建 | 第47页 |
| ·pSK-PTVFL的构建 | 第47-48页 |
| ·全长克隆pSK-PTVFL的测序及序列分析 | 第48页 |
| ·全长克隆pSK-PTVFL与与亲本毒株的序列比对 | 第48-49页 |
| ·与捷申病毒全长序列的比对 | 第49页 |
| ·猪捷申病毒Swine/CH/IMH/03株3D蛋白的原核高效表达及反应活性 | 第49-56页 |
| ·PTV 3D基因PCR | 第49页 |
| ·重组质粒pET3D的PCR鉴定 | 第49-50页 |
| ·3D重组蛋白的诱导表达 | 第50页 |
| ·3D重组蛋白表达方式鉴定 | 第50-51页 |
| ·3D重组蛋白表达条件的优化 | 第51页 |
| ·3D重组蛋白纯化 | 第51-52页 |
| ·3D重组蛋白Western Blot | 第52页 |
| ·PTV 3D序列的比较分析 | 第52-56页 |
| 4 讨论 | 第56-62页 |
| ·猪捷申病毒Swine/CH/IMH/03株全长克隆的构建 | 第56-60页 |
| ·构建策略及序列精确性 | 第56页 |
| ·pSK-PTVFL与亲本序列Swine/CH/IMH/03的比对 | 第56-57页 |
| ·poly(C)及poly(A)的获得 | 第57页 |
| ·克隆的稳定性 | 第57页 |
| ·3’-UTR的变异性 | 第57-58页 |
| ·5’-UTR的变异性 | 第58页 |
| ·多聚蛋白区的变异性 | 第58-59页 |
| ·PTV-1病毒挽救的初步探讨 | 第59-60页 |
| ·猪捷申病毒Swine/CH/IMH/03株3D蛋白的原核高效表达及反应活性 | 第60-62页 |
| ·3D蛋白的变异性 | 第60-61页 |
| ·3D蛋白的应用前景 | 第61-62页 |
| 5 结论 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第71页 |
