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猪USF1和MBF1基因的克隆、鉴定及多态性分析

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
缩略词表第12-13页
资源家系测定性状的英文缩写第13-14页
第一章 文献综述第14-30页
 1 引言第14页
 2 遗传育种中常用的分子标记技术概述第14-16页
   ·RFLP标记第14页
   ·RAPD标记第14-15页
   ·AFLP标记第15页
   ·PCR-SSCP标记第15页
   ·微卫星标记第15-16页
   ·线粒体DNA标记第16页
 3 分子标记技术在猪育种中的应用第16-18页
   ·遗传多样性的研究第16页
   ·基因图谱的构建第16-17页
   ·猪的起源及群体亲缘关系的研究第17页
   ·猪的抗病育种第17页
   ·标记辅助选择(MAS)第17-18页
   ·标记辅助导入第18页
   ·猪数量性状主基因的检测第18页
   ·杂种优势预测第18页
 4 根据EST分离基因第18-21页
   ·依据第18-19页
   ·EST简介及其应用第19页
   ·利用EST发现和克隆新基因第19-21页
 5 比较基因组学在分离新基因中的应用第21-22页
 6 位置克隆在分离新基因中的应用第22页
 7 猪体内脂肪沉积的QTL定位研究现状第22-24页
 8 与脂肪沉积相关的候选基因第24-27页
 9 两个拟候选基因研究现状第27-28页
 10 本研究的目的和意义第28-30页
第二章 材料与方法第30-40页
 1 前言第30页
 2 试验材料第30-32页
   ·试验样品及性状测定第30页
   ·主要仪器和设备第30-31页
   ·主要药品及试剂第31页
   ·缓冲液和常用试剂的配制第31-32页
 3 试验方法第32-38页
   ·猪基因组DNA的提取第32页
   ·基因组DNA的浓度测定和质量检测第32-33页
   ·利用RT-PCR方法扩增cDNA片段第33-34页
   ·候选基因的确定及引物设计第34页
   ·PCR产物的回收、纯化、克隆测序第34-36页
     ·PCR产物回收与纯化第34-35页
     ·回收DNA片段与载体的连接第35页
     ·感受态细胞的制备(CaCl_2法制备感受态)第35-36页
     ·连接产物的转化第36页
     ·阳性克隆子鉴定及测序第36页
   ·生物信息学分析相应软件第36-37页
   ·猪候选基因组序列的扩增及部分SNP的PCR-RFLP检测第37-38页
 4 统计分析第38页
   ·分子标记在不同猪种中的等位基因频率及基因型频率计算第38页
   ·分子标记的基因效应分析第38页
 5 组织表达谱分析第38-40页
第三章 结果与分析第40-63页
 1 总RNA的提取第40页
 2 猪USF1基因第40-52页
   ·根据猪EST信息设计特异性引物及RT-PCR扩增结果第40-41页
   ·猪USF1基因cDNA序列生物信息学分析结果第41-42页
   ·推导的USF1蛋白质的基本特征分析第42-44页
   ·猪USF1基因组序列的克隆、测序和序列分析第44-48页
   ·猪USF1基因第10内含子遗传变异多态性检测第48页
   ·猪USF1基因的PCR-Alu I-RFLP多态性在不同猪群种的分布结果第48-49页
   ·猪USF1基因第10内含子PCR-AluI-RFLP基因型与生产性状的统计分析第49-52页
 3 猪MBF1基因第52-63页
   ·根据猪EST信息设计特异性引物及RT-PCR扩增结果第52页
   ·猪MBF1基因cDNA序列生物信息学分析结果第52-53页
   ·推导的MBF1蛋白质的基本特征分析第53-56页
   ·猪MBF1基因组序列的克隆、测序和序列分析第56-57页
   ·猪MBF1基因第4外显子遗传变异多态性检测第57-58页
   ·猪MBF1基因的PCR-Taq I-RFLP多态性在不同猪群种的分布结果第58-59页
   ·猪MBF1基因第4外显子PCR-Taq I-RFLP基因型与生产性状的统计分析第59-61页
   ·猪MBF1基因的组织表达谱分析第61-63页
第四章 讨论第63-69页
 1 分离猪基因cDNA序列的策略第63页
 2 猪USF1/CD转录本第63-64页
 3 猪USF1、MBF1基因SNPs在基因组的分布第64-65页
 4 SNPs的生物学效应第65-66页
 5 猪USF1和MBF1基因在不同群体中基因型频率分布第66页
 6 猪USF1和MBF1基因遗传效应分析第66-67页
 7 关于USF1和MBF1蛋白的进化树分析第67页
 8 组织表达谱分析第67-69页
小结第69-71页
 本研究获得的主要成果第69页
 本研究的创新点与特色第69-70页
 本研究的不足和引出的问题第70-71页
下一步工作计划第71-72页
参考文献第72-78页
在读期间发表论文第78-79页
附录第79-90页
致谢第90页

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