中文摘要 | 第1-12页 |
英文摘要 | 第12-14页 |
1 引言 | 第14-31页 |
·鱼肠道菌群的概述 | 第14-18页 |
·鱼肠道菌群的形成 | 第14页 |
·鱼肠道菌群的特性、数量和组成 | 第14-15页 |
·鱼肠道菌群的分布 | 第15-16页 |
·鱼肠道菌群的作用 | 第16-18页 |
·屏障作用 | 第16页 |
·营养作用 | 第16-17页 |
·辅助消化作用 | 第17页 |
·免疫作用 | 第17-18页 |
·鱼肠道菌群的研究进展 | 第18-20页 |
·国外研究进展 | 第18-19页 |
·国内研究进展 | 第19-20页 |
·鱼肠道菌群的研究方法 | 第20-24页 |
·培养鉴定法 | 第20页 |
·现代分子生物学方法 | 第20-24页 |
·荧光原位杂交技术(FISH) | 第20-21页 |
·脉冲场凝胶电泳(PFGE) | 第21页 |
·PCR‐DGGE 方法 | 第21-22页 |
·实时荧光定量PCR | 第22-23页 |
·ERIC‐PCR 技术 | 第23-24页 |
·ERIC‐PCR 技术特点及其应用 | 第24-29页 |
·ERIC‐PCR 技术 | 第24页 |
·肠杆菌基因间重复共有序列(ERIC)的发现与分布 | 第24页 |
·ERIC 结构特征及功能 | 第24-25页 |
·ERIC‐PCR 的原理及特点 | 第25页 |
·ERIC‐PCR 产物形成规律 | 第25-26页 |
·ERIC‐PCR 技术的应用 | 第26-28页 |
·在菌株分类和鉴定中的应用 | 第26-27页 |
·在混合菌样品中的应用 | 第27-28页 |
·ERIC‐PCR 在流行病调查中的应用 | 第28页 |
·存在的问题和展望 | 第28-29页 |
·本研究的目的和意义 | 第29-30页 |
·本研究技术路线 | 第30-31页 |
2 材料与方法 | 第31-40页 |
·材料 | 第31-34页 |
·实验鱼类 | 第31页 |
·实验仪器 | 第31-32页 |
·主要试剂及配制 | 第32页 |
·主要工作液配制 | 第32-33页 |
·DNA 提取缓冲液 | 第32页 |
·凝胶电泳缓冲液(50×TAE) | 第32页 |
·TE 缓冲液 | 第32-33页 |
·196琼脂糖凝胶 | 第33页 |
·主要选择性培养基制备 | 第33-34页 |
·糖发酵试验 | 第33页 |
·尿素酶试验 | 第33页 |
·甲基红(M‐R)试验 | 第33页 |
·维培(V‐P)二氏试验 | 第33页 |
·硝酸盐还原试验 | 第33页 |
·接触酶试验 | 第33-34页 |
·明胶液化试验 | 第34页 |
·淀粉液化能力 | 第34页 |
·产气试验 | 第34页 |
·运动性试验 | 第34页 |
·硫化氢试验 | 第34页 |
·试验方法 | 第34-40页 |
·取材 | 第34页 |
·细菌的培养及筛选 | 第34-35页 |
·鉴定试验 | 第35-37页 |
·糖和醇发酵试验 | 第35页 |
·脲酶试验 | 第35页 |
·甲基红试验 | 第35页 |
·V‐P 试验 | 第35页 |
·硝酸盐还原试验 | 第35-36页 |
·接触酶试验 | 第36页 |
·明胶液化试验 | 第36页 |
·淀粉液化试验 | 第36页 |
·运动性试验 | 第36页 |
·产气试验 | 第36页 |
·硫化氢试验 | 第36-37页 |
·细菌鉴定技术体系 | 第37页 |
·肠道细菌总DNA 的提取 | 第37-38页 |
·ERIC‐PCR 反应及分析 | 第38-40页 |
·引物的合成 | 第38页 |
·最佳反应体系和反应条件的确立 | 第38-40页 |
·各肠道菌群的PCR 扩增 | 第40页 |
·电泳 | 第40页 |
·PCR 产物分析 | 第40页 |
3 结果及分析 | 第40-44页 |
·鉴定结果 | 第40-41页 |
·不同鱼种鱼体内菌群的分布 | 第41-42页 |
·草鱼肠道菌群组成 | 第41页 |
·鲢鱼肠道菌群组成 | 第41-42页 |
·鲤鱼肠道菌群组成 | 第42页 |
·鲫鱼肠道菌群组成 | 第42页 |
·总 DNA 的提取 | 第42-43页 |
·ERIC-PCR 反应的最优条件 | 第43页 |
·ERIC-PCR 指纹图谱建立 | 第43-44页 |
·ERIC-PCR 图谱分析与肠道细菌组成分析 | 第44页 |
4 讨论 | 第44-48页 |
·生化试验对四种常见淡水鱼的肠道菌群分析 | 第44-45页 |
·肠道内容物中优势菌群 DNA 的提取 | 第45-46页 |
·ERIC-PCR 对四种淡水鱼肠道菌群多样性的分析 | 第46-48页 |
5 结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-57页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |