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拟南芥MPT家族调节非生物胁迫耐性的分子机理

符号说明第1-9页
中文摘要第9-11页
Abstract第11-14页
1 前言第14-40页
   ·盐胁迫第14-20页
     ·盐胁迫对植物的危害第14-17页
     ·植物对盐胁迫的适应机制第17-18页
     ·盐胁迫信号转导途径第18-20页
       ·盐胁迫信号在质膜上的感知第18页
       ·MAPK 信号传导途径第18页
       ·SOS 信号转导途径第18-20页
       ·Ca2+偶联的信号转导途径第20页
   ·干旱胁迫第20-25页
     ·干旱对植物的伤害第20-22页
     ·植物对干旱胁迫的适应机制第22-23页
     ·干旱胁迫的信号转导途径第23页
     ·干旱胁迫应答基因第23-25页
   ·赤霉素的合成、信号传导及其在植物响应非生物胁迫中的作用第25-28页
     ·赤霉素的化学结构第25-26页
     ·赤霉素的合成及其信号转导第26-28页
     ·赤霉素在植物响应非生物胁迫中的作用第28页
   ·ABA 的代谢过程、信号传导以及与非生物胁迫的关系第28-34页
     ·ABA 的代谢过程第28-31页
       ·ABA 的生物合成第29-30页
       ·ABA 的分解代谢第30-31页
     ·ABA 的信号转导第31-33页
       ·ABA 的感受第31-32页
       ·ABA 信号转导途径中的磷酸化和去磷酸化第32-33页
     ·ABA 与非生物胁迫的关系第33-34页
   ·线粒体磷酸转运体家族的基本功能、结构特征及研究进展第34-36页
     ·线粒体磷酸转运体家族的基本功能及结构特征第34页
     ·MPT 的研究进展第34-36页
   ·NHX 基因的耐盐机制第36-37页
   ·植物基因启动子第37-38页
     ·诱导型启动子第37页
     ·诱导型启动子的应用第37-38页
   ·MAR 的类增强子活性第38页
   ·本实验的目的意义第38-40页
2 材料与方法第40-54页
   ·实验材料第40-42页
     ·植物材料第40页
     ·菌株与质粒第40页
     ·酶与各种生化试剂第40页
     ·引物第40-42页
   ·实验方法第42-54页
     ·植物基因组的提取与纯化第42-43页
       ·植物基因组的提取第42页
       ·植物基因组的纯化第42-43页
     ·载体构建第43-44页
       ·PCR 扩增第43页
       ·连接反应第43-44页
       ·酶切和回收第44页
       ·超表达AtMPT1/2/3 表达载体的构建第44页
       ·启动子驱动GUS 报告基因表达载体的构建第44页
     ·PCR 鉴定突变体纯合植株第44-45页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第45页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第45页
       ·大肠杆菌细胞的转化第45页
     ·大肠杆菌中质粒的提取第45-46页
     ·农杆菌感受态细胞的制备和转化第46-47页
       ·根癌农杆菌GV3101 感受态细胞的制备第46-47页
       ·冻融法转化农杆菌细胞第47页
     ·拟南芥的转化及转基因拟南芥的鉴定第47-48页
       ·拟南芥的转化第47页
       ·转基因拟南芥的鉴定第47-48页
     ·RNA 的提取纯化与反转录第48-49页
       ·TRIZOL 法提取RNA第48页
       ·RNA 的纯化第48页
       ·RNA 中基因组DNA 的去除第48-49页
       ·RNA 的反转录第49页
     ·实时定量PCR第49-50页
     ·GUS 活性测定第50-51页
     ·转基因植物GUS 组织化学染色分析第51页
     ·赤霉素含量的测定第51-53页
       ·植物标本的采集及保存第51-52页
       ·操作步骤第52页
       ·计算第52-53页
     ·ABA 含量的测定第53-54页
       ·ABA 的提取第53页
       ·放射性免疫法(RIA)测定ABA 含量第53-54页
3 结果与分析第54-72页
   ·拟南芥MPT 家族成员的进化分析第54-55页
   ·AtMPT1、AtMPT2 及AtMPT3 的表达模式分析第55-57页
   ·AtMPTs 调节拟南芥盐胁迫耐性及其机理探究第57-65页
     ·AtMPT1、AtMPT2 及AtMPT3 突变体以及超表达植株的获得第57-58页
     ·AtMPTs 诱导表达分析第58-59页
     ·AtMPTs 突变体和超表达植株对盐胁迫敏感第59-60页
     ·AtMPTs 调节拟南芥盐胁迫耐性的机理分析第60-65页
       ·AtMPTs 依赖GAs 调节拟南芥对盐胁迫的响应第60-62页
       ·拟南芥 GAs 代谢相关基因在盐胁迫下受到 AtMPTs 的调节第62-65页
   ·AtMPT3 调节拟南芥渗透胁迫耐性及其机理分析第65-69页
     ·AtMPT3 突变体和超表达植株对渗透胁迫敏感第65-66页
       ·AtMPT3 受渗透胁迫的诱导第65-66页
       ·mpt3 和 OEMPT3 株系对渗透胁迫敏感第66页
     ·AtMPT3 调节拟南芥渗透胁迫耐性的机理分析第66-69页
       ·AtMPT3 依赖 ABA 调节拟南芥对盐胁迫的响应第66-68页
       ·拟南芥 ABA 代谢相关基因在渗透胁迫下受到 AtMPTs 的调节第68-69页
   ·盐诱导启动子的构建与 GUS 活性鉴定第69-72页
     ·盐诱导启动子的构建第69-70页
     ·盐诱导启动子的活性鉴定第70-72页
4 讨论第72-76页
5 结论第76-77页
参考文献第77-91页
附录第91-93页
致谢第93-94页
攻读学位期间发表论文情况第94页

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