摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-8页 |
符号说明 | 第8-14页 |
第一章 稳定表达PRP/GFP 融合蛋白神经细胞系的建立 | 第14-33页 |
1 材料与方法 | 第14-24页 |
·材料 | 第14-16页 |
·质粒与细胞系 | 第14-16页 |
·主要试剂 | 第16页 |
·方法 | 第16-24页 |
·目的基因的PCR 扩增 | 第16-17页 |
·PCR 产物序列测定及其分析 | 第17-19页 |
·重组表达质粒pcDNA3.1(-)-mPG 的构建 | 第19-22页 |
·利用QlAprep Miniprep 质粒小量提取试剂盒提取重组表达质粒 | 第22页 |
·重组表达质粒在Neuro-2a 神经细胞中的瞬时表达 | 第22-23页 |
·致使Neuro-2a 细胞死亡的G418 最低浓度的确定 | 第23页 |
·表达PrP/GFP 融合蛋白Neuro-2a 细胞系的建立 | 第23-24页 |
2 结果 | 第24-31页 |
·目的片段PCR 扩增结果 | 第24-26页 |
·PCR 产物T-A 克隆质粒酶切鉴定结果 | 第26页 |
·PCR 产物序列测定以及分析结果 | 第26页 |
·重组表达质粒pcDNA3.1(-)-mPG 酶切鉴定结果 | 第26-27页 |
·重组表达质粒在Neuro-2a 神经细胞中瞬时表达检测结果 | 第27-28页 |
·致使Neuro-2a 细胞死亡的G418 最低浓度 | 第28页 |
·表达PrP/GFP 细胞系筛选结果 | 第28-31页 |
·单克隆细胞的荧光显微镜检测结果 | 第28-29页 |
·表达绿色荧光蛋白神经细胞株Western-Blotting 检测结果 | 第29-30页 |
·连续传代法鉴定细胞稳定性检测结果 | 第30-31页 |
3. 讨论 | 第31-33页 |
第二章 表达PrP/GFP 融合蛋白Neuro-2a 细胞的感染试 | 第33-43页 |
1 材料与方法 | 第33-35页 |
·材料 | 第33-34页 |
·病原与细胞系 | 第33页 |
·主要试剂 | 第33-34页 |
·方法 | 第34-35页 |
·痒病鼠脑匀浆的制备 | 第34页 |
·痒病鼠脑匀浆感染细胞系 | 第34页 |
·感染细胞的处理 | 第34-35页 |
·感染细胞的鉴定 | 第35页 |
2 结果 | 第35-37页 |
·3F4 和 1H2 抗体检测细胞样品结果 | 第35-36页 |
·3F4 抗体检测细胞样品结果 | 第36-37页 |
3 讨论 | 第37-43页 |
附录 | 第43-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第46页 |