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表达PrP/GFP融合蛋白神经细胞系的建立及其初步感染性试验

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-8页
符号说明第8-14页
第一章 稳定表达PRP/GFP 融合蛋白神经细胞系的建立第14-33页
 1 材料与方法第14-24页
   ·材料第14-16页
     ·质粒与细胞系第14-16页
     ·主要试剂第16页
   ·方法第16-24页
     ·目的基因的PCR 扩增第16-17页
     ·PCR 产物序列测定及其分析第17-19页
     ·重组表达质粒pcDNA3.1(-)-mPG 的构建第19-22页
     ·利用QlAprep Miniprep 质粒小量提取试剂盒提取重组表达质粒第22页
     ·重组表达质粒在Neuro-2a 神经细胞中的瞬时表达第22-23页
     ·致使Neuro-2a 细胞死亡的G418 最低浓度的确定第23页
     ·表达PrP/GFP 融合蛋白Neuro-2a 细胞系的建立第23-24页
 2 结果第24-31页
   ·目的片段PCR 扩增结果第24-26页
   ·PCR 产物T-A 克隆质粒酶切鉴定结果第26页
   ·PCR 产物序列测定以及分析结果第26页
   ·重组表达质粒pcDNA3.1(-)-mPG 酶切鉴定结果第26-27页
   ·重组表达质粒在Neuro-2a 神经细胞中瞬时表达检测结果第27-28页
   ·致使Neuro-2a 细胞死亡的G418 最低浓度第28页
   ·表达PrP/GFP 细胞系筛选结果第28-31页
     ·单克隆细胞的荧光显微镜检测结果第28-29页
     ·表达绿色荧光蛋白神经细胞株Western-Blotting 检测结果第29-30页
     ·连续传代法鉴定细胞稳定性检测结果第30-31页
 3. 讨论第31-33页
第二章 表达PrP/GFP 融合蛋白Neuro-2a 细胞的感染试第33-43页
 1 材料与方法第33-35页
   ·材料第33-34页
     ·病原与细胞系第33页
     ·主要试剂第33-34页
   ·方法第34-35页
     ·痒病鼠脑匀浆的制备第34页
     ·痒病鼠脑匀浆感染细胞系第34页
     ·感染细胞的处理第34-35页
     ·感染细胞的鉴定第35页
 2 结果第35-37页
   ·3F4 和 1H2 抗体检测细胞样品结果第35-36页
   ·3F4 抗体检测细胞样品结果第36-37页
 3 讨论第37-43页
附录第43-45页
致谢第45-46页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第46页

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