| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-17页 |
| 第一章 人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子表达研究（综述1） | 第17-32页 |
| ·人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的生理生化功能 | 第17-21页 |
| ·人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的表达 | 第17-18页 |
| ·人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的生理功能 | 第18-21页 |
| ·人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的临床应用 | 第21-22页 |
| ·hGM-CSF 在细胞感染诊断中的作用 | 第21页 |
| ·人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的临床治疗作用 | 第21-22页 |
| ·人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的分子生物学特征 | 第22-26页 |
| ·人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子基因特征 | 第22-23页 |
| ·人粒细胞巨噬细胞刺激因子的结构和功能 | 第23-25页 |
| ·人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的信号传导 | 第25页 |
| ·人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子mRNA 半衰期 | 第25-26页 |
| ·人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子转基因表达研究 | 第26-32页 |
| ·大肠杆菌和酵母中的表达研究 | 第26-27页 |
| ·人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子融合蛋白的表达研究 | 第27-28页 |
| ·人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子在动物细胞中表达研究 | 第28-30页 |
| ·人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子在植物中表达研究 | 第30-32页 |
| 第二章 植物基因工程高效表达策略的研究（综述2） | 第32-51页 |
| ·寻找在宿主细胞内表达效率高的启动子 | 第32-35页 |
| ·启动子的类型 | 第32页 |
| ·组成型启动子 | 第32-33页 |
| ·组织特异性启动子 | 第33-34页 |
| ·诱导型启动子 | 第34-35页 |
| ·植物基因表达调控元件 | 第35-36页 |
| ·调控元件类型 | 第35页 |
| ·植物基因工程常用的调节元件 | 第35-36页 |
| ·启动子改造、构建融合基因以及对目的基因的人工改造 | 第36-38页 |
| ·启动子的改造 | 第36页 |
| ·构建融合基因，提高目的基因的表达 | 第36-37页 |
| ·目的基因密码子的优化 | 第37-38页 |
| ·消除影响外源基因表达的位置效应 | 第38-40页 |
| ·利用基质结合区消除位置效应 | 第38-39页 |
| ·利用位点特异性重组消除位置效应 | 第39-40页 |
| ·利用反义技术和RNAi 技术提高目的基因的表达 | 第40-41页 |
| ·反义技术在基因工程中的应用 | 第40-41页 |
| ·RNAi 技术在基因工程中的应用 | 第41页 |
| ·叶绿体基因工程 | 第41-43页 |
| ·采用悬浮培养和病毒瞬时表达等体系生产外源蛋白 | 第43-45页 |
| ·烟草花叶病毒系统 | 第43页 |
| ·豇豆花叶病毒（CPMV）系统 | 第43-44页 |
| ·采用植物悬浮体系生产 | 第44-45页 |
| ·利用分泌体系或定位到特定组织中来提高表达 | 第45-46页 |
| ·核糖开关（riboswitch）的研究 | 第46-48页 |
| ·植物生物反应器的研究 | 第48-51页 |
| 第三章 本研究目的和意义 | 第51-52页 |
| ·本课题研究目的 | 第51页 |
| ·本课题研究意义 | 第51-52页 |
| 第四章 hGM-CSF 基因植物表达载体的构建 | 第52-92页 |
| ·材料和试剂 | 第52-54页 |
| ·质粒和菌种 | 第52页 |
| ·实验试剂 | 第52页 |
| ·溶液和细菌培养基配方 | 第52-53页 |
| ·PCR 扩增所用引物的列表 | 第53-54页 |
| ·实验方法 | 第54-61页 |
| ·质粒DNA 的提取 | 第54-56页 |
| ·目的片段的电泳回收 | 第56-57页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第57页 |
| ·质粒DNA 转化大肠杆菌 | 第57-58页 |
| ·载体和目的DNA 片断的连接 | 第58页 |
| ·植物基因组DNA 提取 | 第58页 |
| ·RNA 的提取 | 第58-61页 |
| ·末端平滑DNA 片段的3'末端加“A”反应 | 第61页 |
| ·实验结果与分析 | 第61-89页 |
| ·β-伴大豆球蛋白α'亚单位启动子的克隆和改造 | 第61-64页 |
| ·拟南芥at2S2启动子的克隆 | 第64-66页 |
| ·拟南芥at2S2终止子的克隆 | 第66-67页 |
| ·拟南芥at2S2基因的克隆 | 第67页 |
| ·人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的人工改造 | 第67-70页 |
| ·人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子表达盒的构建 | 第70-76页 |
| ·构建拟南芥at2S2基因的反义表达载体 | 第76-78页 |
| ·人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子表达载体的构建 | 第78-84页 |
| ·双价表达载体的构建 | 第84-89页 |
| ·载体构建流程图 | 第89页 |
| ·讨论 | 第89-92页 |
| 第五章 拟南芥转化 | 第92-100页 |
| ·材料和试剂 | 第92-95页 |
| ·材料 | 第92页 |
| ·试剂 | 第92页 |
| ·所涉及试剂的配方 | 第92-95页 |
| ·实验方法 | 第95-97页 |
| ·表达载体导入农杆菌 | 第95页 |
| ·拟南芥的培养 | 第95-96页 |
| ·农杆菌转化拟南芥 | 第96页 |
| ·拟南芥种子的收获 | 第96页 |
| ·转化后的筛选、移栽 | 第96-97页 |
| ·纯合转化株系的筛选 | 第97页 |
| ·转基因植株的杂交 | 第97页 |
| ·实验结果与分析 | 第97-98页 |
| ·C、KD、AF系列的转基因植株 | 第97-98页 |
| ·AP系列的转基因植株 | 第98页 |
| ·KDS和AFS系列的转基因植株 | 第98页 |
| ·转基因植株杂交 | 第98页 |
| ·讨论 | 第98-100页 |
| 第六章 转基因植株的分析检测 | 第100-128页 |
| ·材料和试剂 | 第100-103页 |
| ·实验设备 | 第100页 |
| ·实验的试剂 | 第100页 |
| ·主要试剂配方 | 第100-102页 |
| ·PCR 扩增所用引物的列表 | 第102-103页 |
| ·实验方法 | 第103-110页 |
| ·转基因植株的PCR 检测 | 第103页 |
| ·转基因植株的Southern 杂交 | 第103-105页 |
| ·定量PCR 分析 | 第105-106页 |
| ·Bradford 法测定总可溶性蛋白的量 | 第106-107页 |
| ·表达产物的ELISA（Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay）检测 | 第107页 |
| ·蛋白电泳分析 | 第107-108页 |
| ·Western blotting 分析 | 第108-109页 |
| ·TF-1 细胞的活性检测 | 第109-110页 |
| ·结果与分析 | 第110-125页 |
| ·转基因植株的PCR 检测 | 第110-111页 |
| ·转基因植株的Southern blotting 分析 | 第111-112页 |
| ·β-伴大豆球蛋白α'亚单位启动子组织特异性表达分析和种子发育不同时期表达强度分析 | 第112-113页 |
| ·转基因植株及其杂交后代ELISA 和定量分析 | 第113-122页 |
| ·Western blotting 结果分析 | 第122-123页 |
| ·蛋白电泳的结果分析 | 第123页 |
| ·TF-1 细胞生物活性分析 | 第123-125页 |
| ·讨论 | 第125-128页 |
| 第七章 研究的结论和今后工作的展望 | 第128-131页 |
| ·研究主要结果 | 第128-129页 |
| ·研究的创新之处 | 第129页 |
| ·研究中发现的问题 | 第129页 |
| ·今后工作设想 | 第129-131页 |
| 参考文献 | 第131-146页 |
| 附录 缩写词表 | 第146-147页 |
| 致谢 | 第147-149页 |
| 博士期间发表的论文和专利 | 第149-151页 |
