| 摘要 | 第1-6页 |
| 英文缩略词表 | 第6-7页 |
| 中文摘要 | 第7-10页 |
| 英文摘要 | 第10-13页 |
| 第一部分 HBx RNAi 靶点的筛选、RNAi 慢病毒载体制备和病毒的大量包装 | 第13-43页 |
| 引言 | 第13-15页 |
| 试剂和仪器 | 第15-17页 |
| 1. 主要试剂 | 第15页 |
| 2. 主要溶液配制 | 第15-16页 |
| 3. 主要仪器 | 第16页 |
| 4. cDNA 模板合成 | 第16-17页 |
| 研究方法 | 第17-31页 |
| 1. HBx基因RNAi 质粒pSUPER-HBx1 和pSUPER-HBx2 构建 | 第17-18页 |
| 2. 脂质体Lipofectamine PlusTM 转染 | 第18页 |
| 3. ELISA实验步骤 | 第18-19页 |
| 4. 细胞RNA 的抽提步骤 | 第19-20页 |
| 5. RT合成cDNA 第一链 | 第20页 |
| 6. Real-Time PCR 步骤 | 第20-21页 |
| 7. 慢病毒HBx siRNA 双链DNA oligo 的制备 | 第21-22页 |
| 8. 基于miRNA 骨架CMV 启动子启动的慢病毒 RNAi 载体的构建 | 第22-27页 |
| 9. 慢病毒大量包装、纯化、浓缩、以及滴度测定 | 第27-31页 |
| 实验结果 | 第31-37页 |
| 1. HBx RNAi靶位点的筛选与鉴定 | 第31-32页 |
| 2. 慢病毒siRNA双链DNA 退火结果 | 第32-33页 |
| 3. 慢病毒RNAi 载体酶切结果 | 第33页 |
| 4. 慢病毒RNAi 阳性克隆PCR 鉴定结果 | 第33-35页 |
| 5. 病毒滴度计算 | 第35-37页 |
| 讨论 | 第37-41页 |
| 参考文献 | 第41-43页 |
| 第二部分 慢病毒介导的HBx RNAi 对HCC 生长能力和相关肿瘤信号转导通路的研究 | 第43-71页 |
| 引言 | 第43-46页 |
| 试剂和仪器 | 第46-47页 |
| 1. 材料 | 第46页 |
| 2. 主要溶液配置 | 第46-47页 |
| 3. 主要仪器 | 第47页 |
| 研究方法 | 第47-51页 |
| 1. 细胞培养(HepG2.2.15 细胞系) | 第47-48页 |
| 2. western blot 上样液制备 | 第48页 |
| 3. western blot 操作步骤 | 第48-50页 |
| 4. HBV DNA 定量 | 第50页 |
| 5. HepG2.2.15 细胞株裸鼠成瘤 | 第50页 |
| 6. Oligo GEArray 基因芯片实验技术 | 第50-51页 |
| 实验结果 | 第51-60页 |
| 1. ELISA方法检测细胞上清 HBsAg 结果 | 第51-52页 |
| 2. 通过western blot 检测HBsAg 表达结果 | 第52-53页 |
| 3. 慢病毒系统RNAi 后RNA 水平的变化 | 第53-54页 |
| 4. 慢病毒系统RNAi 后细胞上清中 HBV DNA水平的变化 | 第54-55页 |
| 5. HepG2.2.15 细胞裸鼠成瘤，HBx RNAi 后肿瘤生长能力下降 | 第55页 |
| 6. Oligo GEArray 人类肿瘤基因芯片分析结果 | 第55-60页 |
| 讨论 | 第60-67页 |
| 参考文献 | 第67-71页 |
| 小结 | 第71-72页 |
| 附录一 | 第72-97页 |
| 文献综述（一） | 第72-85页 |
| 文献综述（二） | 第85-97页 |
| 附录二 博士期间参与的工作及发表的论文 | 第97-98页 |
| 致谢 | 第98页 |
