| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 转基因烟草表达西红花CSzCD基因产生西红花酸 | 第10-40页 |
| 摘要 | 第10-11页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 1.材料和方法 | 第12-27页 |
| ·材料 | 第12-15页 |
| ·植物材料 | 第12页 |
| ·菌株 | 第12页 |
| ·培养基 | 第12-13页 |
| ·质粒提取液 | 第13页 |
| ·Southern blotting试剂 | 第13-14页 |
| ·Western bloting试剂 | 第14页 |
| ·试剂盒和工具酶 | 第14页 |
| ·药品 | 第14页 |
| ·引物 | 第14-15页 |
| ·方法 | 第15-27页 |
| ·CSzCD基因的克隆 | 第15-16页 |
| ·植物表达性载体pBI121-CSzCD的构建 | 第16-19页 |
| ·转化 | 第19页 |
| ·转化子的鉴定 | 第19-20页 |
| ·pBI121-CSzCD转化农杆菌EHA105 | 第20-21页 |
| ·叶盘法转化及抗性植株的筛选 | 第21页 |
| ·转基因烟草叶片DNA的提取 | 第21-22页 |
| ·转基因烟草PCR检测 | 第22页 |
| ·转基因烟草的Southern杂交 | 第22-25页 |
| ·转基因烟草Western blotting杂交 | 第25-26页 |
| ·转基因烟草的紫外光谱扫描和HPLC分析 | 第26-27页 |
| 2 结果与分析 | 第27-36页 |
| ·西红花柱头总RNA的提取 | 第27页 |
| ·含有pMD-18-T-CSzCD质粒测序结果 | 第27-29页 |
| ·转化进大肠杆菌JM109中pBI121-CSzCD重组质粒的鉴定 | 第29页 |
| ·重组质粒pBI121-CSzCD转入农杆菌中的鉴定 | 第29-30页 |
| ·烟草组培 | 第30-32页 |
| ·转基因烟草的PCR检测和Southern blotting分析 | 第32-33页 |
| ·转基因烟草的Western blotting检测 | 第33-34页 |
| ·转基因烟草中代谢产物的紫外扫描及HPLC分析 | 第34-36页 |
| ·紫外光谱扫描 | 第34-35页 |
| ·HPLC分析 | 第35-36页 |
| 3.讨论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-40页 |
| 第二章 化学合成的西红花酸体外抗肿瘤作用研究 | 第40-53页 |
| 摘要 | 第40页 |
| 引言 | 第40-41页 |
| 1 实验材料 | 第41-42页 |
| ·材料与仪器 | 第41页 |
| ·试剂的配制 | 第41-42页 |
| 2 方法: | 第42-44页 |
| ·MTT法 | 第42-43页 |
| ·细胞计数 | 第43页 |
| ·DNA ladder | 第43-44页 |
| ·DNA的提取 | 第43-44页 |
| ·DNA电泳 | 第44页 |
| 3 实验结果 | 第44-51页 |
| 4 结论与分析 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-53页 |
| 综述 植物次生代谢产物研究进展 | 第53-83页 |
| 前言 | 第53-54页 |
| 1 初生代谢和次生代谢 | 第54页 |
| 2 植物次生代谢物的主要类型及分布 | 第54-55页 |
| ·酚类 | 第55页 |
| ·萜类 | 第55页 |
| ·含氮化合物 | 第55页 |
| ·其他 | 第55页 |
| 3 植物次生代谢物合成途径 | 第55-56页 |
| 4.植物次生代谢物的功能及作用 | 第56-60页 |
| ·次生代谢物的生态意义 | 第56-58页 |
| ·提高植物对物理环境的适应性 | 第56-57页 |
| ·抵御天敌的侵袭 | 第57页 |
| ·增强抗病性 | 第57页 |
| ·提高植物种间竞争能力 | 第57页 |
| ·维系植物与其他生物间的互惠关系 | 第57-58页 |
| ·次生代谢物在植物进化中的作用 | 第58页 |
| ·次生代谢物在整个代谢活动中的重要地位 | 第58页 |
| ·次生代谢物与作物品质 | 第58页 |
| ·次生代谢物的药用价值 | 第58-60页 |
| ·红豆杉 | 第59页 |
| ·银杏 | 第59页 |
| ·红景天 | 第59-60页 |
| ·西红花 | 第60页 |
| 5 植物次生代谢产物细胞工程 | 第60-73页 |
| ·影响细胞培养次生代谢的因素 | 第62-71页 |
| ·培养中植物细胞特点对次生代谢的影响 | 第62-63页 |
| ·外植体选择 | 第63页 |
| ·高产细胞系的选择 | 第63页 |
| ·物理因素影响 | 第63-65页 |
| ·化学因素 | 第65-71页 |
| ·培养方法 | 第71-73页 |
| ·两步培养技术 | 第71页 |
| ·固定化培养技术 | 第71页 |
| ·两相培养技术 | 第71-72页 |
| ·毛状根培养技术 | 第72页 |
| ·冠瘿瘤培养技术 | 第72-73页 |
| 6 植物次生代谢基因工程 | 第73-76页 |
| ·植物次生代谢图谱 | 第73页 |
| ·植物次生代谢基因工程的策略 | 第73-74页 |
| ·调控因子的作用 | 第74页 |
| ·基因的协同转化 | 第74页 |
| ·次生代谢途径中关键酶的基因工程 | 第74-75页 |
| ·基因的添加 | 第74-75页 |
| ·基因的剔除 | 第75页 |
| ·次生代谢途径中调节基因或转录因子的基因工程 | 第75页 |
| ·植物转基因方法 | 第75-76页 |
| ·农杆菌介导的转基因技术 | 第75-76页 |
| ·基因枪直接转基因技术 | 第76页 |
| 7 展望 | 第76页 |
| 参考文献 | 第76-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 在读期间发表论文情况 | 第84-85页 |
