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草鱼T细胞表面分子CD4L和CD8α/β的cDNA克隆及其免疫学特性研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-11页
第一章 绪论第11-13页
   ·研究鱼类免疫的意义第11页
   ·鱼类T 细胞标记CD4L 和CD8 的研究近况第11-12页
   ·本课题研究目的和内容第12-13页
第二章 草鱼T 细胞表面分子CD4L 和CD8α/β的 cDNA 克隆及其免疫学特性研究第13-29页
   ·实验材料第13-14页
     ·实验动物第13页
     ·菌种和质粒第13页
     ·主要实验仪器和设备第13页
     ·实验试剂第13-14页
     ·溶液配制第14页
   ·实验方法与操作第14-18页
     ·总RNA 的提取第14-15页
     ·反转录合成cDNA 模板第15页
     ·基因的克隆与测序以及序列分析第15-17页
       ·基因的克隆方法第15页
       ·凝胶电泳第15页
       ·目的片段的胶回收纯化第15-16页
       ·目的片段与pGM-T 载体的连接第16页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第16页
       ·质粒DNA 的转化第16-17页
       ·转化子的克隆筛选与测序第17页
       ·生物信息学分析第17页
     ·草鱼T 细胞表面标记CD4L、CD8α和CD8β的功能研究第17-18页
       ·半定量检测CD4L、CD8α和CD8β于不同组织中的分布情况第17页
       ·草鱼外周血淋巴细胞(PBLs)的分离第17-18页
       ·运用real-time PCR 功能性鉴定CD4L、CD8α和CD8β第18页
       ·实验结果的统计与分析第18页
   ·实验结果第18-27页
     ·草鱼T 淋巴细胞表面标记CD4L、CD8α和CD8β的克隆第18-21页
     ·基因序列的系统进化分析第21-22页
     ·草鱼CD4L、CD8α和CD8β在不同组织中的表达分布第22-23页
     ·草鱼CD4L、CD8α和CD8β的功能鉴定第23-27页
       ·LPS 对PBLs 中CD4L、CD8α和CD8β的mRNA 表达无影响第23-24页
       ·PHA 可以明显刺激PBLs 中CD4L、CD8α和CD8β的mRNA 表达第24-25页
       ·TGF-β1 可以明显刺激CD4L、CD8α和CD8β的表达第25-27页
   ·讨论第27-29页
第三章 草鱼NF-κB 抑制蛋白IκBα的鉴定和功能研究第29-46页
   ·关于NF-κB/IκBα信号通路的简介第29-31页
   ·实验材料第31-33页
     ·实验动物第31页
     ·主要试剂及溶液配制第31-33页
     ·主要仪器和设备第33页
   ·实验方法第33-36页
     ·基因的克隆与测序以及序列分析第33页
     ·草鱼IκBα的功能研究第33-36页
       ·荧光定量检测IκBα于不同组织中的分布情况第33-34页
       ·草鱼外周血淋巴细胞(PBLs)的分离第34页
       ·运用real-time PCR 技术研究IκBα在NF-κB 信号通路中所起到的作用第34页
       ·应用western-blot 研究IκBα的磷酸化状况第34-35页
       ·实验结果的统计与分析第35-36页
   ·实验结果第36-44页
     ·草鱼NF-κB 抑制蛋白IκBα的氨基酸序列分析第36-37页
     ·草鱼IκBα氨基酸系统进化树分析第37页
     ·草鱼IκBα在不同组织中的表达分布第37-38页
     ·LPS 对草鱼外周血淋巴细胞(PBLs)中IκBαmRNA 表达水平的影响第38-39页
       ·不同剂量条件下LPS 对草鱼PBLs 中IκBαmRNA 表达水平的影响第38-39页
       ·不同时间条件下LPS 对草鱼PBLs 中IκBαmRNA 表达水平的影响第39页
     ·PHA 对草鱼PBLs 中IκBαm RNA 表达水平的影响第39-41页
       ·不同剂量条件下PHA 对草鱼PBLs 中IκBαmRNA 表达水平的影响第39-40页
       ·不同时间条件下PHA 对草鱼PBLs 中IκBαmRNA 表达水平的影响第40-41页
     ·NF-κB 抑制剂PDTC 对草鱼PBLs 中IκBαmRNA 表达水平的影响第41-42页
       ·不同剂量条件下PDTC 对草鱼PBLs 中IκBα表达水平的影响第41页
       ·PDTC 可以明显抑制LPS 和PHA 对草鱼PBLs 中IκBαmRN 的上调作用第41-42页
     ·Poly I:C 对草鱼外周血淋巴细胞的影响第42-43页
       ·不同剂量条件下Poly I:C 对草鱼PBLs 中IκBα表达水平的影响第42-43页
       ·不同时间条件下Poly I:C 对草鱼PBLs 中IκBα表达水平的影响第43页
     ·LPS 和PHA 分别对于草鱼PBLs 中IκBα的磷酸化影响第43-44页
       ·LPS 对于草鱼PBLs 中IκBα蛋白的磷酸化影响第43-44页
       ·PHA 对于草鱼PBLs 中IκBα蛋白的磷酸化影响第44页
   ·讨论第44-46页
致谢第46-47页
参考文献第47-53页
攻读硕士期间取得的研究成果第53-54页

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