| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-13页 |
| ·研究鱼类免疫的意义 | 第11页 |
| ·鱼类T 细胞标记CD4L 和CD8 的研究近况 | 第11-12页 |
| ·本课题研究目的和内容 | 第12-13页 |
| 第二章 草鱼T 细胞表面分子CD4L 和CD8α/β的 cDNA 克隆及其免疫学特性研究 | 第13-29页 |
| ·实验材料 | 第13-14页 |
| ·实验动物 | 第13页 |
| ·菌种和质粒 | 第13页 |
| ·主要实验仪器和设备 | 第13页 |
| ·实验试剂 | 第13-14页 |
| ·溶液配制 | 第14页 |
| ·实验方法与操作 | 第14-18页 |
| ·总RNA 的提取 | 第14-15页 |
| ·反转录合成cDNA 模板 | 第15页 |
| ·基因的克隆与测序以及序列分析 | 第15-17页 |
| ·基因的克隆方法 | 第15页 |
| ·凝胶电泳 | 第15页 |
| ·目的片段的胶回收纯化 | 第15-16页 |
| ·目的片段与pGM-T 载体的连接 | 第16页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第16页 |
| ·质粒DNA 的转化 | 第16-17页 |
| ·转化子的克隆筛选与测序 | 第17页 |
| ·生物信息学分析 | 第17页 |
| ·草鱼T 细胞表面标记CD4L、CD8α和CD8β的功能研究 | 第17-18页 |
| ·半定量检测CD4L、CD8α和CD8β于不同组织中的分布情况 | 第17页 |
| ·草鱼外周血淋巴细胞(PBLs)的分离 | 第17-18页 |
| ·运用real-time PCR 功能性鉴定CD4L、CD8α和CD8β | 第18页 |
| ·实验结果的统计与分析 | 第18页 |
| ·实验结果 | 第18-27页 |
| ·草鱼T 淋巴细胞表面标记CD4L、CD8α和CD8β的克隆 | 第18-21页 |
| ·基因序列的系统进化分析 | 第21-22页 |
| ·草鱼CD4L、CD8α和CD8β在不同组织中的表达分布 | 第22-23页 |
| ·草鱼CD4L、CD8α和CD8β的功能鉴定 | 第23-27页 |
| ·LPS 对PBLs 中CD4L、CD8α和CD8β的mRNA 表达无影响 | 第23-24页 |
| ·PHA 可以明显刺激PBLs 中CD4L、CD8α和CD8β的mRNA 表达 | 第24-25页 |
| ·TGF-β1 可以明显刺激CD4L、CD8α和CD8β的表达 | 第25-27页 |
| ·讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 草鱼NF-κB 抑制蛋白IκBα的鉴定和功能研究 | 第29-46页 |
| ·关于NF-κB/IκBα信号通路的简介 | 第29-31页 |
| ·实验材料 | 第31-33页 |
| ·实验动物 | 第31页 |
| ·主要试剂及溶液配制 | 第31-33页 |
| ·主要仪器和设备 | 第33页 |
| ·实验方法 | 第33-36页 |
| ·基因的克隆与测序以及序列分析 | 第33页 |
| ·草鱼IκBα的功能研究 | 第33-36页 |
| ·荧光定量检测IκBα于不同组织中的分布情况 | 第33-34页 |
| ·草鱼外周血淋巴细胞(PBLs)的分离 | 第34页 |
| ·运用real-time PCR 技术研究IκBα在NF-κB 信号通路中所起到的作用 | 第34页 |
| ·应用western-blot 研究IκBα的磷酸化状况 | 第34-35页 |
| ·实验结果的统计与分析 | 第35-36页 |
| ·实验结果 | 第36-44页 |
| ·草鱼NF-κB 抑制蛋白IκBα的氨基酸序列分析 | 第36-37页 |
| ·草鱼IκBα氨基酸系统进化树分析 | 第37页 |
| ·草鱼IκBα在不同组织中的表达分布 | 第37-38页 |
| ·LPS 对草鱼外周血淋巴细胞(PBLs)中IκBαmRNA 表达水平的影响 | 第38-39页 |
| ·不同剂量条件下LPS 对草鱼PBLs 中IκBαmRNA 表达水平的影响 | 第38-39页 |
| ·不同时间条件下LPS 对草鱼PBLs 中IκBαmRNA 表达水平的影响 | 第39页 |
| ·PHA 对草鱼PBLs 中IκBαm RNA 表达水平的影响 | 第39-41页 |
| ·不同剂量条件下PHA 对草鱼PBLs 中IκBαmRNA 表达水平的影响 | 第39-40页 |
| ·不同时间条件下PHA 对草鱼PBLs 中IκBαmRNA 表达水平的影响 | 第40-41页 |
| ·NF-κB 抑制剂PDTC 对草鱼PBLs 中IκBαmRNA 表达水平的影响 | 第41-42页 |
| ·不同剂量条件下PDTC 对草鱼PBLs 中IκBα表达水平的影响 | 第41页 |
| ·PDTC 可以明显抑制LPS 和PHA 对草鱼PBLs 中IκBαmRN 的上调作用 | 第41-42页 |
| ·Poly I:C 对草鱼外周血淋巴细胞的影响 | 第42-43页 |
| ·不同剂量条件下Poly I:C 对草鱼PBLs 中IκBα表达水平的影响 | 第42-43页 |
| ·不同时间条件下Poly I:C 对草鱼PBLs 中IκBα表达水平的影响 | 第43页 |
| ·LPS 和PHA 分别对于草鱼PBLs 中IκBα的磷酸化影响 | 第43-44页 |
| ·LPS 对于草鱼PBLs 中IκBα蛋白的磷酸化影响 | 第43-44页 |
| ·PHA 对于草鱼PBLs 中IκBα蛋白的磷酸化影响 | 第44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-53页 |
| 攻读硕士期间取得的研究成果 | 第53-54页 |