英文缩略词表 | 第1-8页 |
第一章 绪论 | 第8-23页 |
第一节 AZURIN 研究背景及意义 | 第8-14页 |
一、Azurin 的结构特点 | 第8-9页 |
二、Azurin 的基础研究 | 第9-11页 |
三、对azurin 应用的探索 | 第11-12页 |
四、Azurin 的抗肿瘤作用 | 第12-14页 |
第二节 细胞凋亡与肿瘤 | 第14-20页 |
一、凋亡细胞的变化 | 第14-15页 |
二、细胞凋亡与肿瘤的发生 | 第15-17页 |
三、细胞凋亡与肿瘤治疗 | 第17-20页 |
第三节 新生血管生成与肿瘤 | 第20-23页 |
一、血管新生与肿瘤的生长 | 第20-21页 |
二、血管新生与肿瘤的转移 | 第21页 |
三、血管新生与肿瘤的治疗 | 第21-23页 |
第二章 材料与方法 | 第23-35页 |
第一节 实验材料 | 第23-25页 |
·菌株和细胞 | 第23页 |
·主要试剂 | 第23-24页 |
·克隆载体 | 第24页 |
·主要实验仪器 | 第24-25页 |
第二节 实验流程 | 第25-26页 |
第三节 实验方法 | 第26-35页 |
·感受态细胞的制备 | 第26页 |
·细菌质粒提取 | 第26-28页 |
·培养细菌 | 第27页 |
·破碎细菌 | 第27页 |
·质粒DNA 的回收 | 第27-28页 |
·质粒的转化 | 第28页 |
·酶切和Azurin 编码基因片断的获得 | 第28页 |
·目的基因的克隆,表达和筛选 | 第28-30页 |
·目的基因的克隆 | 第28-29页 |
·克隆的表达和筛选 | 第29-30页 |
·目标蛋白的可溶性表达 | 第30页 |
·Azurin 蛋白的纯化 | 第30-31页 |
·考马斯亮蓝G-250 染色法测定azurin 蛋白含量 | 第31-32页 |
·Azurin 蛋白的生物活性研究 | 第32页 |
·Azurin 的胰酶降解片断对细胞的作用 | 第32-35页 |
第三章 实验结果 | 第35-47页 |
第一节 AZURIN 基因的克隆表达和蛋白质纯化 | 第35-41页 |
·重组产物的鉴定和测序 | 第35-36页 |
·重组产物的表达和筛选 | 第36-38页 |
·Azurin 蛋白的纯化 | 第38-39页 |
·凝血酶作用去除azurin 蛋白的N-末端His-tag 序列 | 第39页 |
·小结 | 第39-41页 |
第二节 AZURIN 蛋白生物活性研究 | 第41-47页 |
·Azurin 对肿瘤细胞生长的抑制作用 | 第41-42页 |
·Azurin 对人脐静脉内皮细胞生长的抑制作用 | 第42页 |
·Azurin 的胰酶降解片断对细胞生长的作用 | 第42-43页 |
·Azurin 蛋白对人脐静脉内皮细胞形成血管能力的影响 | 第43-44页 |
·小结 | 第44-47页 |
参考文献 | 第47-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
摘要 | 第53-56页 |
Abstract | 第56-58页 |
附录Ⅰ | 第58页 |