禽流感病毒H5、H9蛋白特异性单克隆抗体的制备与鉴定
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 前言 | 第8-18页 |
| 1.禽流感 | 第8-10页 |
| ·高致病力禽流感 | 第9-10页 |
| ·低致病力禽流感 | 第10页 |
| 2 禽流感病毒结构特点 | 第10-14页 |
| ·血凝素 | 第12-13页 |
| ·神经氨酸酶 | 第13页 |
| ·核蛋白 | 第13-14页 |
| ·基质蛋白 | 第14页 |
| 3 现行禽流感的主要诊断方法 | 第14-15页 |
| 4 单克隆抗体在禽流感检测中的应用 | 第15-16页 |
| 5 联合检测技术 | 第16页 |
| 6 禽流感的防制 | 第16-18页 |
| 正文 | 第18-38页 |
| 1 材料 | 第18-20页 |
| ·病毒 | 第18页 |
| ·动物与细胞 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·主要仪器和耗材 | 第18-19页 |
| ·主要培养基的配制 | 第19-20页 |
| 2 实验方法 | 第20-26页 |
| ·免疫用抗原和ELISA包被抗原的制备 | 第20页 |
| ·免疫用抗原的制备 | 第20页 |
| ·ELISA包被抗原制备 | 第20页 |
| ·小鼠的免疫程序 | 第20-21页 |
| ·ELISA方法的建立 | 第21页 |
| ·筛选方法的建立 | 第21-22页 |
| ·HA试验(β微量法) | 第21-22页 |
| ·HI试验 | 第22页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第22-24页 |
| ·饲养细胞的制备 | 第22-23页 |
| ·SP2／O细胞的制备 | 第23页 |
| ·脾细胞的制备 | 第23页 |
| ·细胞融合 | 第23-24页 |
| ·杂交瘤细胞的选择性培养及单克隆抗体的筛选检测 | 第24-25页 |
| ·融合细胞的选择性培养 | 第24页 |
| ·阳性杂交瘤细胞株的筛选 | 第24页 |
| ·克隆及扩增(有限稀释法) | 第24-25页 |
| ·杂交瘤细胞的冻存和复苏 | 第25-26页 |
| ·细胞的冻存 | 第25页 |
| ·细胞复苏 | 第25-26页 |
| ·单克隆抗体的大量制备 | 第26页 |
| ·体外培养法 | 第26页 |
| ·体内诱生腹水法 | 第26页 |
| 3 单抗特性的测定 | 第26-27页 |
| ·单抗效价的测定 | 第26页 |
| ·单抗亚类的鉴定 | 第26-27页 |
| ·单抗特异性的测定 | 第27页 |
| ·与其它病毒的交叉反应试验 | 第27页 |
| 4 结果 | 第27-33页 |
| ·免疫用抗原的制备 | 第27页 |
| ·ELISA包被抗原的制备 | 第27页 |
| ·间接ELISA的建立 | 第27-29页 |
| ·BALB／C小鼠免疫检测结果 | 第29页 |
| ·骨髓瘤细胞的制备 | 第29-30页 |
| ·细胞的融合与克隆 | 第30-31页 |
| ·阳性杂交瘤细胞系的筛选 | 第31-32页 |
| ·单抗特异性测定结果 | 第32-33页 |
| ·间接ELISA效价测定结果 | 第32页 |
| ·HI效价测定结果 | 第32页 |
| ·单抗亚类的鉴定 | 第32页 |
| ·单抗特异性试验 | 第32-33页 |
| 5 讨论 | 第33-37页 |
| ·抗原的制备 | 第33页 |
| ·关于免疫程序 | 第33-34页 |
| ·关于细胞融合 | 第34-35页 |
| ·关于细胞克隆和杂交瘤细胞的稳定性 | 第35页 |
| ·关于阳性克隆的筛选 | 第35-36页 |
| ·关于实验中的污染问题 | 第36-37页 |
| 6 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 作者简历 | 第43页 |
