| 引言 | 第1-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-55页 |
| ·微藻概述 | 第17-23页 |
| ·微藻的定义与分类 | 第17页 |
| ·微藻的主要特点 | 第17页 |
| ·微藻的应用价值 | 第17-21页 |
| ·小球藻研究概况 | 第21-23页 |
| ·微藻基因工程研究概况 | 第23-32页 |
| ·蓝藻基因工程 | 第23-26页 |
| ·蓝藻分子遗传学 | 第23-24页 |
| ·蓝藻质粒及其载体系统 | 第24-25页 |
| ·蓝藻基因转移系统 | 第25-26页 |
| ·真核微藻基因工程 | 第26-31页 |
| ·基因的研究 | 第27页 |
| ·载体系统的研究 | 第27-28页 |
| ·真核微藻的遗传转化 | 第28-31页 |
| ·微藻基因工程应用前景及展望 | 第31-32页 |
| ·利用基因工程培育优良藻种 | 第31页 |
| ·利用藻类作为生物反应器生产有用产品 | 第31页 |
| ·藻类天然产物的生产 | 第31-32页 |
| ·藻类基因在农作物改良中的应用 | 第32页 |
| ·植酸酶的研究进展及应用前景 | 第32-39页 |
| ·植酸及植酸酶 | 第32-39页 |
| ·植酸 | 第32-33页 |
| ·植酸酶 | 第33-36页 |
| ·植酸酶的基因工程 | 第36-39页 |
| ·研究目的和意义 | 第39-40页 |
| ·研究目的 | 第39页 |
| ·研究意义 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-55页 |
| 第二章 小球藻基因工程选择标记的确立 | 第55-69页 |
| 引言 | 第55页 |
| ·材料和方法 | 第55-57页 |
| ·材料 | 第55-56页 |
| ·藻种 | 第55页 |
| ·培养基 | 第55页 |
| ·主要试剂 | 第55-56页 |
| ·方法 | 第56-57页 |
| ·培养方法 | 第56页 |
| ·小球藻对10种抗生素敏感性的测定 | 第56页 |
| ·淡化培养对小球藻生长的影响 | 第56页 |
| ·4种抗生素对小球藻半致死剂量的测定 | 第56-57页 |
| ·固体培养基中G418对小球藻生长的影响 | 第57页 |
| ·实验结果 | 第57-66页 |
| ·小球藻对10种抗生素的敏感性 | 第57-59页 |
| ·海水液体培养基中4种抗生素对小球藻半致死剂量 | 第59-62页 |
| ·淡化液体培养中4种抗生素对小球藻半致死剂量 | 第62-65页 |
| ·固体培养基中G418对小球藻生长的影响 | 第65-66页 |
| ·讨论 | 第66-67页 |
| ·小球藻对潮霉素的敏感性 | 第66页 |
| ·小球藻对G418的敏感性 | 第66-67页 |
| ·小球藻对氯霉素的敏感性 | 第67页 |
| ·小球藻对Zeocin的敏感性 | 第67页 |
| ·淡化培养时小球藻对抗生素的敏感性 | 第67页 |
| ·G418在固体培养基中对小球藻生长的抑制 | 第67页 |
| ·小结 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-69页 |
| 第三章 小球藻无菌培养体系的建立 | 第69-85页 |
| 引言 | 第69页 |
| ·材料和方法 | 第69-71页 |
| ·材料 | 第69页 |
| ·藻种 | 第69页 |
| ·主要试剂 | 第69页 |
| ·培养基 | 第69页 |
| ·方法 | 第69-71页 |
| ·培养方法 | 第69页 |
| ·小球藻细胞数及培养液中细菌数的测量 | 第69-70页 |
| ·小球藻培养液内的细菌对不同抗生素敏感性的测定 | 第70页 |
| ·小球藻培养液除菌方法的建立 | 第70页 |
| ·混合抗生素处理对小球藻和细菌生长的影响 | 第70-71页 |
| ·小球藻干重的测量 | 第71页 |
| ·小球藻细胞生长的测量 | 第71页 |
| ·结果 | 第71-81页 |
| ·小球藻培养液内细菌对不同抗生素的敏感性 | 第71页 |
| ·小球藻无菌培养体系的建立 | 第71-73页 |
| ·抗生素对小球藻细胞及其培养液中细菌的影响 | 第73-74页 |
| ·培养条件对小球藻生长的影响 | 第74-78页 |
| ·营养因素对小球藻生长的影响 | 第78-81页 |
| ·讨论 | 第81-83页 |
| ·抗生素除菌 | 第81-82页 |
| ·pH值对小球藻生长的影响 | 第82页 |
| ·接种量对小球藻生长的影响 | 第82页 |
| ·光照强度对小球藻生长的影响 | 第82页 |
| ·培养温度对小球藻生长的影响 | 第82-83页 |
| ·小结 | 第83页 |
| 参考文献 | 第83-85页 |
| 第四章 以gus基因优化小球藻电击转化的条件 | 第85-98页 |
| 引言 | 第85页 |
| ·材料与方法 | 第85-88页 |
| ·材料 | 第85-86页 |
| ·藻种 | 第85页 |
| ·菌种与质粒 | 第85-86页 |
| ·主要培养基 | 第86页 |
| ·主要仪器 | 第86页 |
| ·方法 | 第86-88页 |
| ·藻种培养 | 第86页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第86-87页 |
| ·电击法转化小球藻的方法 | 第87页 |
| ·GUS酶活的检测——荧光检测法 | 第87-88页 |
| ·结果与分析 | 第88-94页 |
| ·GUS本底的定量测定 | 第88-89页 |
| ·电击条件对转化效率的影响 | 第89-91页 |
| ·生长时间对转化效率的影响 | 第91-92页 |
| ·渗透处理对转化效率的影响 | 第92页 |
| ·运载DNA浓度对转化效率的影响 | 第92-93页 |
| ·质粒浓度对转化效率的影响 | 第93-94页 |
| ·讨论 | 第94-95页 |
| ·CaMV35S启动子对外源基因在小球藻中表达的作用 | 第94页 |
| ·gus基因在小球藻中的瞬间表达 | 第94页 |
| ·电击仪参数设置对小球藻转化率的影响 | 第94-95页 |
| ·其它电击转化条件对小球藻转化率的影响 | 第95页 |
| ·小结 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-98页 |
| 第五章 植酸酶基因在小球藻中的表达 | 第98-115页 |
| 引言 | 第98页 |
| ·材料和方法 | 第98-104页 |
| ·材料 | 第98-99页 |
| ·藻种 | 第98页 |
| ·菌种与质粒 | 第98-99页 |
| ·主要培养基 | 第99页 |
| ·酶及试剂 | 第99页 |
| ·主要仪器 | 第99页 |
| ·方法 | 第99-104页 |
| ·构建pBI121/phyAⅡ的相关方法 | 第99-100页 |
| ·植酸酶基因转化小球藻的方法 | 第100页 |
| ·转化藻株的抗生素筛选 | 第100页 |
| ·小球藻DNA的提取 | 第100-101页 |
| ·转化藻株的PCR检测 | 第101页 |
| ·转化藻株的Southern-blotting检测 | 第101-102页 |
| ·小球藻总RNA的提取 | 第102页 |
| ·转植酸酶基因小球藻藻株的RT-PCR检测 | 第102页 |
| ·转植酸酶基因小球藻藻株的植酸酶活性和酶性质测定 | 第102-104页 |
| ·结果 | 第104-112页 |
| ·植酸酶基因表达载体的构建 | 第104-105页 |
| ·转化藻株的抗生素筛选 | 第105-106页 |
| ·转化藻株的PCR检测 | 第106页 |
| ·转化藻株的PCR检测阳性率统计 | 第106页 |
| ·转化藻株的PCR产物测序结果 | 第106-107页 |
| ·转化藻株的Southern-blotting检测 | 第107-108页 |
| ·转植酸酶基因小球藻藻株的RT-PCR检测 | 第108页 |
| ·转植酸酶基因小球藻藻株的植酸酶活性检测 | 第108-110页 |
| ·转植酸酶基因小球藻藻株的植酸酶性质测定 | 第110-112页 |
| ·讨论 | 第112-113页 |
| ·结论 | 第113页 |
| 参考文献 | 第113-115页 |
| 第六章 结论、创新点与后续研究工作展望 | 第115-118页 |
| ·结论 | 第115页 |
| ·创新点摘要 | 第115-116页 |
| ·有待进一步开展的工作 | 第116页 |
| ·展望 | 第116-118页 |
| 攻读博士学位期间发表及完成的学术论文 | 第118-119页 |
| 致谢 | 第119-120页 |
| 附录1 | 第120-121页 |
| 大连理工大学学位论文版权使用授权书 | 第121-123页 |
