1 引言 | 第1-14页 |
·防御素的分类 | 第7页 |
·β–防御素的分布 | 第7-8页 |
·β–防御素的结构特征 | 第8-9页 |
·β-防御素的生物学活性及应用前景 | 第9-11页 |
·β- 防御素的生物学活性 | 第9页 |
·抗菌活性 | 第9-10页 |
·抗病毒作用 | 第10页 |
·细胞毒性 | 第10页 |
·免疫活性 | 第10-11页 |
·β-防御素的作用机理 | 第11页 |
·β-防御素抗菌作用机理 | 第11页 |
·β-防御素抗病毒作用机理 | 第11页 |
·β- 防御素的应用 | 第11-13页 |
·解决细菌耐药问题 | 第11-12页 |
·在抗肿瘤方面的应用 | 第12页 |
·用于调动机体适应性免疫 | 第12页 |
·治疗肺部感染 | 第12页 |
·治疗胃肠疾病 | 第12-13页 |
·治疗其它疾病 | 第13页 |
·防御素的表达调节 | 第13页 |
·孕酮对雌性生殖道的作用 | 第13-14页 |
·孕激素 | 第13-14页 |
·来源与种类 | 第13页 |
·生理作用 | 第13-14页 |
·临床应用 | 第14页 |
·孕酮对雌性生殖道的作用 | 第14页 |
·结束语 | 第14页 |
2. 材料和方法 | 第14-20页 |
·材料 | 第14-15页 |
·实验材料 | 第14-15页 |
·仪器设备 | 第15页 |
·试验药品 | 第15页 |
·方法 | 第15-20页 |
·输卵管上皮细胞培养方法的建立 | 第15-17页 |
·输卵管上皮细胞原代培养 | 第15页 |
·传代培养 | 第15-16页 |
·染色体核型分析 | 第16页 |
·免疫组化法鉴定 | 第16-17页 |
·组织切片免疫组化 | 第16页 |
·免疫组化法鉴定培养的输卵管上皮细胞 | 第16-17页 |
·不同浓度的孕酮对上皮细胞β-防御素产生量的影响 | 第17页 |
·培养的输卵管上皮细胞的总RNA 提取及检测 | 第17-18页 |
·培养的输卵管上皮细胞的总 RNA 提取 | 第17-18页 |
·绵羊输卵管上皮组织及培养细胞总 RNA 的检测 | 第18页 |
·半定量RT-PCR 方法检测孕酮对β-防御素表达量的影响 | 第18-20页 |
·引物设计与合成 | 第18页 |
·β-防御素引物序列为 | 第18页 |
·β-肌动蛋白引物序列为 | 第18页 |
·RT—PCR 反应(两步法) | 第18-20页 |
·RT 反应体系为 | 第18-19页 |
·PCR反应 | 第19-20页 |
·半定量PCR反应中Mg~(2+)浓度的选择 | 第20页 |
·半定量PCR反应中循环数的选择 | 第20页 |
·防御素基因与内参基因(β-肌动蛋白基因)的竞争性RT-PCR | 第20页 |
3 结果 | 第20-31页 |
·培养细胞的形态 | 第20-24页 |
·从输卵管上皮分离并经过胶原酶消化、洗涤后准备培养的细胞形态. | 第20-21页 |
·培养48 小时的细胞形态 | 第21页 |
·培养72 小时的细胞形态 | 第21-22页 |
·培养120 小时的细胞形态 | 第22-23页 |
·培养168 小时的细胞形态 | 第23页 |
·传代培养细胞形态 | 第23-24页 |
·染色体核型分析 | 第24-25页 |
·免疫组化 | 第25-27页 |
·输卵管切片角蛋白免疫组化染色结果 | 第25页 |
·培养的输卵管上皮细胞免疫组化染色结果 | 第25-27页 |
·半定量 RT-PCR 检测结果 | 第27-31页 |
·加入不同浓度的孕酮后培养的细胞总 RNA 提取结果 | 第27页 |
·半定量PCR反应中Mg2+浓度的选择 | 第27-28页 |
·半定量PCR反应中循环数的选择 | 第28页 |
·不同浓度的孕酮对上皮细胞β-防御素和β-肌动蛋白表达量的影响 | 第28-31页 |
4 讨论 | 第31-35页 |
·细胞培养 | 第31-33页 |
·半定量 RT-PCR | 第33页 |
·孕酮对输卵管上皮细胞β-防御素表达的影响 | 第33-35页 |
5 结论 | 第35-36页 |
致谢 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-42页 |
作者简介 | 第42页 |