| 符号说明 | 第1-14页 |
| 中文摘要 | 第14-18页 |
| 英文摘要 | 第18-22页 |
| 第一章 前言 | 第22-43页 |
| 1. 奶牛乳腺炎的研究概述 | 第22-26页 |
| ·发生与危害 | 第22页 |
| ·病原学 | 第22-24页 |
| ·乳腺炎的发病规律 | 第24页 |
| ·乳腺的自然防御机制 | 第24-25页 |
| ·乳腺炎的诊断 | 第25页 |
| ·乳腺炎引起的乳腺的组织化学及乳汁成分的变化 | 第25-26页 |
| ·织化学变化 | 第25-26页 |
| ·乳汁成分的变化 | 第26页 |
| 2. 奶牛乳腺炎防治的研究进展 | 第26-28页 |
| ·预防措施 | 第26-28页 |
| ·乳房炎治疗研究进展 | 第28页 |
| 3. 葡萄球菌肠毒素分子生物学与检测的研究进展 | 第28-36页 |
| ·肠毒素的分子生物学研究进展 | 第28-30页 |
| ·肠毒素的性质与作用 | 第30-31页 |
| ·金葡菌肠毒素检测方法的研究进展 | 第31-36页 |
| ·对乳腺炎金黄色葡萄球菌肠毒素和 FSST-1 检测的目的与意义 | 第36页 |
| 4. 金黄色葡萄球菌 ECMBPs 的研究进展 | 第36-43页 |
| ·ECMBPs 的概念的提出 | 第36页 |
| ·ECMBPs 的种类与结构 | 第36-39页 |
| ·几种重要的表面蛋白研究进展 | 第39-41页 |
| ·Fnbp 作为疫苗的研究进展 | 第41-43页 |
| 第二章 奶牛乳腺炎的病原菌的分离、鉴定和菌群分析 | 第43-54页 |
| 1 材料与方法 | 第43-46页 |
| ·被检奶牛 | 第43-44页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·细菌分离与培养 | 第44-46页 |
| ·统计方法 | 第46页 |
| 2. 结果 | 第46-50页 |
| ·临床型乳腺炎细菌的分离结果 | 第46-47页 |
| ·奶牛干奶期临床型乳腺炎的细菌分离情况 | 第47-48页 |
| ·隐性乳腺炎细菌的分离结果 | 第48-49页 |
| ·分离细菌需氧菌，厌氧菌和兼性厌氧菌的分类 | 第49-50页 |
| ·不同类型乳腺炎病原菌的共感染现象 | 第50页 |
| 3. 小结和讨论 | 第50-54页 |
| ·不同类型乳腺炎病原菌类群具有不同的特点 | 第50-51页 |
| ·酵母菌作为一种新型乳腺炎病原菌 | 第51页 |
| ·葡萄球菌是引起奶牛乳腺炎最重要的致病菌 | 第51-52页 |
| ·链球菌仍然是乳腺炎的重要致病菌 | 第52页 |
| ·临床型乳腺炎病牛未发病乳区具有明显的带菌现象 | 第52页 |
| ·厌氧菌可以引起奶牛乳腺炎 | 第52-53页 |
| ·环境性病原菌在引起隐性乳腺炎方面起重要作用 | 第53-54页 |
| 第三章 奶牛隐性乳腺炎诊断方法的研究 | 第54-61页 |
| 1. 材料与方法 | 第54-55页 |
| ·乳样的来源 | 第54页 |
| ·隐性乳腺炎的检测方法及采样方法 | 第54页 |
| ·病原菌的分离与鉴定 | 第54页 |
| ·体细胞计数方法 | 第54页 |
| ·乳酸脱氢酶(LDH)，β--N--乙酰氨基葡萄糖苷酶（NAGase)，碱性磷酸酶’ (ALP)，酸性磷酸酶(ACP)的测定 | 第54-55页 |
| 2. 结果 | 第55-57页 |
| ·奶牛隐性乳腺炎的不同诊断方法比较 | 第55页 |
| ·隐性乳腺炎乳样细菌的分离结果 | 第55页 |
| ·不同病原菌与体细胞以及几种酶的关系 | 第55-56页 |
| ·隐性乳腺炎体细胞数与几种酶的对数间的相关性 | 第56-57页 |
| 3. 讨论 | 第57-61页 |
| ·有关奶牛隐性乳腺炎传统的诊断方法的比较 | 第57页 |
| ·有关引起奶牛隐性乳腺炎的致病菌 | 第57-58页 |
| ·有关体细胞数与乳腺炎病原菌的关系 | 第58页 |
| ·几种酶在评估奶牛隐性乳腺炎的作用 | 第58-59页 |
| ·奶牛隐性乳腺炎 SCC 和几种酶的相关性 | 第59-61页 |
| 第四章 奶牛临床型乳腺炎的治疗实验 | 第61-69页 |
| 1. 材料与方法 | 第61-62页 |
| ·病例 | 第61页 |
| ·治疗药物以及使用剂量 | 第61-62页 |
| ·临床型乳腺炎的定义 | 第62页 |
| ·临床检查和分组 | 第62页 |
| ·临床操作要求 | 第62页 |
| ·疗效判定标准 | 第62页 |
| ·顽固性乳腺炎病原的分离与鉴定 | 第62页 |
| 2. 结果与分析 | 第62-65页 |
| ·治疗效果 | 第62-63页 |
| ·顽固性乳腺炎54 个乳区的细菌分离鉴定 | 第63-64页 |
| ·顽固性乳腺炎的病例分析以及中药的治疗效果 | 第64-65页 |
| 3. 讨论 | 第65-69页 |
| ·有关不同药物对临床型乳腺炎的治疗结果 | 第65-66页 |
| ·有关中药治疗顽固性乳腺炎的思考 | 第66页 |
| ·中药治疗奶牛乳房炎的前景展望 | 第66-67页 |
| ·顽固型乳腺炎的菌群分析以及治疗 | 第67页 |
| ·对奶牛乳腺炎治疗乳腺炎治疗不同给药途径与方法的思考 | 第67-69页 |
| 第五章 多重PCR 检测奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌，无乳链球菌，停乳链球菌和酵母菌方法的建立与应用 | 第69-84页 |
| 1. 材料与方法 | 第69-77页 |
| ·参考菌株 | 第69-70页 |
| ·引物 | 第70页 |
| ·细菌 DNA 提取 | 第70页 |
| ·乳样中细菌 DNA 的提取 | 第70页 |
| ·PCR 条件的优化和 Mutiplex PCR 条件的优化 | 第70-71页 |
| ·乳样中模拟细菌感染临床标本的制备和敏感性检测 | 第71页 |
| ·临床乳样的来源与采集 | 第71页 |
| ·乳样的细菌学培养与鉴定 | 第71-72页 |
| ·多重 PCR 产物的鉴定 | 第72-77页 |
| ·统计学方法 | 第77页 |
| 2. 结果 | 第77-82页 |
| ·Mutiplex PCR 的特异性检测 | 第77-79页 |
| ·Mutiplex：PCR 对4 种乳腺炎病原菌提取 DNA 的敏感性检测 | 第79-81页 |
| ·用多重 PCR 和细菌学培养法对临床样品4 种主要致病菌的检测结果 | 第81-82页 |
| ·多重 PCR 产物的测序分析 | 第82页 |
| 3. 讨论 | 第82-83页 |
| ·用165 rRNA 与235 rRNA 之间的区域设计引物检验金黄色葡萄球菌，无如链球菌和停乳链球菌的可行性 | 第82页 |
| ·用18 S rRNA 区域的保守序列设计引物检验酵母真菌的可行性 | 第82-83页 |
| ·有关 Mutiplex PCR 方法检测的敏感性 | 第83页 |
| ·Mutiplex PCR 方法与传统培养方法有不同结果的原因分析 | 第83页 |
| 4. 结论 | 第83-84页 |
| 第六章 乳腺炎金黄色葡萄球菌肠毒素和毒素休克综合征毒素-1 的调查研究 | 第84-93页 |
| 1. 材料与方法 | 第85-87页 |
| ·细菌的来源 | 第85页 |
| ·细菌的培养和模板的提取 | 第85页 |
| ·引物的设计 | 第85-86页 |
| ·PCR | 第86页 |
| ·ELISA | 第86页 |
| ·RPLA | 第86-87页 |
| ·统计学分析 | 第87页 |
| 2 结果 | 第87-89页 |
| ·PCR 对部分乳腺炎金黄色葡萄球菌分离株的肠毒素基因和tst 基因的检测结果 | 第87页 |
| ·PCR 对金黄色葡萄球菌肠毒素基因和tst 基因的检测 | 第87-88页 |
| ·ELISA 对 PCR 阳性的金黄色葡萄球菌 SEA-SEE 肠毒素的检测结果 | 第88-89页 |
| ·RPLA 对 PCR 阳性 SEA-SED 和 TSST-1 的检测结果 | 第89页 |
| 3 讨论 | 第89-93页 |
| ·奶牛乳腺炎葡萄球菌肠毒素基因和tst 基因的流行情况 | 第89-90页 |
| ·有关肠毒素的检测方法 | 第90-91页 |
| ·有关 TSST-1 | 第91页 |
| ·有关山羊乳腺炎金黄色葡萄球菌肠毒素的流行情况 | 第91-93页 |
| 第七章 奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌 Fnbp 和Cnap 基因的调查及 Fnbp 基因的克隆与原核表达 | 第93-103页 |
| 1. 材料与方法 | 第93-96页 |
| ·实验材料 | 第93-94页 |
| ·引物的设计与合成 | 第94页 |
| ·PCR 模板 DNA 的获取 | 第94页 |
| ·PCR | 第94页 |
| ·克隆载体的构建与鉴定 | 第94-95页 |
| ·重组表达质粒的构建与鉴定 | 第95页 |
| ·重组菌的诱导表达 | 第95页 |
| ·蛋白的纯化以及 SDS-PAGE 蛋白电泳 | 第95页 |
| ·表达重组蛋白的 Western-blotting 检测 | 第95-96页 |
| 2. 结果 | 第96-101页 |
| ·测序 | 第96页 |
| ·奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌的分子调查结果 | 第96-99页 |
| ·重组表达载体质粒的PCR 与酶切结果 | 第99页 |
| ·10A 菌株的 Fnbp 的氨基酸序列以及推导的核苷酸序列 | 第99-100页 |
| ·Fnbp 蛋白的 SDS-PAGE | 第100页 |
| ·纯化蛋白的 Western-blotting 检测 | 第100-101页 |
| 3. 讨论 | 第101-103页 |
| ·FnbD 基因和 Canp 基因在奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌的存在情况 | 第101页 |
| ·Fnbp 基因的克隆与原核表达 | 第101-102页 |
| ·Fnbp 蛋白表面作为疫苗的可行性 | 第102-103页 |
| 第八章 金黄色葡萄球菌Fnbp 的纯化以及疫苗的田间免疫实验 | 第103-109页 |
| 1 材料 | 第103页 |
| 2. 方法 | 第103-105页 |
| ·菌液的处理 | 第103页 |
| ·表达蛋白的纯化—Ni-NTA 亲和层析 | 第103-104页 |
| ·蛋白定量与冻干 | 第104页 |
| ·Fnbp 表面蛋白疫苗的制备 | 第104页 |
| ·实验动物的选择 | 第104页 |
| ·免疫程序与方法 | 第104页 |
| ·检测内容与方法 | 第104-105页 |
| 3. 结果 | 第105-107页 |
| ·Fnbp 蛋白的纯化的 SDS-PAGE | 第105页 |
| ·纯化蛋白的定量 | 第105页 |
| ·体温测定结果 | 第105-106页 |
| ·实验牛奶产量的变化 | 第106-107页 |
| ·免疫奶牛血清抗体滴度变化 | 第107页 |
| 4. 讨论 | 第107-109页 |
| ·Fnbp 蛋白疫苗对奶牛体温和奶产量的影响分析 | 第107页 |
| ·间接 ELISA 测抗体效价结果分析 | 第107-108页 |
| ·还需进一步完成的工作 | 第108-109页 |
| 第九章 金黄色葡萄球菌对奶牛乳腺组织以及肥大细胞数量的影响 | 第109-116页 |
| 1.材料与方法 | 第109-110页 |
| ·材料 | 第109页 |
| ·方法 | 第109-110页 |
| 2. 结果 | 第110-111页 |
| ·细菌的分离生化鉴定结果 | 第110页 |
| ·乳腺组织的病理变化 | 第110-111页 |
| ·乳腺内肥大细胞的分布与数目 | 第111页 |
| 3. 讨论 | 第111-116页 |
| ·有关金黄色葡萄球菌引起乳腺的病理变化 | 第111-112页 |
| ·有关肥大细胞以及意义 | 第112页 |
| ·金黄色葡萄球菌对乳腺中肥大细胞数量的影响 | 第112-116页 |
| 第十章 结论 | 第116-118页 |
| 参考文献 | 第118-136页 |
| 附录 | 第136-144页 |
| 博士期间发表文章情况 | 第144-146页 |
| 致谢 | 第146-147页 |
