摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-23页 |
1 甜味蛋白BRAZZEIN研究进展 | 第12-19页 |
1.1 甜味蛋白研究概况 | 第12-16页 |
1.2 国内外利用甜味蛋白基因转化高等植物的研究进展 | 第16-19页 |
2 番茄果实特异表达启动子 | 第19-21页 |
2.1 E8启动子 | 第20页 |
2.2 2A11基因启动子 | 第20-21页 |
2.3 PG基因启动子 | 第21页 |
2.4 ACC合成酶基因启动子 | 第21页 |
3 甜味蛋白BRAZZEIN基因转化番茄的目的意义和前景展望 | 第21-23页 |
第二章 材料与方法 | 第23-36页 |
1 实验材料: | 第23页 |
1.1 番茄试材 | 第23页 |
2 实验方法: | 第23-34页 |
2.1 转化体系建立及转化载体和菌株 | 第23-24页 |
2.2 E8P1启动子的功能验证 | 第24页 |
2.3 甜味蛋白Brazzein基因的合成及其克隆 | 第24-27页 |
2.4 pBI121.B、pE8P1.B两个转化载体的构建过程及方法 | 第27-31页 |
2.5 转化植株的分子鉴定 | 第31-34页 |
3 生理水平上检测转基因植株的风味变化和糖含量比较试验 | 第34-36页 |
3.1 转甜味蛋白番茄的品尝试验设计: | 第34页 |
3.2 转基因植株中影响番茄甜度的可溶性糖含量的测定: | 第34-36页 |
第三章 结果与分析 | 第36-58页 |
1 番茄转化再生培养体系的建立 | 第36-42页 |
1.1 番茄转化再生培养流程图 | 第36-38页 |
1.2 结果分析 | 第38-42页 |
2 番茄果实特异表达启动子E8P1的克隆及功能研究 | 第42-47页 |
2.1 E8p1的序列 | 第42-43页 |
2.2 通过构建转化载体pE8P1.GUS转化番茄验证E8P1的功能 | 第43-47页 |
3 BRAZZEIN基因合成及克隆 | 第47-48页 |
3.1 PCR合成Brazzein基因并进行Brazzein T克隆 | 第47页 |
3.2 对得到的Brazzein T克隆阳性菌落进兴酶切鉴定和测序 | 第47-48页 |
4 pBI121.B、pE8P1.B载体的构建及转化到根癌农杆菌LBA4404中 | 第48-50页 |
4.1 构建好的pI121.B、pE8p1.B载体图 | 第48页 |
4.2 重组阳性克隆的分子生物学鉴定 | 第48-50页 |
4.3 pBI121.B、pE8P1.B转化到农杆菌LBA4404中 | 第50页 |
5 甜味蛋白BRAZZEIN对番茄的遗传转化 | 第50-58页 |
5.1 农杆菌介导的番茄转化及转基因植株的分子鉴定 | 第51-58页 |
第四章 讨论 | 第58-61页 |
1 番茄转化再生体系的讨论 | 第58页 |
2 E8P1启动子果实特异表达功能分析 | 第58-59页 |
3 甜味蛋白基因对番茄的遗传转化分析 | 第59-61页 |
第五章 结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
作者简历 | 第67页 |