莲(Nelumbo nucifera)几个重要基因的克隆及其序列分析
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-29页 |
| 第一节 莲的研究 | 第13-15页 |
| ·莲的分类 | 第13页 |
| ·莲的起源 | 第13页 |
| ·莲属两大类的区别及其分布 | 第13-14页 |
| ·莲的品种及其分布 | 第14-15页 |
| ·莲的实用价值 | 第15页 |
| 第二节 有关实验技术和基因的研究 | 第15-27页 |
| ·RNA的抽提 | 第15-18页 |
| ·RNA抽提的意义 | 第15-16页 |
| ·植物RNA抽提的难点及其对策 | 第16页 |
| ·材料的选取 | 第16-17页 |
| ·多糖 | 第17页 |
| ·酚类物质 | 第17页 |
| ·DNA及蛋白质 | 第17-18页 |
| ·其它 | 第18页 |
| ·抽提RNA时应注意事项 | 第18页 |
| ·查尔酮合酶(CHS) | 第18-22页 |
| ·CHS的概述 | 第18页 |
| ·CHS分子结构特征 | 第18-19页 |
| ·chs基因 | 第19-20页 |
| ·chs的表达调控 | 第20-21页 |
| ·chs的进化研究 | 第21页 |
| ·CHS的功能 | 第21-22页 |
| ·膨胀素(Expansin) | 第22-24页 |
| ·Expansin的概述 | 第22页 |
| ·Expansin的功能及其作用机理 | 第22-23页 |
| ·expansin基因家族 | 第23页 |
| ·expansin基因的表达调控 | 第23-24页 |
| ·Expansin的研究进展 | 第24页 |
| ·多酚氧化酶(PPO) | 第24-27页 |
| ·PPO的概述 | 第24-25页 |
| ·PPO分子结构特点 | 第25-26页 |
| ·ppo基因 | 第26页 |
| ·ppo基因的表达调控 | 第26页 |
| ·PPO的功能 | 第26-27页 |
| 第三节 本研究的目的与意义 | 第27-29页 |
| 第二章 莲组织总RNA的快速抽提 | 第29-34页 |
| 1 实验材料和试剂 | 第29-30页 |
| ·实验材料 | 第29页 |
| ·实验试剂 | 第29页 |
| ·实验用品的处理 | 第29-30页 |
| 2 实验方法 | 第30-31页 |
| ·RNA的抽提 | 第30页 |
| ·RNA样品得率、纯度和完整性鉴定 | 第30-31页 |
| ·紫外吸收光谱检测 | 第30页 |
| ·甲醛变性琼脂糖凝胶电泳检测 | 第30-31页 |
| ·非变性琼脂糖凝胶电泳检测 | 第31页 |
| 3 实验结果 | 第31-32页 |
| 4 讨论 | 第32-33页 |
| 小结 | 第33-34页 |
| 第三章 莲基因的克隆与序列分析 | 第34-53页 |
| 1 实验材料 | 第34页 |
| ·植物材料 | 第34页 |
| ·菌株和质粒 | 第34页 |
| ·试剂和酶 | 第34页 |
| 2 实验方法 | 第34-39页 |
| ·抽提莲组织总 RNA | 第34页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第34-35页 |
| ·PCR扩增 | 第35页 |
| ·PCR产物的回收 | 第35-36页 |
| ·PCR产物连接 | 第36页 |
| ·DH-5α感受态细胞的制备与转化 | 第36-37页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第37-39页 |
| ·菌落PCR | 第37页 |
| ·碱裂解法制备质粒DNA | 第37-39页 |
| ·阳性克隆序列的测定 | 第39页 |
| 3 实验结果及分析 | 第39-52页 |
| ·查尔酮合酶基因(chs) | 第39-44页 |
| ·chs基因的扩增、克隆及鉴定 | 第39页 |
| ·chs序列的测定及分析 | 第39-41页 |
| ·chs序列的同源性分析 | 第41-43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| ·膨胀素基因(expansin) | 第44-47页 |
| ·l expansin基因的扩增、克隆及鉴定 | 第44页 |
| ·expansin序列的测定及分析 | 第44-45页 |
| ·expansin序列同源性分析 | 第45-47页 |
| ·讨论 | 第47页 |
| ·多酚氧化酶基因(ppo) | 第47-52页 |
| ·ppo基因的扩增、克隆及鉴定 | 第47-48页 |
| ·ppo序列的测定及分析 | 第48-49页 |
| ·ppo序列同源性分析 | 第49-52页 |
| ·讨论 | 第52页 |
| 小结 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 硕士在读期间发表和待发表的论文 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-63页 |
| 附录Ⅰ 文中缩写说明 | 第63-64页 |
| 附录Ⅱ 克隆的序列 | 第64-71页 |