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基于狂犬病病毒四种重组蛋白的间接ELISA方法的比较

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
英文缩略表第11-13页
第一章 综述第13-19页
   ·狂犬病第13-15页
     ·病原学第13-15页
     ·流行病学第15页
     ·预防与控制第15页
   ·狂犬病病毒抗体的检测第15-17页
     ·小鼠血清中和试验(MNT)第16页
     ·快速荧光灶抑制试验(RFFIT)第16页
     ·间接免疫荧光法(IFA)第16-17页
     ·酶联免疫吸附试验(ELISA)第17页
   ·实验目的第17-19页
第二章 狂犬病病毒M基因的克隆与原核表达第19-34页
   ·实验材料第19-22页
     ·病毒、菌株及载体第19页
     ·试剂第19页
     ·所用溶液及配制第19-22页
     ·主要仪器设备第22页
   ·方法第22-29页
     ·RV-M基因的克隆第22-25页
     ·RV-M重组表达质粒的构建第25-27页
     ·稀有密码子(GCUA)的分析第27页
     ·重组蛋白的表达与鉴定第27页
     ·重组蛋白的Westernblot鉴定第27-28页
     ·重组蛋白的可溶性分析第28页
     ·重组蛋白的纯化第28页
     ·重组蛋白的定量分析第28-29页
   ·结果与分析第29-33页
     ·pEasy-T1-RV-M克隆载体的鉴定第29-30页
     ·阳性重组质粒的鉴定第30-31页
     ·RVM的稀有密码子的分析第31页
     ·重组蛋白的诱导表达第31-32页
     ·重组蛋白的Westernblot鉴定第32页
     ·重组蛋白的可溶性分析及纯化第32-33页
     ·RV-M蛋白浓度的定量结果第33页
   ·讨论第33-34页
第三章 基于M和全病毒检测RV抗体的间接ELISA方法的建立第34-47页
   ·实验材料第34-35页
     ·抗原及血清第34页
     ·主要试剂第34页
     ·所用溶液及配制第34-35页
     ·主要仪器设备第35页
   ·实验方法第35-38页
     ·RV-M重组蛋白间接ELISA方法的建立第35-37页
     ·用RV作为诊断抗原间接ELISA方法的建立第37-38页
   ·实验结果第38-45页
     ·基于RV-M蛋白建立的间接ELISA方法的反应条件的优化第38-41页
     ·基于RV-M的间接ELISA方法的重复性试验的结果第41-42页
     ·浓缩的RV进行RT-PCR的鉴定结果第42页
     ·用RV作为诊断抗原的间接ELISA方法的条件的优化第42-44页
     ·基于RV的间接ELISA重复性试验的评价第44-45页
   ·讨论第45-47页
第四章 间接ELISA方法的比较第47-58页
   ·实验材料第47页
     ·抗原、血清及细胞第47页
     ·试剂第47页
     ·溶液的配制第47页
     ·主要仪器设备第47页
   ·实验方法第47-49页
     ·RV的间接ELISA第47-48页
     ·RV-M的间接ELISA第48页
     ·RV-N的间接ELISA第48页
     ·RV-G的间接ELISA第48-49页
     ·RV-P的间接ELISA第49页
     ·用统计学分析检测数据第49页
     ·与商品化ELISA试剂盒的比较第49页
   ·结果与分析第49-57页
     ·RV及四种蛋白的血清检测样本的结果第49-54页
     ·临床样品的检测结果分析第54-57页
   ·讨论第57-58页
第五章 全文总结第58-59页
   ·狂犬病病毒FLURYLEP毒株M基因的克隆与原核表达第58页
   ·基于M蛋白和全病毒检测RV抗体的间接ELISA方法的建立第58页
   ·间接ELISA方法的比较第58-59页
参考文献第59-62页
致谢第62-63页
作者简历第63页

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