| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-11页 |
| 实验材料与方法 | 第11页 |
| 主要材料和试剂 | 第11-12页 |
| 实验方法 | 第12页 |
| 第一部分 糖基化磷脂酰肌醇锚定型人共刺激因子B7-1表达质粒的鉴定及其对CHO／DHFR~-细胞的转染 | 第12-16页 |
| ·GPI·B7-1表达质粒pCDNA3-GPI-B7-1的酶切鉴定 | 第12-14页 |
| ·质粒pSV40-DHFR的扩增和酶切鉴定 | 第14-15页 |
| ·脂质体介导的pCDNA3-GPI-B7-1和pSV40-DHFR双质粒共转染CHO／DHFR~-细胞 | 第15-16页 |
| 第二部分 目的蛋白GPI·B7-1在CHO／DHFR~-细胞中的稳定表达 | 第16-17页 |
| ·流式细胞术检测目的蛋白的表达 | 第16页 |
| ·直接免疫荧光染色检测目的蛋白表达 | 第16页 |
| ·GPI锚定蛋白的检测(用糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C(PIPLC)对目的蛋白进行洗脱 | 第16-17页 |
| 第三部分 目的蛋白GPI·B7-1的分离提取和对小鼠前列腺癌细胞(RM-1)细胞膜的锚定 | 第17-20页 |
| ·GPI·B7-1蛋白的分离提取 | 第17-18页 |
| ·提取的膜蛋白的浓度检测 | 第18页 |
| ·Western Blot检测目的蛋白的活性 | 第18-19页 |
| ·GPI·B7-1对RM-1小鼠前列腺癌细胞细胞膜的锚定 | 第19-20页 |
| 第四部分 糖基化磷脂酰肌醇锚定型人共刺激因子B7-1对小鼠的免疫和肿瘤负荷研究 | 第20-24页 |
| ·小鼠的免疫和免疫系统功能检测 | 第20-23页 |
| ·小鼠的肿瘤接种实验 | 第23-24页 |
| 结果 | 第24-28页 |
| 第一部分 糖基化磷脂酰肌醇锚定型人共刺激因子B7-1表达质粒的鉴定及其对CHO／DHFR~-细胞的转染 | 第25页 |
| ·质粒pCDNA3-GPI-B7-1和pSV40-DHFR的酶切鉴定 | 第25页 |
| ·细胞对G418敏感性的测定 | 第25页 |
| ·脂质体介导的基因转染 | 第25页 |
| 第二部分 目的蛋白GPI·B7-1在CHO／DHFR~-细胞中的稳定表达 | 第25-26页 |
| ·流式细胞术检测目的蛋白的表达 | 第25-26页 |
| ·直接免疫荧光染色检测目的蛋白的表达 | 第26页 |
| ·GPI锚定蛋白的检测 | 第26页 |
| 第三部分 目的蛋白GPI·B7-1的分离提取和对小鼠前列腺癌细胞(RM-1)细胞膜的锚定 | 第26-27页 |
| ·GPI·B7-1蛋白的分离提取和Western Blot | 第26-27页 |
| ·ELISA检测GPI·B7-1蛋白对肿瘤细胞膜的锚定 | 第27页 |
| 第四部分 糖基化磷脂酰肌醇锚定型人共刺激因子B7-1对小鼠的免疫和肿瘤负荷研究 | 第27-28页 |
| ·小鼠的免疫系统功能检测 | 第27-28页 |
| ·小鼠荷瘤试验结果 | 第28页 |
| 讨论 | 第28-39页 |
| 小结 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-53页 |
| 图片 | 第53-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 综述 | 第70-87页 |
| 质粒载体图 | 第87-88页 |
