| 引 言 | 第1-18页 |
| 材料与方法 | 第18-32页 |
| 1 实验材料 | 第18页 |
| 2 仪器与试剂 | 第18-21页 |
| ·菌株和克隆载体 | 第18页 |
| ·药品和酶 | 第18-19页 |
| ·主要仪器设备 | 第19页 |
| ·分析工具软件 | 第19页 |
| ·溶液试剂配制 | 第19-21页 |
| 3 实验方法 | 第21-32页 |
| ·羊血液DNA的提取 | 第21-22页 |
| ·DNA浓度和纯度的检测 | 第22页 |
| ·PTGS2基因的PCR-SSCP和PCR-RFLP检测 | 第22-25页 |
| ·引物设计 | 第22-23页 |
| ·最佳PCR反应条件和反应体系的建立 | 第23页 |
| ·SSCP检测过程 | 第23-24页 |
| ·RFLP检测过程 | 第24-25页 |
| ·PRL基因的PCR-SSCP检测 | 第25-26页 |
| ·引物设计 | 第25-26页 |
| ·PRL基因设计的两对引物最佳PCR条件 | 第26页 |
| ·SSCP检测过程 | 第26页 |
| ·PTGS2基因和PRL基因部分序列克隆和测序 | 第26-29页 |
| ·目的片段的回收-UNIQ-10柱式 | 第26页 |
| ·目的片段的回收-Gene Clean方法 | 第26-27页 |
| ·连接反应 | 第27页 |
| ·感受态细胞的制备-氯化钙法 | 第27-28页 |
| ·转化 | 第28页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第28页 |
| ·质粒DNA的小规模提取-碱裂解法 | 第28页 |
| ·质粒DNA的小量提取--试剂盒法 | 第28-29页 |
| ·测序反应 | 第29页 |
| ·统计分析方法 | 第29-32页 |
| ·基因频率 | 第29页 |
| ·基因型频率 | 第29页 |
| ·基因位点Hardy-Weinberg平衡状态的检验 | 第29-30页 |
| ·群体内遗传变异的度量指标——杂合度 | 第30页 |
| ·有效等位基因数 | 第30-31页 |
| ·多态信息含量值的计算 | 第31页 |
| ·基因型的独立性检验 | 第31页 |
| ·PTGS2基因和PRL基因与小尾寒羊高繁殖力关系的研究 | 第31-32页 |
| 结果与分析 | 第32-45页 |
| 1 PTGS2基因和PRL基因多态性检测及序列分析 | 第32-40页 |
| ·基因组DNA提取结果--从血样中提取的基因组DNA | 第32页 |
| ·PTGS2基因的PCR-SSCP和PCR-RFLP结果与分析 | 第32-34页 |
| ·PCR扩增结果 | 第32-33页 |
| ·PTGS2 基因第一对引物SSCP检测结果 | 第33页 |
| ·PTGS2 基因第二对引物 RFLP多态性检测结果 | 第33-34页 |
| ·PTGS2基因启动区的克隆与序列分析 | 第34-35页 |
| ·阳性克隆鉴定结果 | 第34页 |
| ·PTGS2基因启动区部分序列及同源性分析 | 第34-35页 |
| ·PRL基因的PCR-SSCP结果与分析 | 第35-37页 |
| ·PCR扩增结果 | 第35-36页 |
| ·SSCP多态性检测结果 | 第36-37页 |
| ·绵羊PRL基因的克隆与序列分析 | 第37-40页 |
| ·阳性克隆鉴定结果 | 第37-38页 |
| ·PRL基因部分序列及其同源性分析 | 第38-40页 |
| 2 绵羊PTGS2和PRL基因群体遗传学分析及其与小尾寒羊高繁殖力的关系 | 第40-45页 |
| ·PTGS2基因的遗传分析 | 第40-42页 |
| ·PTGS2基因频率和基因型频率 | 第40页 |
| ·PTGS2基因Hardy-Weinberg平衡的检验 | 第40-41页 |
| ·PTGS2基因遗传特性分析 | 第41页 |
| ·PTGS2基因型分布卡方检验 | 第41-42页 |
| ·PTGS2基因多态性位点与小尾寒羊产羔数的相关性分析 | 第42页 |
| ·PRL基因的遗传分析 | 第42-45页 |
| ·PRL基因频率和基因型频率 | 第42-43页 |
| ·PRL基因Hardy-Weinberg平衡的检验 | 第43页 |
| ·PRL基因的遗传特性分析 | 第43-44页 |
| ·PRL基因型分布卡方检验 | 第44页 |
| ·PRL基因多态性位点与小尾寒羊产羔数的相关性分析 | 第44-45页 |
| 讨 论 | 第45-52页 |
| 1 实验材料的选择 | 第45页 |
| 2 血液样品保存及提取 | 第45页 |
| 3 影响PCR扩增反应的因素 | 第45-47页 |
| ·模板的质量 | 第45-46页 |
| ·引物的设计 | 第46页 |
| ·引物的浓度 | 第46页 |
| ·PCR反应的温度 | 第46-47页 |
| ·Mg2+的浓度 | 第47页 |
| 4 影响PCR-SSCP检测的因素 | 第47-49页 |
| ·PCR扩增片段的长度 | 第47页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶成分 | 第47-48页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳温度和电压 | 第48页 |
| ·SSCP结果的分析 | 第48-49页 |
| 5 影响PCR-RFLP检测的因素 | 第49页 |
| 6 亚克隆测序制备固体培养基应注意的问题 | 第49页 |
| 7 测序结果分析 | 第49-50页 |
| 8 检测结果对小尾寒羊产羔数影响的分析 | 第50-52页 |
| 结 论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-61页 |
| 附录 | 第61-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 作者简介 | 第68页 |
