| 缩略词 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-26页 |
| 一 转Bt基因植物研究进展 | 第10-19页 |
| 1 Bt杀虫蛋白基因 | 第10-13页 |
| 2 Bt转基因植物研究 | 第13-15页 |
| 3 昆虫对Bt转基因植物产生抗性问题及预防对策 | 第15-18页 |
| 4 Bt转基因植物安全性问题 | 第18-19页 |
| 二 使外源基因在转基因植物中高效表达的方法与策略 | 第19-25页 |
| 三 本论文研究的目的意义 | 第25-26页 |
| 第二章 crylAc、crylIe基因的改造及在大肠杆菌中的表达 | 第26-41页 |
| 一 材料与方法 | 第26-31页 |
| 二 结果与分析 | 第31-41页 |
| 1 基因改造 | 第31-35页 |
| 2 原核表达载体pETAc、pETIe的构建 | 第35-38页 |
| 3 CrylAc、CrylIe蛋白在E.coli中的表达 | 第38页 |
| 4 蛋白纯化及抗体制备 | 第38-39页 |
| 5 抗血清的制备和效价测定 | 第39页 |
| 6 原核表达虫试结果 | 第39-41页 |
| 第三章 crylAc、crylIe基因在转基因烟草中的表达 | 第41-53页 |
| 一 材料与方法 | 第41-45页 |
| 二 结果与分析 | 第45-53页 |
| 1 载体构建 | 第45-48页 |
| 2 植物表达载体转化根癌农杆菌LBA4404 | 第48-49页 |
| 3 根癌农杆菌介导的烟草转化 | 第49-50页 |
| 4 转基因烟草的PCR鉴定 | 第50页 |
| 5 转基因烟草的Southern blot鉴定 | 第50-51页 |
| 6 转基因烟草的金标试纸条检测 | 第51页 |
| 7 转基因烟草虫试 | 第51-53页 |
| 第四章 马铃薯蛋白酶抑制剂Ⅱ信号肽序列使CrylAc蛋白定位高效表达 | 第53-63页 |
| 一 材料与方法 | 第53-56页 |
| 二 结果与分析 | 第56-63页 |
| 1 马铃薯蛋白酶抑制剂基因Ⅱ信号肽序列(pinⅡ)的PCR扩增 | 第56页 |
| 2 GFP的PCR扩增 | 第56-57页 |
| 3 载体构建 | 第57-59页 |
| 4 根癌农杆菌介导的烟草转化 | 第59页 |
| 5 转基因烟草的PCR鉴定 | 第59页 |
| 6 gfp基因在转基因烟草中表达的荧光显微镜观察 | 第59-60页 |
| 7 转基因烟草的Western检测 | 第60-61页 |
| 8 转基因烟草的ELISA检测 | 第61-63页 |
| 第五章 crylAc、crylIe基因在转基因玉米中的表达 | 第63-81页 |
| 一 材料与方法 | 第63-69页 |
| 二 结果与分析 | 第69-81页 |
| 1 silk启动子、cab启动子的PCR扩增 | 第69-70页 |
| 2 载体构建 | 第70-75页 |
| 3 农杆菌介导的玉米转化 | 第75-77页 |
| 4 再生植株的分子检测 | 第77-78页 |
| 5 转基因植株后代在田间、温室中的抗虫性鉴定 | 第78-79页 |
| 6 转基因植株后代的Western blot | 第79-81页 |
| 第六章 讨论与结论 | 第81-84页 |
| 参考文献 | 第84-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
