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利用ISSR分子标记和rDNA的ITS序列研究五针松亲缘关系

中文摘要第1-4页
英文摘要第4-9页
1 前言第9-24页
   ·五针松在中国的分布第9-11页
     ·红松的分布第10页
     ·华山松的分布第10页
     ·偃松的分布第10页
     ·西伯利亚红松的分布第10-11页
     ·乔松,华南五针松,海南五针松的分布第11页
     ·台湾五针松,台湾果松的分布第11页
     ·大别山五针松的分布第11页
   ·五针松的经济价值第11-12页
     ·红松第11-12页
     ·华山松第12页
     ·偃松第12页
     ·西伯利亚红松第12页
   ·五针松的研究概况第12-15页
     ·五针松地理起源的研究第12-13页
     ·五针松比较形态学研究第13-14页
       ·五针松树脂道类型第13-14页
       ·松属种鳞排列模式研究第14页
     ·分子标记在五针松分类中的应用第14-15页
   ·ISSR分子标记技术第15-17页
     ·ISSR分子标记的原理第15-16页
     ·ISSR分子标记的优点第16页
     ·ISSR分子标记的应用第16-17页
   ·用于分子系统学研究的主要基因种类及其进化规律第17-21页
     ·叶绿体基因组第17-18页
     ·线粒体基因组第18-19页
     ·核基因组中常用的核糖体内转录间隔区(ITS)第19-21页
       ·利用rDNA的ITS序列进行系统发育研究的原理第19-20页
       ·rDNA的ITS序列在系统发育研究中的应用第20-21页
   ·目前五针松系统分类中存在的问题第21-23页
   ·本研究的目的和意义第23-24页
2 材料与方法第24-41页
   ·实验方案第24页
   ·实验材料及仪器、试剂第24-28页
     ·材料第24-25页
     ·主要仪器与试剂第25-26页
       ·主要仪器第25-26页
       ·主要试剂第26页
     ·所用溶液及配制第26-28页
   ·实验方法第28-41页
     ·ISSR实验方法第28-32页
       ·五针松基因组DNA的提取第28-29页
       ·ISSR反应体系的建立第29-30页
       ·ISSR反应扩增程序第30页
       ·ISSR-PCR引物筛选及PCR产物的检测第30页
       ·ISSR-PCR扩增产物的电泳检测第30页
       ·ISSR谱带的记录第30-31页
       ·ISSR数据的统计分析第31-32页
     ·五针松的ITS序列测定方法第32-41页
       ·ITS-1和ITS-2序列PCR扩增第32-33页
       ·ITS-1和ITS-2序列扩增产物回收第33页
       ·ITS-1和ITS-2序列的克隆第33-37页
       ·ITS-1和ITS-2的序列测定第37-39页
       ·ITS-1和ITS-2序列的分析第39-40页
       ·五针松ITS区段基因的系统发育学分析第40-41页
3 结果与分析第41-54页
   ·五针松ISSR分析第41-44页
     ·五针松总DNA的提取第41页
     ·多态位点比率第41-43页
     ·有效等位基因数ne~*第43页
     ·利用Shannon指数估测五针松各种群的遗传多样性第43页
     ·利用Nei指数估测五针松种间及种内的遗传分化第43页
     ·五针松种间遗传一致度与遗传聚类分析第43-44页
   ·五针松ITS序列分析第44-54页
     ·五针松ITS-1和ITS-2特异性引物设计第44-46页
       ·五针松ITS-1和ITS-2 PCR扩增第44-45页
       ·五针松ITS-1和ITS-2 PCR产物直接测序分析第45页
       ·ITS序列的突变位点和信息位点的分析第45-46页
     ·DNA重组体的构建及初步筛选第46页
     ·重组质粒的PCR检测鉴定结果第46-47页
     ·五针松的ITS-1和ITS-2序列第47-49页
     ·不同地区同一树种序列分析第49页
     ·ITS-1和ITS-2区序列变异性第49-50页
       ·ITS-1、5.8S rDNA和ITS-2序列测定结果第49页
       ·ITS序列长度及变异第49-50页
       ·13种五针松的ITS序列的同源性及转换/颠换分析第50页
     ·基于ITS-1和ITS-2区段基因的系统发育学分析第50-54页
       ·13种五针松总ITS基因的系统发育学分析第50-52页
       ·20种五针松总ITS基因的系统发育学分析第52-54页
4 讨论第54-60页
   ·ITS序列分析长度的选择第54页
   ·各种五针松ITS序列的变异第54-55页
   ·聚类结果分析第55-60页
     ·偃松与乔松类群形态结构相似属“同源”还是“趋同进化”第56页
     ·华山松属于乔松类群,还是红松类群第56-57页
     ·美国白皮松的归属问题第57-58页
     ·墨西哥五针松与哪种五针松亲缘关系近第58页
     ·日本五针松的归属问题第58-59页
     ·西伯利亚红松与瑞士石松,山白松与北美乔松的亲缘关系最近第59-60页
5 结论第60-61页
参考文献第61-68页
附页第68-83页
致谢第83页

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