| 致谢 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 縮略语 | 第8-9页 |
| 目次 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-28页 |
| ·真核生物互斥剪接研究进展 | 第11-20页 |
| ·剪接 | 第11-12页 |
| ·可变剪接 | 第12-13页 |
| ·可变剪接的类型 | 第13-14页 |
| ·斥剪接 | 第14-19页 |
| ·14-3-3基因的研究进展 | 第19-20页 |
| ·RNAi的研究进展 | 第20-28页 |
| ·RNAi的发现 | 第20-21页 |
| ·RNAi的分子机理 | 第21-24页 |
| ·介导RNAi的载体 | 第24-25页 |
| ·RNAi的生物功能 | 第25-26页 |
| ·RNAi的应用 | 第26-28页 |
| 第二章 实验方案设计 | 第28-30页 |
| ·研究目的及意义 | 第28页 |
| ·研究内容 | 第28-29页 |
| ·果蝇Hrp36基因双链RNA的制备 | 第28页 |
| ·果蝇S2细胞RNA干扰系统的建立 | 第28页 |
| ·果蝇14-3-3ζ基因选择性剪接相关蛋白的研究 | 第28-29页 |
| ·技术路线 | 第29-30页 |
| 第三章 果蝇S2细胞RNAi体系的建立 | 第30-41页 |
| ·材料与试剂 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-36页 |
| ·引物设计 | 第31-32页 |
| ·PCR扩增 | 第32页 |
| ·PCR产物的割胶回收(东盛公司的凝胶回收试剂盒) | 第32-33页 |
| ·PCR产物的T载体连接反应 | 第33页 |
| ·E.coli TG1感受态细胞的制备 | 第33页 |
| ·连接产物转化感受态细胞 | 第33-34页 |
| ·阳性菌落扩大培养及质粒提取 | 第34页 |
| ·使用AxyGEN Plasmid Miniprep Kit抽提质粒DNA | 第34-35页 |
| ·重组质粒酶切鉴定 | 第35页 |
| ·使用RiboMAXTM Large Scale RNA Production System-T7 Kit体外转录RNA | 第35-36页 |
| ·dsRNA浓度的测定 | 第36页 |
| ·重组质粒插入片段序列测序 | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-39页 |
| ·黑腹果蝇Hrp36基因的克隆 | 第36-37页 |
| ·Hrp36双链RNA的合成 | 第37-39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| ·双链RNA的设计 | 第39页 |
| ·RNA合成的量与时问的关系 | 第39-41页 |
| 第四章 果蝇S2细胞RNAi干扰体系的建立 | 第41-50页 |
| ·材料与试剂 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-44页 |
| ·引物设计 | 第41页 |
| ·dsRNA脂质体转染果蝇S2细胞 | 第41-42页 |
| ·dsRNA非脂质体转染果蝇S2细胞 | 第42页 |
| ·干扰后果蝇S2细胞RNA的提取 | 第42页 |
| ·使用Invitrogen SuperScriptⅢ 1st Strand cDNA synthesis Kit进行逆转录 | 第42-43页 |
| ·细胞冻存 | 第43页 |
| ·细胞复苏 | 第43-44页 |
| ·结果分析 | 第44-48页 |
| ·Hrp36双链RNA干扰果蝇S2细胞干扰效果检测 | 第44-46页 |
| ·Hrp36双链RNA干扰果蝇S2细胞后对Dscam基因选择性剪接的影响 | 第46-48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| ·影响RNA干扰效果的因素 | 第48页 |
| ·运用RNA干扰技术研究互斥剪接调控机制 | 第48-50页 |
| 第五章 参与果蝇14-3-3ζ基因可变剪接调控蛋白的相关研究 | 第50-62页 |
| ·材料与试剂 | 第50页 |
| ·实验方法 | 第50-53页 |
| ·引物设计 | 第50-53页 |
| ·结果分析 | 第53-60页 |
| ·可变剪接相关蛋白基因的克隆 | 第53-55页 |
| ·可变剪接相关蛋白双链RNA的合成 | 第55-56页 |
| ·可变剪接相关蛋白干扰效果检测 | 第56-57页 |
| ·筛选参与14-3-3ζ基因可变剪接的调控蛋白 | 第57-60页 |
| ·讨论分析 | 第60-62页 |
| ·果蝇14-3-3ζ基因可变剪接模型 | 第60-61页 |
| ·果蝇14-3-3ζ基因可变剪接调控蛋白的相互关系 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 个人简历 | 第68页 |
