对虾吞噬调控相关的miR-1功能以及siRNA结合蛋白的研究
| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 1 引言 | 第10-28页 |
| ·吞噬的作用机制 | 第10-17页 |
| ·对虾的免疫系统 | 第10-11页 |
| ·细胞的吞噬作用 | 第11-14页 |
| ·微丝骨架在吞噬中的作用 | 第14-17页 |
| ·microRNAs研究进展 | 第17-22页 |
| ·microRNAs简介 | 第17-18页 |
| ·microRNAs的作用机制 | 第18-20页 |
| ·microRNAs与肿瘤发生 | 第20-22页 |
| ·RNAi的作用机理 | 第22-26页 |
| ·RNAi的发现 | 第22-23页 |
| ·小干扰RNAs | 第23-24页 |
| ·RNAi相关蛋白 | 第24-26页 |
| ·论文的目的和研究意义 | 第26-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-56页 |
| ·材料 | 第28-35页 |
| ·试验材料 | 第28页 |
| ·试验试剂 | 第28-29页 |
| ·引物 | 第29页 |
| ·主要仪器 | 第29-30页 |
| ·常用溶液和培养基 | 第30-35页 |
| ·方法 | 第35-56页 |
| ·吞噬相关的microRNAs筛选 | 第35-38页 |
| ·测序样品准备 | 第35-36页 |
| ·miRNA测序方法 | 第36-37页 |
| ·Northern杂交 | 第37-38页 |
| ·miR-1对吞噬的调控 | 第38-44页 |
| ·miR-1在对虾中对血细胞的吞噬调控 | 第38-39页 |
| ·miR-1靶基因预测与验证 | 第39-41页 |
| ·miR-1在Raw264.7细胞中对吞噬的调控 | 第41-44页 |
| ·siRNA互作蛋白的研究 | 第44-56页 |
| ·生物素链霉素系统筛选siRNA互作蛋白 | 第44-45页 |
| ·精氨酸克隆至pet28a质粒 | 第45-50页 |
| ·精氨酸激酶诱导表达以及抗体制备 | 第50-52页 |
| ·Western blots验证质谱结果 | 第52-53页 |
| ·RNA免疫共沉淀 | 第53-56页 |
| 3 结果与分析 | 第56-83页 |
| ·吞噬相关的microRNAs筛选 | 第56-66页 |
| ·吞噬抑制剂最佳作用浓度和时间的确定 | 第56-60页 |
| ·吞噬调控相关的microRNAs高通量测序 | 第60-66页 |
| ·miR-1对吞噬的调控机制 | 第66-75页 |
| ·miR-1的序列保守性 | 第66-67页 |
| ·miR-1在对虾中对血细胞的吞噬调控 | 第67-68页 |
| ·miR-1靶基因预测和验证 | 第68-72页 |
| ·miR-1在RAW264.7中对吞噬的调控 | 第72-75页 |
| ·精氨酸激酶与siRNA的相互作用 | 第75-83页 |
| ·生物素链霉素系统筛选siRNA互作蛋白 | 第75-77页 |
| ·精氨酸激酶克隆 | 第77-78页 |
| ·精氨酸激酶抗体制备和western验证 | 第78-80页 |
| ·RNA免疫共沉淀 | 第80-83页 |
| 4 讨论 | 第83-86页 |
| 5 小结和展望 | 第86-88页 |
| 小结 | 第86-87页 |
| 展望 | 第87-88页 |
| 附录 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-94页 |
