| 目录 | 第1-6页 |
| 缩写表 | 第6-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 文献综述 | 第10-30页 |
| 细胞外钙调素研究进展 | 第10-19页 |
| 1 细胞外CaM的存在 | 第11-13页 |
| ·动物方面 | 第11页 |
| ·植物方面 | 第11-13页 |
| 2 细胞外CaM的生物学功能 | 第13-16页 |
| ·动物方面 | 第13-14页 |
| ·植物方面 | 第14-16页 |
| 3 细胞外钙调素信号转导机制 | 第16-19页 |
| ·细胞表面受体的存在 | 第16-17页 |
| ·G蛋白参与 | 第17页 |
| ·胞内信号转导途径 | 第17-19页 |
| 钙调素结合蛋白研究进展 | 第19-30页 |
| 1 CaMBPs和CaM的结合特性 | 第20-21页 |
| 2 植物CaMBPs分布 | 第21-23页 |
| 3 植物钙调素结合蛋白的功能 | 第23-29页 |
| ·细胞核中的CaMBPs | 第23-24页 |
| ·质膜CaMBPs | 第24-26页 |
| ·细胞质中的CaMBPs | 第26-28页 |
| ·细胞外的CaMBPs | 第28-29页 |
| 4 展望 | 第29-30页 |
| 引言 | 第30-32页 |
| 材料和方法 | 第32-44页 |
| 一 材料 | 第32页 |
| 二 试剂 | 第32页 |
| 三 实验方法 | 第32-44页 |
| 1 ECBP21表达载体构建及鉴定 | 第32-37页 |
| ·ECBP21表达载体的构建 | 第32-35页 |
| ·重组蛋白的表达及鉴定 | 第35-37页 |
| 2 重组ECBP21蛋白纯化 | 第37-39页 |
| ·利用HIS亲和层析柱纯化重组ECBP21蛋白 | 第37-39页 |
| ·CaM亲和层析纯化(变性条件) | 第39页 |
| 3 抗体制备 | 第39-41页 |
| ·SDS-PAGE方法回收蛋白 | 第39页 |
| ·抗体制备 | 第39-40页 |
| ·免疫印迹检测抗体特异性 | 第40页 |
| ·ELISA检测抗体效价 | 第40-41页 |
| ·免疫印迹检测抗体特异性 | 第41页 |
| 4 ECBP21胶体金免疫电镜定位 | 第41-42页 |
| ·电镜样品制备 | 第41-42页 |
| ·免疫电镜检测 | 第42页 |
| 5 免疫组织化学定位 | 第42-44页 |
| ·免疫组化材料包埋 | 第42页 |
| ·免疫组化过程 | 第42-44页 |
| 试验结果与分析 | 第44-63页 |
| 1 ECBP21表达载体构建及鉴定 | 第44-48页 |
| ·ECBP21表达载体构建 | 第44-45页 |
| ·重组蛋白的表达及鉴定 | 第45-46页 |
| ·重组表达ECBP21融合蛋白的CaM结合特性检测: | 第46-47页 |
| ·重组ECBP21融合蛋白在大肠杆菌细胞中的分布 | 第47-48页 |
| 2 ECBP21蛋白纯化 | 第48-52页 |
| ·利用HIS结合层析柱纯化ECBP21融合蛋白 | 第48-51页 |
| ·CaM亲和层析纯化ECBP21 | 第51-52页 |
| 3 抗体制备 | 第52-54页 |
| ·SDS-PAGE方法回收蛋白 | 第52-53页 |
| ·抗体制备 | 第53页 |
| ·ECBP21抗体特异性检测 | 第53-54页 |
| 4 胶体金电镜定位 | 第54-61页 |
| 5 免疫组织化学分析 | 第61-63页 |
| 讨论 | 第63-67页 |
| 1 ECBP21蛋白纯化及抗体制备 | 第63-64页 |
| 2 ECBP21金标定位 | 第64-66页 |
| 3 ECBP21免疫组化研究 | 第66-67页 |
| 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 个人简历 | 第79页 |