1 引言 | 第1-8页 |
2 实验材料与方法 | 第8-16页 |
2.1 实验材料 | 第8-10页 |
2.2 实验方法 | 第10-16页 |
2.2.1 毕赤酵母重组表达载体pPIC9K-P2的构建 | 第10-12页 |
2.2.2 毕赤酵母重组表达载体pPIC9K-P2电转化毕赤酵母GS115 | 第12-13页 |
2.2.3 重组毕赤酵母菌株的筛选 | 第13-14页 |
2.2.4 重组毕赤酵母菌种的保存 | 第14页 |
2.2.5 重组毕赤酵母菌株的诱导表达 | 第14页 |
2.2.6 表达产物的初步纯化、检测和鉴定 | 第14-16页 |
3 实验结果 | 第16-23页 |
3.1 毕赤酵母重组表达载体的构建和鉴定 | 第16页 |
3.2 重组表达载体的电转化 | 第16-20页 |
3.3 重组毕赤酵母菌株的筛选 | 第20-21页 |
3.4 表达产物的检测及鉴定结果 | 第21-23页 |
4 讨论 | 第23-30页 |
4.1 重组表达载体pPIC9K-P2的构建 | 第23页 |
4.2 电转化 | 第23页 |
4.3 表达载体与宿主染色体整合 | 第23-26页 |
4.4 G418筛选高拷贝菌株 | 第26-27页 |
4.5 外源基因在毕赤酵母中的表达 | 第27-30页 |
5 结论 | 第30-31页 |
文献综述 | 第31-39页 |
参考文献 | 第39-46页 |
致谢 | 第46页 |