| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-25页 |
| 1 甘油的简介和研究历史 | 第11-13页 |
| ·甘油的应用领域 | 第11-12页 |
| ·甘油的生物合成 | 第12-13页 |
| 2 1,3-丙二醇的简介和研究历史 | 第13-19页 |
| ·1,3-丙二醇的合成方法及研究进展 | 第13-17页 |
| ·1,3—丙二醇的生物合成 | 第17-18页 |
| ·葡萄糖发酵生产1,3—丙二醇的设想 | 第18-19页 |
| 3 生物合成中的代谢调控 | 第19-25页 |
| ·代谢调控实验技术 | 第19-22页 |
| ·论文的目的和意义 | 第22-25页 |
| 第二章 实验方法 | 第25-39页 |
| 1 实验材料及仪器: | 第25-28页 |
| ·实验材料 | 第25-26页 |
| ·培养基 | 第26页 |
| ·实验溶液 | 第26-28页 |
| ·实验仪器 | 第28页 |
| 2 实验方法 | 第28-39页 |
| ·产甘油重组质粒的构建 | 第28-33页 |
| ·产1,3-丙二醇重组质粒的构建 | 第33-34页 |
| ·利用Red重组技术敲除目的基因 | 第34-36页 |
| ·对构建的各种基因工程菌进行发酵 | 第36-38页 |
| ·HPLC检测发酵样品 | 第38-39页 |
| 第三章 基因工程菌的构建及优化 | 第39-73页 |
| 1 葡萄糖到甘油代谢途径的构建 | 第39-41页 |
| ·基因工程菌E.coliDH5α/pCLG1的构建与检测 | 第39-40页 |
| ·基因工程菌E.coliDH5α/pCLG1发酵检测 | 第40-41页 |
| 2 甘油到1,3-丙二醇代谢途径的构建 | 第41-46页 |
| ·基因工程菌E.coliDH5α/pBMC与E.coliDH5α/pBMD2的构建与检测 | 第43-45页 |
| ·基因工程菌E.coliDH5α/pBMC与E.coliDH5α/pBMD2发酵检测 | 第45-46页 |
| 3 葡萄糖到1,3.丙二醇代谢途径的构建 | 第46-47页 |
| 4 代谢调控 | 第47-64页 |
| ·利用cross-over PCR技术构建表达融合蛋白的重组质粒pCLG2 | 第47-49页 |
| ·基因工程菌E.coliDH5α/pCLG2发酵检测 | 第49-50页 |
| ·Red重组技术敲除磷酸丙糖异构酶基因tpi A及甘油激酶基因glp k基因 | 第50-56页 |
| ·磷酸丙糖异构酶基因tip A及甘油激酶基因glp k基因缺陷菌株发酵检测 | 第56-59页 |
| ·基因工程菌E.coliDH5α/pBMC与E.coliDH5α/pBMD2摇瓶发酵优化 | 第59-60页 |
| ·构建低拷贝重组质粒pCLD | 第60-61页 |
| ·基因工程菌E.coliDH5α/pCLD摇瓶发酵优化 | 第61-64页 |
| 5 非诱导型基因工程菌的构建及发酵 | 第64-70页 |
| ·构建非诱导型重组质粒pPIG | 第64-65页 |
| ·非诱导型重组菌株E.coliDH5α/pPIG发酵 | 第65-66页 |
| ·构建非诱导型质粒pSCD | 第66-68页 |
| ·非诱导型重组菌株E.coliDH5α/pSCD发酵 | 第68-69页 |
| ·构建重组大肠杆菌E.coli DH5α(pCLG2/pSCD)与E.coli DH5α(pPIG/pSCD) | 第69页 |
| ·重组菌株E.coli DH5α(pCLG2/pSCD)与E.coli DH5α(pPIG/pSCD)发酵 | 第69-70页 |
| 6 小结 | 第70-73页 |
| 参考文献 | 第73-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第80-81页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第81页 |
