| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-20页 |
| ·B.subtilis 的CCR 效应 | 第8-10页 |
| ·CCR 效应 | 第8页 |
| ·CCR 效应对EMP 途径的影响 | 第8-9页 |
| ·CCR 效应对TCA 循环的影响 | 第9页 |
| ·CCR 效应对溢流代谢的影响 | 第9页 |
| ·CCR 效应对磷酸戊糖途径的影响 | 第9页 |
| ·CCR 效应对核黄素合成的影响 | 第9-10页 |
| ·CCR 效应的调控机制 | 第10-13页 |
| ·CcpA 蛋白与cre boxes 元件 | 第10-11页 |
| ·HPr 蛋白与HprK/P 双功能酶 | 第11-12页 |
| ·CCR 效应的解除对核黄素过量合成的影响 | 第12-13页 |
| ·B.subtilis 核黄素操纵子的过量表达与核黄素合成 | 第13-19页 |
| ·核黄素生物合成途径 | 第13-14页 |
| ·核黄素操纵子结构及表达调控机制 | 第14-15页 |
| ·核黄素操纵子过量表达与核黄素过量合成 | 第15-16页 |
| ·核黄素操纵子过量表达的手段 | 第16-17页 |
| ·糖代谢和能量代谢途径的改造对核黄素合成的影响 | 第17-18页 |
| ·B.subtilis 核黄素操纵子过量表达中存在的问题 | 第18页 |
| ·利用ccpA 基因的表达元件表达rib 操纵子的优势 | 第18-19页 |
| ·本文的研究目的、内容和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-31页 |
| ·实验材料 | 第20-24页 |
| ·菌株 | 第20页 |
| ·主要药品 | 第20-21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·培养基 | 第22-23页 |
| ·PCR 引物 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-31页 |
| ·B. subtilis 出发菌株的筛选 | 第24页 |
| ·B. subtilis 生长曲线的测定 | 第24-25页 |
| ·B. subtilis 染色体DNA 提取 | 第25页 |
| ·质粒的小规模提取 | 第25页 |
| ·PCR 扩增 | 第25-26页 |
| ·重叠PCR | 第26-27页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳方法 | 第27页 |
| ·DNA 片段的纯化 | 第27-28页 |
| ·DNA 片段的切胶回收和纯化 | 第28页 |
| ·DNA 的酶切反应 | 第28页 |
| ·DNA 的连接反应 | 第28-29页 |
| ·B.subtilis 24 原生质体的制备与转化 | 第29页 |
| ·核黄素摇瓶发酵 | 第29页 |
| ·核黄素浓度的测定 | 第29-31页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第31-44页 |
| ·B. subtilis 24 recA 基因的恢复 | 第31-37页 |
| ·转化子筛选平板的确定 | 第31-32页 |
| ·recA 基因片段的PCR 扩增 | 第32页 |
| ·B. subtilis 24 recA 基因缺陷的恢复 | 第32-33页 |
| ·B. subtilis 24 X1 抗生素抗性的鉴定 | 第33-35页 |
| ·B. subtilis 24X1 的生长特性和产核黄素能力 | 第35-37页 |
| ·ccpA 基因表达元件的分析 | 第37-40页 |
| ·ccpA 基因启动子的分析 | 第37-38页 |
| ·ccpA 基因的mRNA 前导序列的特征分析 | 第38-39页 |
| ·ccpA 基因终止子的分析 | 第39-40页 |
| ·同源重组片段C1-R-C2 的拼接 | 第40-42页 |
| ·目标DNA 片段的PCR 扩增 | 第40-41页 |
| ·重叠延伸PCR 构建C1-R-C2 片段 | 第41-42页 |
| ·rib 操纵子结构基因在ccpA 位点的整合 | 第42-44页 |
| ·C1-R-C2 片段的转化和转化子筛选 | 第42页 |
| ·转化子的PCR 鉴定 | 第42-44页 |
| 第四章 结论与展望 | 第44-45页 |
| ·主要结论 | 第44页 |
| ·展望 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 致谢 | 第50页 |
