| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 胚胎干细胞研究进展 | 第11-24页 |
| ·胚胎干细胞的建系概况 | 第12-13页 |
| ·以小鼠为材料的小鼠胚胎干细胞系 | 第12页 |
| ·以人为材料的人类胚胎干细胞系 | 第12-13页 |
| ·以其他动物为材料的胚胎干细胞系 | 第13页 |
| ·原始生殖细胞的研究概况 | 第13-14页 |
| ·ES 细胞生物学特性 | 第14-15页 |
| ·无限增殖性 | 第14页 |
| ·分化潜能性 | 第14页 |
| ·种系传递性 | 第14-15页 |
| ·ES 细胞分离和克隆方法 | 第15-16页 |
| ·全胚培养法 | 第15页 |
| ·ICM 培养法 | 第15页 |
| ·延迟着床法 | 第15页 |
| ·热休克处理法 | 第15页 |
| ·离散卵裂球法 | 第15-16页 |
| ·PGCs 培养法 | 第16页 |
| ·ES 细胞的鉴定 | 第16-18页 |
| ·ES 细胞的形态学特征 | 第16页 |
| ·碱性磷酸酶活性 | 第16页 |
| ·阶段特异性胚胎细胞表面抗原的表达 | 第16-17页 |
| ·端粒酶活性 | 第17页 |
| ·染色体数目与结构 | 第17页 |
| ·ES 细胞的体外分化 | 第17-18页 |
| ·体内分化试验 | 第18页 |
| ·嵌合体试验 | 第18页 |
| ·建立和维持ES 细胞系的条件 | 第18-20页 |
| ·影响ES 细胞增殖的因素 | 第18-19页 |
| ·影响ES 细胞分化的因素 | 第19-20页 |
| ·维持胚胎干细胞自我更新分子机制 | 第20-23页 |
| ·LIF-LIFR/gp130-JAK-STAT3 途径 | 第20-21页 |
| ·BMP 信号通路 | 第21页 |
| ·Wnt 信号通路 | 第21-22页 |
| ·Oct4 在ES 细胞中维持自我更新和促进分化的双重作用 | 第22页 |
| ·同源蛋白转录因子Nanog | 第22-23页 |
| ·ES 细胞的应用前景 | 第23页 |
| ·ES 细胞临床应用所面临的技术性问题 | 第23-24页 |
| 第二章 昆明小鼠胎儿成纤维细胞的分离、培养 | 第24-34页 |
| ·材料 | 第24-25页 |
| ·试验动物 | 第24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24页 |
| ·试验用品 | 第24页 |
| ·主要试剂及药品 | 第24-25页 |
| ·主要溶液的配制 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-28页 |
| ·小鼠超数排卵及配种 | 第25页 |
| ·MEF 的分离、培养 | 第25-27页 |
| ·MEF 瑞氏-姬姆萨染色 | 第27页 |
| ·MEF 生长曲线的绘制 | 第27页 |
| ·MEF 的冻存与复苏 | 第27-28页 |
| ·结果 | 第28-31页 |
| ·三种日龄胎儿PMEF 及MEF 细胞的培养结果 | 第28页 |
| ·妊娠14.5 d 小鼠胎儿培养的MEF 细胞的生长行为、形态特征 | 第28页 |
| ·MEF 瑞氏-姬姆萨染色后的形态学观察 | 第28-29页 |
| ·MEF 生长曲线检测 | 第29-30页 |
| ·冻存与复苏 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-33页 |
| ·小鼠胚胎日龄与成纤维细胞 | 第31-32页 |
| ·成纤维细胞的分离与传代 | 第32页 |
| ·成纤维细胞的冷冻保存 | 第32-33页 |
| ·小结 | 第33-34页 |
| 第三章 昆明小鼠胚胎干细胞分离、培养 | 第34-58页 |
| ·材料 | 第34-35页 |
| ·试验动物 | 第34页 |
| ·主要仪器设备 | 第34页 |
| ·试验用品 | 第34页 |
| ·主要试剂及药品 | 第34-35页 |
| ·主要培养液的配制 | 第35页 |
| ·试验方法 | 第35-39页 |
| ·不同接种密度饲养层德制备 | 第35-36页 |
| ·ES 细胞的分离、培养与传代 | 第36-38页 |
| ·不同接种密度饲养层培养体系的检测 | 第38页 |
| ·ES 细胞的鉴定 | 第38-39页 |
| ·结果 | 第39-50页 |
| ·不同接种密度的饲养层细胞生长状况 | 第39-40页 |
| ·收集的胚胎及生长状况 | 第40-42页 |
| ·比较桑椹胚和囊胚对分离ES 细胞的影响 | 第42页 |
| ·消化液对昆明白小鼠ES 细胞分离传代的影响 | 第42页 |
| ·不同接种密度饲养层培养体系的优化筛选 | 第42-47页 |
| ·ES 细胞的鉴定 | 第47-50页 |
| ·讨论 | 第50-57页 |
| ·品系及胚龄对ES 细胞分离培养的影响 | 第50-51页 |
| ·饲养层对ES 细胞分离克隆的影响 | 第51-53页 |
| ·离散扩增时机与消化液浓度和消化方法对ICM、ES 细胞集落的影响 | 第53-55页 |
| ·ES 细胞培养条件的选择 | 第55-56页 |
| ·小鼠ES 细胞的鉴定 | 第56-57页 |
| ·小结 | 第57-58页 |
| 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 英文缩略语 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 作者简介 | 第67页 |
