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绒山羊毛囊体外培养及雌二醇对毛囊Bcl-2、Bax表达的影响

摘要第1-5页
Abstract第5-14页
1 引言第14-50页
   ·绒山羊皮肤及毛囊第14-22页
     ·绒山羊皮肤结构特点第14-16页
     ·毛囊的分类及结构第16-17页
     ·毛囊的周期性变化第17-19页
     ·毛囊各种细胞生物学特性的研究第19-22页
   ·毛囊的体外培养及相关因子对其影响的研究进展第22-36页
     ·毛囊培养的研究进展第22-23页
     ·毛囊的分离方法第23-25页
     ·游离毛囊的培养第25-28页
     ·影响毛囊生长相关因子的研究进展第28-36页
   ·毛囊细胞凋亡的研究进展第36-43页
     ·细胞凋亡的概念第36-39页
     ·Bcl-2 与细胞凋亡第39-40页
     ·Bax 与细胞凋亡第40页
     ·Bc1-2 和Bax 与细胞凋亡第40-41页
     ·毛囊细胞凋亡的研究现状第41-43页
     ·细胞凋亡的研究意义第43页
   ·实时荧光定量 PCR 技术第43-48页
     ·实时定量 PCR 的技术原理第44页
     ·常用的定量 PCR 方法第44-48页
     ·实时荧光定量 PCR 技术的应用概况第48页
   ·本研究的目的及意义第48-49页
   ·研究内容和方法第49-50页
     ·主要研究内容第49页
     ·研究方法第49-50页
2 试验一 绒山羊毛囊的分离培养第50-64页
   ·材料第50页
     ·材料来源第50页
     ·主要试剂第50页
     ·主要仪器第50页
   ·离体绒山羊皮肤毛囊的分离培养第50-52页
     ·培养基的配制第50-51页
     ·毛囊的分离方法第51-52页
     ·毛囊的选取第52页
     ·毛囊分组第52页
     ·观测指标第52页
     ·统计学分析第52页
   ·试验结果第52-59页
     ·培养初级毛囊生长长度测定第52-54页
     ·初级毛囊在四种培养基中的生长曲线第54-55页
     ·初级毛囊在四种培养基中的显著性检验第55页
     ·不同培养基中体外培养的初级毛囊的形态变化第55-58页
     ·次级毛囊的培养情况第58-59页
     ·不同时间初级毛囊体外生长情况的比较第59页
   ·讨论第59-63页
     ·绒山羊毛囊的分离第59-60页
     ·绒山羊毛囊体外培养第60-62页
     ·绒山羊毛囊的体外生长分析第62-63页
   ·结论第63-64页
3 试验二 内蒙古绒山羊初级毛囊毛乳头细胞的分离培养第64-70页
   ·材料第64页
     ·材料来源第64页
     ·主要试剂第64页
     ·主要仪器第64页
   ·试验方法第64-66页
     ·培养基的配置第64页
     ·毛乳头细胞的原代培养第64-65页
     ·毛乳头细胞的传代培养及冷冻复苏第65页
     ·初级毛囊毛乳头细胞生长曲线的绘制第65页
     ·初级毛囊毛乳头细胞染色体检查第65-66页
   ·结果第66-68页
     ·绒山羊初级毛囊毛乳头细胞的原代培养第66-67页
     ·绒山羊初级毛囊毛乳头细胞的生长曲线第67-68页
     ·绒山羊初级毛囊毛乳头细胞的染色体检查第68页
   ·讨论第68-69页
   ·结论第69-70页
4 试验三 体外培养游离山羊初级毛囊与绵羊毛囊生长的比较第70-77页
   ·材料第70页
     ·材料来源第70页
     ·主要试剂第70页
     ·主要仪器第70页
   ·离体山羊初级毛囊及绵羊毛囊的分离培养第70-71页
     ·培养基的配制第70页
     ·毛囊的分离方法第70-71页
     ·毛囊的选取第71页
     ·观测指标第71页
     ·统计学分析第71页
   ·试验结果第71-75页
     ·培养毛囊生长长度测定第71-72页
     ·山羊及绵羊毛囊体外培养的生长曲线第72-73页
     ·体外培养山羊及绵羊毛囊的形态第73-75页
     ·绒山羊初级毛囊和绵羊毛囊在 Williams E 无血清培养基中的显著性检验第75页
   ·讨论第75-77页
     ·毛囊的分离第75-76页
     ·毛囊的培养第76-77页
5 试验四 17-β-雌二醇对体外培养毛囊生长的影响第77-86页
   ·材料第77-78页
     ·材料来源第77页
     ·仪器与主要试剂第77-78页
   ·试验方法第78-79页
     ·主要试剂的配制第78页
     ·绒山羊初级毛囊的分离第78-79页
     ·毛囊的选取第79页
     ·毛囊分组第79页
     ·观测指标第79页
     ·统计学分析第79页
   ·试验结果第79-84页
     ·17β-E2对绒山羊初级毛囊体外培养生长速度的影响第79-80页
     ·不同浓度17β-E2中绒山羊初级毛囊的生长曲线第80-81页
     ·17β-E2对绒山羊初级毛囊生长形态的影响第81-83页
     ·初级毛囊在添加了不同浓度17-β-雌二醇的培养基中的显著性检验第83-84页
   ·讨论第84-86页
6 试验五 山羊皮肤毛囊中 Bcl-2、Bax 基因表达第86-96页
   ·材料与方法第86-89页
     ·试验材料第86页
     ·主要仪器和试剂第86页
     ·PCR 引物的设计及合成第86-87页
     ·山羊皮肤毛囊总 RNA 的提取及检测第87-89页
     ·RT-PCR 产物cDNA 的序列测定第89页
     ·序列分析第89页
   ·结果第89-94页
     ·山羊皮肤毛囊总 RNA 的检测结果第89-90页
     ·山羊皮肤毛囊 RT-PCR 扩增结果第90-91页
     ·山羊皮肤毛囊 PCR 产物的序列分析结果第91-92页
     ·山羊 Bcl-2cDNA 与其他哺乳动物的 Bcl-2cDNA 的同源性比较第92页
     ·山羊 Bcl-2 于其它哺乳动物 Bcl-2 氨基酸序列的同源性分析第92-93页
     ·山羊 Bax cDNA 与其它哺乳动物的 Bax cDNA 的同源性比较第93-94页
     ·山羊 Bax 部分氨基酸序列与其它哺乳动物 Bax 的同源性第94页
   ·讨论第94-96页
7 试验六 17-β-雌二醇对毛囊体外培养过程中 Bcl-2、Bax mRNA 表达的影响第96-109页
   ·材料第96页
     ·试验材料第96页
     ·仪器及试剂第96页
     ·PCR 引物的设计及合成第96页
   ·方法第96-100页
     ·毛囊总 RNA 的提取第96-97页
     ·实时荧光定量 RT-PCR 检测培养毛囊 Bcl-2、Bax 表达的方法第97-100页
     ·试验数据处理第100页
   ·结果第100-107页
     ·总 RNA 的电泳检测第100-101页
     ·荧光定量 RT-PCR 检测培养的毛囊 Bcl-2、Bax 表达定量方法的确定第101-105页
     ·添加17-β-雌二醇对培养毛囊Bcl-2 和Bax 表达的影响第105-107页
   ·讨论第107-109页
8 结论第109-110页
致谢第110-111页
参考文献第111-129页
作者简介第129-130页
附录第130-131页

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