| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 文献综述 | 第10-24页 |
| 1 口蹄疫 | 第10-18页 |
| ·口蹄疫概述 | 第10-11页 |
| ·口蹄疫病毒结构及基因组组成 | 第11-12页 |
| ·2008年以来世界口蹄疫流行动态 | 第12-14页 |
| ·口蹄疫的诊断 | 第14-18页 |
| 2 TaqMan实时荧光PCR方法概述 | 第18-21页 |
| ·TaqMan技术的工作原理 | 第18-19页 |
| ·TaqMan技术的应用现状和前景 | 第19-21页 |
| 3 本论文研究目的及意义 | 第21-24页 |
| 试验部分 | 第24-64页 |
| 第一章 亚欧型/南非型FMDV阳性模板基因的克隆及多重荧光PCR检测方法的建立 | 第24-52页 |
| 1 材料与方法 | 第25-36页 |
| ·材料 | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-36页 |
| 2 结果 | 第36-48页 |
| ·一步法RT-PCR扩增产物电泳结果 | 第36页 |
| ·质粒PCR鉴定结果 | 第36页 |
| ·重组质粒测序与PCR鉴定结果 | 第36-37页 |
| ·亚欧型FMDV阳性模板反应体系的优化结果 | 第37-42页 |
| ·南非型FMDV阳性模板反应体系的优化结果 | 第42-46页 |
| ·多重real-time PCR反应体系与反应条件的确立 | 第46页 |
| ·多重real-time PCR的标准曲线及敏感性检测结果 | 第46-47页 |
| ·多重real-time PCR的特异性试验结果 | 第47页 |
| ·重复性及稳定性试验结果 | 第47-48页 |
| 3 讨论 | 第48-52页 |
| 第二章 亚欧型/南非型FMDV多重实时荧光RT-PCR检测方法的建立 | 第52-64页 |
| 1 材料和方法 | 第53-55页 |
| ·材料 | 第53页 |
| ·方法 | 第53-55页 |
| 2 结果 | 第55-61页 |
| ·扩增带T7启动子序列的重组质粒试验结果 | 第55-56页 |
| ·体外转录cRNA结果 | 第56页 |
| ·多重real-time RT-PCR检测方法反应体系的优化结果 | 第56-59页 |
| ·多重real-time RT-PCR检测方法的建立 | 第59页 |
| ·敏感性试验结果 | 第59页 |
| ·特异性试验结果 | 第59-60页 |
| ·重复性与稳定性试验结果 | 第60页 |
| ·样品检测结果 | 第60-61页 |
| 3 讨论 | 第61-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 全文总结 | 第70-72页 |
| 附录 | 第72-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
