| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-23页 |
| 1 植物内生真菌研究进展 | 第10-13页 |
| ·植物内生真菌的概念 | 第10页 |
| ·药用植物内生真菌研究进展 | 第10-13页 |
| ·丰富的药用植物资源 | 第10-11页 |
| ·药用植物内生真菌及其活性代谢产物 | 第11-12页 |
| ·存在的问题 | 第12-13页 |
| ·展望 | 第13页 |
| 2 半夏研究进展 | 第13-19页 |
| ·半夏简介 | 第13-14页 |
| ·半夏生态及在我国的分布 | 第14页 |
| ·半夏化学成分和药理作用研究 | 第14-19页 |
| 3 植物内生真菌的分类鉴定 | 第19-22页 |
| ·传统的分类鉴定方法 | 第19页 |
| ·分子生物学鉴定方法 | 第19-22页 |
| 4 课题研究内容 | 第22页 |
| 5 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 半夏内生真菌的分离 | 第23-28页 |
| 1 材料与方法 | 第23-26页 |
| ·仪器和试剂 | 第23-24页 |
| ·用具 | 第23-24页 |
| ·试剂 | 第24页 |
| ·主要设备 | 第24页 |
| ·分离培养基 | 第24页 |
| ·马铃薯葡萄糖琼脂培养基 | 第24页 |
| ·抗生素用法与用量 | 第24页 |
| ·内生真菌分离纯化方法 | 第24-25页 |
| ·样品表面消毒及预处理 | 第24-25页 |
| ·内生真菌的分离与纯化 | 第25页 |
| ·保存方法 | 第25-26页 |
| 2 结果与分析 | 第26-28页 |
| ·消毒剂及消毒时间的确定 | 第26-27页 |
| ·半夏内生真菌的分离结果 | 第27-28页 |
| 3 小结与讨论 | 第28页 |
| ·内生真菌的分离 | 第28页 |
| ·内生真菌分离方法的有效性 | 第28页 |
| 第三章 半夏内生真菌的分类鉴定 | 第28-47页 |
| 第一节 半夏内生真菌的形态学鉴定 | 第29-32页 |
| 1 材料和方法 | 第29-30页 |
| ·菌株及培养基 | 第29页 |
| ·试剂及仪器 | 第29页 |
| ·内生真菌的形态学鉴定方法 | 第29-30页 |
| ·培养性状的观察要点 | 第29-30页 |
| ·微观形态观察要点 | 第30页 |
| ·标本的制作 | 第30页 |
| ·显微摄影照片 | 第30页 |
| ·菌种的鉴定 | 第30页 |
| 2 结果与分析 | 第30-32页 |
| ·部分内生真菌形态描述 | 第30-32页 |
| 第二节 半夏内生真菌的分子生物学鉴定 | 第32-45页 |
| 1 材料与方法 | 第32-37页 |
| ·实验菌株及培养 | 第32页 |
| ·仪器和试剂 | 第32-33页 |
| ·所用器具 | 第32-33页 |
| ·主要设备 | 第33页 |
| ·试剂 | 第33页 |
| ·基因组DNA的提取及纯化 | 第33-35页 |
| ·试剂配制 | 第33-34页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第34-35页 |
| ·DNA纯度的检测 | 第35页 |
| ·紫外光吸收检测 | 第35页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第35页 |
| ·多聚酶链式反应(PCR扩增) | 第35-36页 |
| ·本实验所用引物 | 第35-36页 |
| ·扩增条件 | 第36页 |
| ·扩增产物检测 | 第36页 |
| ·扩增产物的纯化及序列的测定 | 第36页 |
| ·内生真菌的分子鉴定及系统发生关系分析 | 第36-37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-45页 |
| ·ITS区段的PCR扩增 | 第37页 |
| ·PCR扩增产物的序列测定 | 第37-38页 |
| ·在GenBank上的搜索(Blast)结果 | 第38-39页 |
| ·半夏内生真菌的分子生物学鉴定及系统发生关系分析 | 第39-45页 |
| ·基于ITS序列的分析 | 第39页 |
| ·通过rDNA ITS序列分析所揭示的半夏内生真菌多样性 | 第39-42页 |
| ·半夏内生真菌的分布 | 第42-45页 |
| 第三节 小结与讨论 | 第45-47页 |
| 1 半夏内生真菌的多样性及分布 | 第45-46页 |
| 2 分子生物学技术与内生真菌分类 | 第46-47页 |
| 第四章 半夏内生真菌的产盐酸麻黄碱的初步研究 | 第47-53页 |
| 1 材料和方法 | 第47-49页 |
| ·仪器、药材和试剂 | 第47-48页 |
| ·仪器及用品 | 第47页 |
| ·试剂 | 第47页 |
| ·试验菌株 | 第47-48页 |
| ·方法 | 第48-49页 |
| ·菌株的培养 | 第48页 |
| ·标准品的配制 | 第48页 |
| ·待测样品的制备 | 第48页 |
| ·TLC法检测 | 第48页 |
| ·HPLC色谱条件 | 第48-49页 |
| ·HPLC法计算盐酸麻黄碱的含量 | 第49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-52页 |
| ·TLC法检测盐酸麻黄碱 | 第49页 |
| ·标准品及样品的HPLC检测图谱与分析 | 第49-52页 |
| 3 小结与讨论 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-62页 |
| 附录 | 第62-65页 |
| 图版 | 第65-68页 |