| 目录 | 第1-10页 |
| 摘要 | 第10-11页 |
| ABSTRACT | 第11-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-46页 |
| ·DNA损伤反应 | 第12-17页 |
| ·简介 | 第12页 |
| ·DNA损伤的识别 | 第12-14页 |
| ·DNA损伤的信号转导 | 第14页 |
| ·细胞周期检查点 | 第14-15页 |
| ·DNA损伤修复途径 | 第15页 |
| ·DNA损伤激活的死亡机器 | 第15-17页 |
| ·肿瘤抑制因子P53 | 第17-23页 |
| ·简介 | 第17页 |
| ·p53的蛋白结构 | 第17页 |
| ·调控p53的方式 | 第17-20页 |
| ·p53的功能 | 第20-21页 |
| ·受p53转录调控的基因 | 第21-23页 |
| ·泛素连接酶PIRH2 | 第23-26页 |
| ·Pirh2的发现 | 第23页 |
| ·Pirh2的蛋白结构 | 第23-24页 |
| ·Pirh2的功能 | 第24-25页 |
| ·对Pirh2的调控 | 第25-26页 |
| ·乙酰转移酶TIP60 | 第26-32页 |
| ·简介 | 第26页 |
| ·Tip60蛋白的结构 | 第26-28页 |
| ·Tip60的功能 | 第28-31页 |
| ·对Tip60的调控 | 第31-32页 |
| ·多功能的架构蛋白AXIN | 第32-44页 |
| ·简介 | 第32页 |
| ·Axin的基因及蛋白结构与表达 | 第32-36页 |
| ·Axin的功能 | 第36-42页 |
| ·对Axin的调控 | 第42-44页 |
| ·立题背景 | 第44-46页 |
| 第二章 材料和方法 | 第46-67页 |
| ·常用药品和试剂 | 第46页 |
| ·DNA相关实验方法 | 第46-57页 |
| ·质粒载体 | 第46-50页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第50-51页 |
| ·DNA转化 | 第51页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第51-53页 |
| ·质粒DNA的工具酶处理 | 第53-54页 |
| ·DNA片段的纯化 | 第54-55页 |
| ·DNA连接反应 | 第55-56页 |
| ·PCR反应 | 第56页 |
| ·质粒的构建 | 第56页 |
| ·RNA干扰表达质粒的构建 | 第56-57页 |
| ·细胞培养及转染 | 第57-59页 |
| ·细胞培养 | 第57-58页 |
| ·瞬时转染 | 第58页 |
| ·慢病毒感染 | 第58-59页 |
| ·蛋白质相关实验方法 | 第59-64页 |
| ·免疫共沉淀 | 第59-60页 |
| ·两步法免疫共沉淀 | 第60-61页 |
| ·蛋白质的SDS-PAGE电泳与western blot分析 | 第61-62页 |
| ·细胞免疫荧光实验 | 第62页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第62-64页 |
| ·荧光素酶报告基因实验 | 第64-65页 |
| ·细胞死亡相关实验 | 第65页 |
| ·Hoechst核染色计数实验 | 第65页 |
| ·克隆斑形成实验 | 第65页 |
| ·裸鼠肿瘤移植实验 | 第65-67页 |
| 第三章 结果和讨论 | 第67-95页 |
| ·结果 | 第67-94页 |
| ·Tip60是一个新的与Axin相互作用的蛋白 | 第67-70页 |
| ·Tip60和Axin相互作用的区域 | 第70-72页 |
| ·Tip60与Pirh2竞争结合Axin | 第72-75页 |
| ·基于Axin的复合体在不同程度DNA损伤下的动态变化 | 第75-79页 |
| ·Pirh2促进肿瘤生成的能力与其泛素连接酶活性无关 | 第79-81页 |
| ·Pirh2促进肿瘤生成的分子机制 | 第81-85页 |
| ·Tip60逆转了Pirh2对p53的抑制作用 | 第85-89页 |
| ·Axin和Tip60的相互作用受ATM/ATR激酶的调节 | 第89-92页 |
| ·分离的AxinFu/+小鼠的表皮成纤维细胞中p53的转录活性在DNA损伤刺激下激活的程度弱于野生型小鼠 | 第92-93页 |
| ·Axin在不同程度DNA损伤刺激下调节p53激活阈值的模式图 | 第93-94页 |
| ·讨论 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-116页 |
| 图表索引 | 第116-119页 |
| 在学期间发表论文 | 第119-120页 |
