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福建沿海鱼类异尖线虫幼虫感染情况调查及其分类鉴定方法的研究

摘要第1-10页
Abstract第10-13页
常用英文缩写第13-14页
前言第14-24页
第一章 福建沿海养殖渔场和福建口岸进口海水鱼类异尖线虫感染情况调查及其体外存活试验第24-31页
 第一节 异尖线虫感染情况调查第24-28页
  1 材料与方法第24-25页
   ·材料第24页
     ·鱼体材料第24页
     ·剖检工具第24页
     ·其它材料第24页
   ·方法第24-25页
     ·异尖线虫的收集和保存第24页
     ·异尖线虫的活体形态学鉴定第24-25页
  2 结果第25-28页
 第二节 异尖线虫体外存活试验第28-31页
  1 材料与方法第28-29页
   ·材料第28页
     ·虫体材料第28页
     ·使用试剂及其配制第28页
     ·仪器设备第28页
   ·方法第28-29页
     ·异尖线虫在不同温度下的存活试验第28-29页
     ·异尖线虫在各种调味料中的存活试验第29页
  2 结果与分析第29-31页
   ·不同温度下存活时间第29页
   ·6℃下调味料中的存活时间第29-31页
第二章 异尖线虫三期幼虫形态学鉴定的初步研究第31-42页
 1 材料与方法第31-32页
   ·材料第31页
     ·虫体样品第31页
     ·使用试剂及其配制第31页
     ·仪器设备第31页
   ·方法第31-32页
     ·线虫标本的采集第31-32页
     ·线虫标本的固定与保存第32页
     ·异尖线虫标本的形态学鉴定第32页
 2 结果与分析第32-41页
   ·异尖线虫属幼虫Anisakis Larvae第33-36页
     ·异尖属Ⅰ型幼虫Anisakis Type I第33-34页
     ·异尖属Ⅱ型幼虫Anisakis TypeⅡ第34-36页
   ·宫脂线虫属幼虫Hysterothylacium Larvae第36-41页
     ·灰海鳗对盲囊线虫幼虫Contracaecum murenesoxi Larvae第36-38页
     ·宫脂线虫幼虫Hysterothylacium Larvae第38-41页
 3 讨论与小结第41-42页
第三章 ITS rDNA 序列及PCR-RFLP 用于异尖线虫种类鉴定的研究第42-64页
 1 材料与方法第42-51页
   ·材料第42-44页
     ·样品第42-43页
     ·酶类及试剂第43-44页
     ·仪器设备第44页
   ·方法第44-51页
     ·样品DNA 模板的制备第44-46页
     ·虫体ITS 嵌套PCR 扩增第46-47页
     ·测序样品的PCR 扩增与鉴定第47页
     ·测序样品ITS-2 基因的序列测定第47-48页
     ·DNA 序列分析第48页
     ·测序样品FJ-1、FJ-2、FJ-3、SD、SH、HY-1 的ITS 基因片段的PCR-RFLP鉴定第48-49页
     ·测序样品FJ-1、FJ-2、FJ-3、SD、SH、HY-1 的特异PCR 鉴定第49-51页
 2 结果与分析第51-63页
   ·ITS 片段PCR 扩增结果第51-52页
     ·全ITS 片段PCR 扩增结果第51页
     ·ITS-2 片段PCR 扩增结果第51-52页
   ·测序结果及分析第52-60页
     ·ITS-2 基因片段的测序结果第52-59页
     ·24 个测序样品NCBI 基因库BLAST 结果第59页
     ·DNA 序列分析结果第59-60页
   ·测序样品FJ-1、FJ-2、FJ-3、SD、SH 和HY-1 的定种鉴定第60-63页
     ·ITS 片段的PCR-RFLP 鉴定结果及分析第60-61页
     ·特异PCR 鉴定结果及分析第61-63页
 3 讨论与小结第63-64页
第四章 异尖线虫特异PCR 检测方法的建立第64-89页
 1 材料与方法第64-70页
   ·材料第64-65页
     ·样品第64页
     ·酶类及试剂第64-65页
     ·仪器设备第65页
   ·方法第65-70页
     ·引物设计第65-67页
     ·PCR 扩增条件的优化第67-68页
     ·特异PCR 引物验证第68页
     ·特异PCR 反应条件退火温度的优化第68页
     ·特异PCR 引物的敏感性检测第68-70页
 2 结果第70-86页
   ·PCR 扩增条件的优化结果第70-71页
     ·PCR 反应体系的比较结果第70页
     ·反应条件退火温度优化结果第70-71页
     ·反应条件的循环数优化结果第71页
   ·特异PCR 引物特异性的验证结果第71-77页
     ·科特异引物的特异性验证结果第71-74页
     ·属特异引物的特异性验证结果第74-75页
     ·种特异引物的特异性验证结果第75-77页
   ·特异PCR 引物退火温度的优化结果第77-81页
     ·科引物退火温度的优化结果第77-79页
     ·属引物退火温度的优化结果第79页
     ·种引物退火温度的优化结果第79-81页
   ·特异PCR 引物的敏感性检测结果第81-86页
     ·特异PCR 科引物的敏感性检测结果第81-83页
     ·特异PCR 属引物的敏感性检测结果第83-84页
     ·特异PCR 种引物的敏感性检测结果第84-86页
 3. 讨论与小结第86-89页
全文总结第89-90页
参考文献第90-96页
致谢第96-97页
附录A:攻读硕士学位期间论文发表情况第97页

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