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糖鞘脂Gb3的配体结构与配体胞内运输的关系

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
引言第10-25页
 一、文献综述第10-23页
  (一) 糖鞘脂Gb3 概述第10-12页
  (二) 志贺毒素与糖鞘脂Gb3 之间的相互作用第12-18页
  (三) 志贺毒素的细胞内运输第18-20页
  (四) Gb3 的细胞内运输第20-23页
 二、目前的研究概况第23-24页
 三、本论文的研究内容与意义第24-25页
材料与方法第25-43页
 一、材料第25-28页
  (一) 细胞第25页
  (二) 质粒第25页
  (三) 菌株第25页
  (四) 抗体第25页
  (五) 主要试剂和试剂盒第25-26页
  (六) 主要仪器第26-28页
 二、方法第28-43页
  (一) 一般实验方法第28-34页
  (二) pSU108-W34A、pSU108-D17E、pSU108-F30A 重组质粒的构建第34-40页
  (三) 野生型蛋白 STxB 和重组蛋白 W34A、D17E、F30A 的诱导表达、提取、鉴定及纯化第40-41页
  (四) 免疫荧光检测配体的胞内运输第41-43页
结果第43-65页
 一、研究 STxB 突变体的胞吞途径第43-62页
  (一) pSU108-W34A/DH5α、pSU108-D17E/DH5α、pSU108-F30A/DH5α 重组质粒的构建第43-48页
  (二) 野生型蛋白STxB 和重组蛋白W34A、D17E、F30A 的表达、鉴定及纯化第48-55页
  (三) 免疫荧光检测STxB、W34A、D17E、F30A 的胞内运输第55-62页
 二、比较不同配体的胞吞途径第62-65页
  (一) 在细胞膜表面的结合情况第62页
  (二) 定位于EE/RE 情况第62-63页
  (三) Gb3 抗体38-13 能否进入HeLa?第63-65页
讨论第65-67页
 一、突变体蛋白的制备与纯化第65页
  (一) 蛋白提取方法的选择(渗透休克法)第65页
  (二) 蛋白纯化方式的选择(离子交换层析)第65页
 二、研究 STxB 突变体的胞吞途径第65-66页
  (一) 无需15 个位点全结合就能发生内化第65页
  (二) STxB 的胞内运输依赖于 STxB-Gb3 复合物的稳定作用第65-66页
 三、比较不同配体的胞吞途径第66-67页
结论第67-68页
参考文献第68-73页
致谢第73页

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