| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-26页 |
| ·链霉菌与抗生素简介 | 第10-16页 |
| ·链霉菌概述 | 第10-12页 |
| ·抗生素简介 | 第12-13页 |
| ·聚酮抗生素与美达霉素 | 第13-16页 |
| ·抗生素糖基化与糖基转移酶 | 第16-18页 |
| ·抗生素生物合成的调控 | 第18-20页 |
| ·抗生素生物合成中的糖基合成酶基因 | 第20-22页 |
| ·抗生素生物合成基因遗传学研究常用技术——基因敲除 | 第22-24页 |
| ·传统的基因敲除 | 第22-23页 |
| ·REDIRECT~(TM)系统简介 | 第23-24页 |
| ·本项目的研究目的和意义 | 第24-26页 |
| 第二章 材料与方法 | 第26-41页 |
| ·菌株 | 第26-27页 |
| ·质粒 | 第27-28页 |
| ·试剂 | 第28-30页 |
| ·大肠杆菌质粒提取试剂 | 第28页 |
| ·链霉菌质粒提取试剂 | 第28页 |
| ·缓冲液 | 第28-29页 |
| ·抗生素及其他溶液 | 第29页 |
| ·酶和生化试剂 | 第29-30页 |
| ·培养基 | 第30-33页 |
| ·液体培养基 | 第30-31页 |
| ·发酵培养基 | 第31页 |
| ·固体培养基 | 第31-33页 |
| ·实验方法 | 第33-41页 |
| ·大肠杆菌质粒提取 | 第33-34页 |
| ·大肠杆菌培养以及常规操作 | 第34-35页 |
| ·链霉菌培养以及常规操作 | 第35-37页 |
| ·一般DNA体外操作 | 第37-38页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第38页 |
| ·纯化PCR产物 | 第38-39页 |
| ·链霉菌的发酵产物预处理及检测 | 第39-41页 |
| 第三章 美达霉素生物合成过程中C-糖基转移酶基因med-ORF8的功能初步研究 | 第41-75页 |
| ·利用Redirect~(TM)系统进行目的基因敲除分析 | 第41-58页 |
| ·方案建立: | 第41-42页 |
| ·利用Redirect~(TM)敲除目的基因以及功能验证 | 第42-58页 |
| ·med-ORF8基因互补体系的建立与产物分析 | 第58-63页 |
| ·方案建立 | 第58页 |
| ·基因互补体系建立与产物分析 | 第58-63页 |
| ·传统基因敲除突变体系的建立 | 第63-71页 |
| ·讨论 | 第71-75页 |
| 第四章 美达霉素生物合成过程中糖基合成酶基因的功能初探 | 第75-83页 |
| ·去甲基化糖基合成酶基因和糖基转移酶共表达体系获得 | 第75-78页 |
| ·糖基合成酶基因和C-糖基转移酶基因共表达体系转化 | 第78页 |
| ·糖基合成酶基因和糖基转移酶共表达体系产物分析 | 第78-79页 |
| ·讨论 | 第79-83页 |
| 第五章 美达霉素生物合成过程中新型转录调控基因med-ORF10的功能研究 | 第83-89页 |
| ·去甲基化med-ORF10敲除突变体系的获得 | 第84页 |
| ·去甲基化med-ORF10敲除突变体系的转化 | 第84-85页 |
| ·med-ORF10敲除突变体系的产物分析 | 第85-88页 |
| ·讨论 | 第88-89页 |
| 总结与展望 | 第89-91页 |
| 参考文献 | 第91-98页 |
| 硕士期间论文发表 | 第98-99页 |
| 附录 | 第99-101页 |
| 致谢 | 第101页 |
