中文摘要 | 第1-17页 |
英文摘要 | 第17-23页 |
1 文献综述 | 第23-46页 |
·马立克氏病病毒(MDV)研究进展 | 第23-33页 |
·病原学 | 第23-24页 |
·流行病学 | 第24-25页 |
·发病机理及病理变化 | 第25-28页 |
·诊断技术 | 第28-30页 |
·疾病防制策略 | 第30-33页 |
·马立克氏病病毒的致病型 | 第33-34页 |
·马立克氏病病毒的基因组结构 | 第34-36页 |
·禽反转录病毒与DNA病毒间的基因重组 | 第36-38页 |
·病毒的变异方式 | 第36页 |
·MDV 与REV 间的基因重组 | 第36-37页 |
·MDV 与ALV 间的基因重组 | 第37页 |
·禽反转录病毒与DNA病毒间的基因重组的发生机制 | 第37-38页 |
·不同病毒间遗传重组的流行病学意义 | 第38页 |
·DNA 片段克隆的载体系统 | 第38-41页 |
·质粒 | 第38-39页 |
·粘粒 | 第39-40页 |
·BAC 的优势及其发展 | 第40-41页 |
·操纵MDV 基因:依靠细菌人工染色体新技术 | 第41-44页 |
·RecA 蛋白介导的同源重组 | 第41页 |
·RecE/T 蛋白介导的同源重组 | 第41-44页 |
·本研究的意义 | 第44-46页 |
2 一株整合有 REV 长末端重复序列的 MDV 的致病性研究 | 第46-63页 |
·材料和方法 | 第47-49页 |
·材料 | 第47页 |
·蛋鸡、SPF 鸡和SPF 动物设施 | 第47页 |
·病毒与鸡胚 | 第47页 |
·疫苗 | 第47页 |
·主要仪器 | 第47页 |
·方法 | 第47-49页 |
·鸡胚成纤维细胞(CEF)的制备 | 第47-48页 |
·病毒的增殖与定量 | 第48页 |
·MDV 人工攻毒 | 第48页 |
·NDV 和AIV 油乳灭活苗的免疫和免疫反应的测定 | 第48页 |
·MDV 感染对体重的影响 | 第48-49页 |
·接种 MDV 的海蓝褐公鸡的死亡率及肿瘤发生率 | 第49页 |
·MDV 感染影响免疫器官发育的比较方法 | 第49页 |
·病理学检测 | 第49页 |
·统计学分析 | 第49页 |
·结果 | 第49-60页 |
·GX0101 毒株感染对鸡生长性能的影响 | 第49-51页 |
·对海蓝褐公鸡的影响 | 第49-50页 |
·对SPF 鸡的影响 | 第50-51页 |
·GX0101 毒株感染对NDV 疫苗免疫后抗体反应的抑制作用 | 第51-53页 |
·对海蓝褐公鸡的影响 | 第51-52页 |
·对SPF 鸡的影响 | 第52-53页 |
·GX0101 毒株感染对 AIV-H5 疫苗免疫后抗体反应的抑制作用 | 第53-55页 |
·对海蓝褐公鸡的影响 | 第53-54页 |
·对SPF 鸡的影响 | 第54-55页 |
·GX0101 毒株感染对 AIV-H9 疫苗免疫后抗体反应的抑制作用 | 第55-57页 |
·对海蓝褐公鸡的影响 | 第55-56页 |
·对SPF 鸡的影响 | 第56-57页 |
·GX0101 毒株感染后对中枢免疫器官的影响 | 第57-58页 |
·接种 MDV 的鸡的死亡率及肿瘤发生率 | 第58-60页 |
·对海蓝褐公鸡的死亡率及肿瘤发生率 | 第58页 |
·对SPF 鸡的死亡率及肿瘤发生率 | 第58-60页 |
·讨论 | 第60-63页 |
3 带有 REV-LTR 片段的 MDV 野毒株 GX0101 的BAC 克隆的构建及拯救病毒的致病性分析 | 第63-83页 |
·材料与方法 | 第64-71页 |
·材料 | 第64-65页 |
·病毒 | 第64页 |
·相关试剂 | 第64-65页 |
·动物及疫苗 | 第65页 |
·方法 | 第65-71页 |
·构建感染性 BAC 分子克隆化病毒的技术路线 | 第65页 |
·重组转基因载体质粒 pDS-pHAI-US2 的构建 | 第65-67页 |
·GX0101-BAC 克隆的构建及鉴定 | 第67-70页 |
·重组病毒的拯救及间接免疫荧光试验 | 第70-71页 |
·BAC 克隆毒bac-GX0101 与亲本毒GX0101 致病性比较 | 第71页 |
·结果与分析 | 第71-80页 |
·质粒 pDS-pHAI-US2 | 第71-73页 |
·GX0101-BAC 克隆的鉴定 | 第73-74页 |
·拯救的重组病毒的鉴定 | 第74-75页 |
·IFA 检测重组病毒bac-GX0101 | 第75页 |
·对增重的影响 | 第75-76页 |
·对 NDV 疫苗免疫后抗体反应的抑制作用 | 第76-77页 |
·对AIV-H5 疫苗免疫后抗体反应的抑制作用 | 第77-78页 |
·对AIV-H9 疫苗免疫后抗体反应的抑制作用 | 第78-79页 |
·致肿瘤性以及死亡率 | 第79页 |
·GX0101、bac-GX0101 株感染对 SPF 鸡的病理组织学检测 | 第79-80页 |
·讨论 | 第80-83页 |
4 马立克氏病病毒野毒株 GX0101 的 LTR 序列敲除及其生物学特性比较 | 第83-111页 |
·材料与方法 | 第84-92页 |
·材料 | 第84-85页 |
·细胞与病毒 | 第84页 |
·相关试剂 | 第84-85页 |
·动物及疫苗 | 第85页 |
·方法 | 第85-92页 |
·卡那霉素抗性基因的扩增 | 第85-86页 |
·REV-LTR 序列的敲除 | 第86-87页 |
·GX0101△LT R-BAC DNA 的鉴定 | 第87-88页 |
·PCR产物序列的比较与分析 | 第88页 |
·GX0101△LT R-BAC DNA 的提取 | 第88-89页 |
·重组病毒的拯救 | 第89-90页 |
·间接免疫荧光法(IFA)检测拯救的重组病毒bac-GX0101△LTR | 第90页 |
·MDV 毒人工感染方法 | 第90页 |
·MDV 感染对体重的影响 | 第90页 |
·对 NDV 和 AIV 油乳灭活苗的免疫后的免疫抑制性的比较 | 第90页 |
·斑点杂交检测 bac-GX0101 毒株与 bac-GX0101△LTR 毒株的横向传播能力 | 第90-91页 |
·病毒血症的检测 | 第91-92页 |
·结果 | 第92-108页 |
·卡那霉素的特异性扩增 | 第92页 |
·敲除GX0101 株中整合的REV-LTR 序列 | 第92-93页 |
·PCR 产物的序列测定与分析 | 第93-97页 |
·拯救病毒 bac-GX0101△LTR | 第97-98页 |
·对增重的影响 | 第98-99页 |
·对 NDV 疫苗免疫抗体反应的抑制作用 | 第99页 |
·对 AIV-H9 疫苗免疫抗体反应的抑制作用 | 第99-101页 |
·间接免疫荧光法(IFA)检测 MDV 病毒血症水平 | 第101-102页 |
·MDV-pp38 核酸探针灵敏度及特异性检测 | 第102-103页 |
·斑点分子杂交检测感染鸡的羽毛囊中的 MDV | 第103页 |
·bac-GX0101 毒株与bac-GX0101△LTR 毒株横向传播能力的比较 | 第103-108页 |
·两株 MDV 诱发鸡的死亡率和肿瘤发生率比较 | 第108页 |
·讨论 | 第108-111页 |
5 马立克氏病病毒 ICP4 基因功能的研究 | 第111-125页 |
·材料与方法 | 第111-116页 |
·材料 | 第111-112页 |
·细胞与病毒 | 第111-112页 |
·相关试剂 | 第112页 |
·动物及疫苗 | 第112页 |
·方法 | 第112-116页 |
·卡那霉素抗性基因的扩增 | 第113页 |
·ICP4 基因的敲除 | 第113-114页 |
·GX0101 △ICP4 -BAC DNA 的鉴定 | 第114-115页 |
·PCR 产物序列的比较与分析 | 第115页 |
·GX0101△ICP4 -BAC DNA 的提取 | 第115页 |
·重组病毒的拯救 | 第115-116页 |
·间接免疫荧光法(IFA)检测拯救的重组病毒bac-GX0101△ICP4 | 第116页 |
·bac-GX0101 △ICP4 与bac-GX0101 致病性比较 | 第116页 |
·结果与分析 | 第116-123页 |
·敲除MDV 毒株中的ICP4 基因 | 第116-117页 |
·PCR 产物的序列测定与分析 | 第117-119页 |
·拯救bac-GX0101△ICP4 | 第119页 |
·IFA | 第119-120页 |
·对增重的影响 | 第120页 |
·对 NDV 疫苗免疫后抗体反应的抑制作用 | 第120-121页 |
·对 AIV-H5 疫苗免疫后抗体反应的抑制作用 | 第121页 |
·对 AIV-H9 疫苗免疫后抗体反应的抑制作用 | 第121-123页 |
·致死率与致肿瘤性 | 第123页 |
·讨论 | 第123-125页 |
6 马立克氏病毒1.8-kb mRNA 基因的潜在阅读框A和C的敲除及其功能研究 | 第125-139页 |
·材料与方法 | 第126-130页 |
·材料 | 第126-127页 |
·病毒 | 第126页 |
·相关试剂 | 第126-127页 |
·动物及疫苗 | 第127页 |
·方法 | 第127-130页 |
·GX0101△(A+C) -BAC的构建 | 第127-128页 |
·GX0101△(A+C) -BAC DNA 的鉴定 | 第128页 |
·GX0101 △(A+C) -BAC DNA 拯救病毒生长特性的测定 | 第128-129页 |
·ORF(A+C)对双向启动子活性的影响 | 第129页 |
·bac-GX0101△(A+C) 与bac-GX0101 致病性比较 | 第129-130页 |
·结果 | 第130-137页 |
·1.8kb-m RNA 中ORF(A+C)缺失株的构建 | 第130-132页 |
·1.8kb-mRNA 中 ORF(A+C)对双向启动子活性的影响 | 第132-133页 |
·对增重的影响 | 第133-134页 |
·对 NDV 疫苗免疫后抗体反应的抑制作用 | 第134页 |
·对 AIV-H5 疫苗免疫后抗体反应的抑制作用 | 第134-135页 |
·对 AIV-H9 疫苗免疫后抗体反应的抑制作用 | 第135-136页 |
·致肿瘤性 | 第136-137页 |
·讨论 | 第137-139页 |
结论 | 第139-140页 |
创新之处 | 第140-141页 |
参考文献 | 第141-154页 |
致谢 | 第154-155页 |
读博士学位期间发表、录用(或起草)论文 | 第155页 |