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小鼠辣椒素受体蛋白基因cDNA克隆及蛋白质表达

中文摘要第1-7页
Abstract第7-9页
第一章 文献综述第9-22页
 1 辣椒素受体蛋白的研究概况第9-18页
   ·辣椒素受体蛋白的结构第9-11页
   ·辣椒素受体蛋白在体内的分布第11页
   ·辣椒素受体蛋白的功能第11-13页
   ·辣椒素受体蛋白的选择性竞争拮抗剂第13-14页
   ·辣椒素受体蛋白的内源性配体第14-15页
   ·TRP超家族(supper-family)和辣椒素受体蛋白相似蛋白第15-18页
 2第18-21页
   ·大肠杆菌表达系统第18页
   ·大肠杆菌表达系统的表达载体第18-21页
 3 真核表达系统第21页
   ·用于基因表达的宿主菌-酵母表达系统第21页
 4 本研究的目的第21-22页
第二章 辣椒素受体蛋白基因的克隆第22-34页
 1 材料与试剂第22页
   ·动物材料第22页
   ·菌株第22页
   ·酶与试剂盒第22页
   ·试剂第22页
 2 实验方法第22-27页
   ·小鼠背脊段总RNA的提取第22-23页
   ·用RT-PCR的方法获得辣椒素受体蛋白cDNA第23-27页
 3 实验结果与分析第27-34页
   ·小鼠总RNA提取第27页
   ·辣椒素受体蛋白基因RT-PCR第27-28页
   ·VR1基因序列分析第28-32页
   ·讨论第32-34页
第三章 VR1基因全长序列及核心序列原核pET-32a表达载体的构建及其表达第34-48页
 1 材料与试剂第34-35页
   ·菌株与质粒第34-35页
   ·工具酶及主要试剂第35页
   ·试剂第35页
 2 实验方法第35-40页
   ·引物设计及VR1基因全长序列的PCR扩增第35-36页
   ·全长融合表达载体pET-32a-VR1-F的构建及检测第36-39页
   ·VR1基因核心序列融合表达载体pET-32a-VR1-C的构建及检测第39-40页
 3 结果与分析第40-45页
   ·全长表达载体pET-32a-VR1-F的构建及表达第40-42页
   ·核心表达载体pET-32a-VR1-C的构建及表达第42-45页
 4 讨论第45-48页
   ·关于表达载体选择的讨论第45页
   ·关于影响外源蛋白质表达因素的讨论第45-48页
第四章 VRl基因核心序列原核pMAL-p2X表达载体的构建及其表达第48-57页
 1 材料与试剂第48-49页
   ·菌株与质粒第48-49页
   ·工具酶及主要试剂第49页
   ·试剂第49页
 2 实验方法第49-52页
   ·引物设计及VRl基因核心序列的PCR扩增第49-50页
   ·核心融合表达载体pMa1-p2X-C的构建及检测第50-52页
 3 结果与分析第52-55页
   ·核心表达载体pMa1-p2X-VR1-C的构建及表达第52-55页
 4 讨论第55-57页
   ·关于pMa1-p2X表达载体第55-57页
第五章 VR1基因全长序列及核心序列真核pVT102U/α表达载体的构建及其表达第57-70页
 1 材料与试剂第57-58页
   ·菌株与质粒第57页
   ·工具酶及主要试剂第57-58页
   ·真核表达培养基第58页
 2 实验方法第58-62页
   ·引物设计及VR1基因全长序列的PCR扩增第58-59页
   ·全长融合表达载体pVT102U/α-F的构建及检测第59-61页
   ·VRl基因核心序列融合表达载体pVT102U/α-VR1-C的构建及检测第61-62页
 3 结果与分析第62-68页
   ·全长表达载体pVT102U/α-VR1-F的构建及表达第62-65页
   ·核心表达载体pVT102U/α-VR1-C的构建及表达第65-68页
 4 讨论第68-70页
第六章 总结第70-71页
参考文献第71-76页
附录A:VR1基因全长序列测序报告第76-79页
附录B:pET-32a-VR1-F表达载体测序报告第79-82页
附录C:pVT102U/α-VR1-F表达载体测序报告第82-86页
附录D:pVT102U/α-VR1-C表达载体测序报告第86-87页
附录E:缩略词表第87-88页
附录F:主要试剂配置第88-92页
致谢第92-93页
作者简介第93页

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