中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-22页 |
1 辣椒素受体蛋白的研究概况 | 第9-18页 |
·辣椒素受体蛋白的结构 | 第9-11页 |
·辣椒素受体蛋白在体内的分布 | 第11页 |
·辣椒素受体蛋白的功能 | 第11-13页 |
·辣椒素受体蛋白的选择性竞争拮抗剂 | 第13-14页 |
·辣椒素受体蛋白的内源性配体 | 第14-15页 |
·TRP超家族(supper-family)和辣椒素受体蛋白相似蛋白 | 第15-18页 |
2 | 第18-21页 |
·大肠杆菌表达系统 | 第18页 |
·大肠杆菌表达系统的表达载体 | 第18-21页 |
3 真核表达系统 | 第21页 |
·用于基因表达的宿主菌-酵母表达系统 | 第21页 |
4 本研究的目的 | 第21-22页 |
第二章 辣椒素受体蛋白基因的克隆 | 第22-34页 |
1 材料与试剂 | 第22页 |
·动物材料 | 第22页 |
·菌株 | 第22页 |
·酶与试剂盒 | 第22页 |
·试剂 | 第22页 |
2 实验方法 | 第22-27页 |
·小鼠背脊段总RNA的提取 | 第22-23页 |
·用RT-PCR的方法获得辣椒素受体蛋白cDNA | 第23-27页 |
3 实验结果与分析 | 第27-34页 |
·小鼠总RNA提取 | 第27页 |
·辣椒素受体蛋白基因RT-PCR | 第27-28页 |
·VR1基因序列分析 | 第28-32页 |
·讨论 | 第32-34页 |
第三章 VR1基因全长序列及核心序列原核pET-32a表达载体的构建及其表达 | 第34-48页 |
1 材料与试剂 | 第34-35页 |
·菌株与质粒 | 第34-35页 |
·工具酶及主要试剂 | 第35页 |
·试剂 | 第35页 |
2 实验方法 | 第35-40页 |
·引物设计及VR1基因全长序列的PCR扩增 | 第35-36页 |
·全长融合表达载体pET-32a-VR1-F的构建及检测 | 第36-39页 |
·VR1基因核心序列融合表达载体pET-32a-VR1-C的构建及检测 | 第39-40页 |
3 结果与分析 | 第40-45页 |
·全长表达载体pET-32a-VR1-F的构建及表达 | 第40-42页 |
·核心表达载体pET-32a-VR1-C的构建及表达 | 第42-45页 |
4 讨论 | 第45-48页 |
·关于表达载体选择的讨论 | 第45页 |
·关于影响外源蛋白质表达因素的讨论 | 第45-48页 |
第四章 VRl基因核心序列原核pMAL-p2X表达载体的构建及其表达 | 第48-57页 |
1 材料与试剂 | 第48-49页 |
·菌株与质粒 | 第48-49页 |
·工具酶及主要试剂 | 第49页 |
·试剂 | 第49页 |
2 实验方法 | 第49-52页 |
·引物设计及VRl基因核心序列的PCR扩增 | 第49-50页 |
·核心融合表达载体pMa1-p2X-C的构建及检测 | 第50-52页 |
3 结果与分析 | 第52-55页 |
·核心表达载体pMa1-p2X-VR1-C的构建及表达 | 第52-55页 |
4 讨论 | 第55-57页 |
·关于pMa1-p2X表达载体 | 第55-57页 |
第五章 VR1基因全长序列及核心序列真核pVT102U/α表达载体的构建及其表达 | 第57-70页 |
1 材料与试剂 | 第57-58页 |
·菌株与质粒 | 第57页 |
·工具酶及主要试剂 | 第57-58页 |
·真核表达培养基 | 第58页 |
2 实验方法 | 第58-62页 |
·引物设计及VR1基因全长序列的PCR扩增 | 第58-59页 |
·全长融合表达载体pVT102U/α-F的构建及检测 | 第59-61页 |
·VRl基因核心序列融合表达载体pVT102U/α-VR1-C的构建及检测 | 第61-62页 |
3 结果与分析 | 第62-68页 |
·全长表达载体pVT102U/α-VR1-F的构建及表达 | 第62-65页 |
·核心表达载体pVT102U/α-VR1-C的构建及表达 | 第65-68页 |
4 讨论 | 第68-70页 |
第六章 总结 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-76页 |
附录A:VR1基因全长序列测序报告 | 第76-79页 |
附录B:pET-32a-VR1-F表达载体测序报告 | 第79-82页 |
附录C:pVT102U/α-VR1-F表达载体测序报告 | 第82-86页 |
附录D:pVT102U/α-VR1-C表达载体测序报告 | 第86-87页 |
附录E:缩略词表 | 第87-88页 |
附录F:主要试剂配置 | 第88-92页 |
致谢 | 第92-93页 |
作者简介 | 第93页 |